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인천대학교 나노바이오실험(1) A 자료) 4. Plasmid perp & Gel Electrophoresis

✔ 인천대학교 나노바이오실험(1) '4. Plasmid perp & Gel Electrophoresis' 자료입니다. ✔ 나노바이오실험(1) 과목은 23년 1학기에 A0를 받았습니다. ✔ 표절률에 문제가 될 수 있으니 자료를 그대로 제출하지 마시고, 참고 용도로 사용하시길 바랍니다. ✔ 실험은 학기마다 약간씩 다르게 진행하기 때문에, 실험 수업에서 알려준 작성 필수 요소에 맞추어 작성하시고, 부가적으로 참고하시는 것을 추천드립니다. 제 답안 또한 오류가 있을 수 있고, 수업마다 채점 기준 또한 다르니 순수 정답 보다 과정을 위주로 확인하시면 충분히 도움 될 것 같습니다.
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최초등록일 2024.02.15 최종저작일 2023.04
인천대 나노바이오실험 나바실 Plasmid perp
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인천대학교 나노바이오실험(1) A 자료) 4. Plasmid perp & Gel Electrophoresis
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    • 🔬 나노바이오 실험의 상세한 프로토콜과 이론적 배경 제공
    • 🧬 플라스미드 DNA 추출 및 분석 과정의 체계적인 설명
    • 📊 실험 결과 해석과 고찰을 통한 심층적인 학습 자료

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    소개

    ✔ 인천대학교 나노바이오실험(1) '4. Plasmid perp & Gel Electrophoresis' 자료입니다.
    ✔ 나노바이오실험(1) 과목은 23년 1학기에 A0를 받았습니다.
    ✔ 표절률에 문제가 될 수 있으니 자료를 그대로 제출하지 마시고, 참고 용도로 사용하시길 바랍니다.
    ✔ 실험은 학기마다 약간씩 다르게 진행하기 때문에, 실험 수업에서 알려준 작성 필수 요소에 맞추어 작성하시고, 부가적으로 참고하시는 것을 추천드립니다. 제 답안 또한 오류가 있을 수 있고, 수업마다 채점 기준 또한 다르니 순수 정답 보다 과정을 위주로 확인하시면 충분히 도움 될 것 같습니다.

    목차

    1. 실험 일시 및 장소
    2. 실험 도구
    3. 이론
    4. 실험 목표
    5. 실험 방법
    6. 결과
    7. 고찰
    8. 출처

    본문내용

    2. 실험 도구
    - 실험 기자재 : 마이크로 피펫 & 마이크로 피펫 팁 (1000 μL, 200 μL), tube (10 mL, 50 mL), tube rack, 라텍스 장갑, microwave, UV lamp, nano drop, 전기영동장치, shaking incubator, vortex mixer, centrifuge, 스티로폼 박스, 삼각플라스크
    - 시약 : E.coli 배양액, agarose powder, TAE buffer, 6X loading dye, isopropanol, 70% EtOH, gel electrophoresis buffer, EtBr, DW, P1, P2, P3 solution, ice

    3. 이론
    ① Plasmid DNA
    세균의 세포 내에 염색체와는 별개로 존재하면서 독자적으로 증식할 수 있는 DNA이다. 고리 모양을 띠고 있으며 세균의 생존에 필수적인 유전자는 아니다. 유전공학에서는 세균 내 플라스미드를 세포 밖으로 빼내고 제한효소로 끊은 뒤, 필요로 하는 유전자를 삽입하여 이를 다시 세균에 넣어 배양하는 유전자재조합 기술을 사용한다.
    ② Plasmid DNA를 추출하는 방법
    Ⅰ. 크기 차이를 이용한 plasmid 추출 및 정제 방법
    유전체 DNA가 절단되지 않도록 매우 조심히 수행하여야 한다. 먼저, EDTA, 라이소자임 및 25% 자당(sucrose) 용액을 처리하여 세포벽이 부분적으로 파괴된 원형질체를 형성한 후, 비이온성 계면활성제인 Triton X-100을 첨가하여 세포를 용해시킨다. 이후, 원심분리를 통해 상층액에 있는 플라스미드를 추출하게 된다.

    참고자료

    · 실험 미생물학, 라이프사이언스, 2013
    · 최신 미생물학 실험, 고려의학, 2017
    · 기본 의약 미생물학 및 실험, 바이오사이언스
    · Brock의 미생물학, Brock, 바이오사이언스

  • AI와 토픽 톺아보기

    • 1. Plasmid DNA
      Plasmid DNA is a circular, double-stranded DNA molecule that is found in bacteria and some eukaryotic cells. It is distinct from the linear chromosomal DNA and is capable of autonomous replication within the host cell. Plasmids often carry genes that provide the host cell with beneficial traits, such as antibiotic resistance or the ability to metabolize certain compounds. They are widely used in molecular biology and biotechnology as vectors for gene cloning, expression, and manipulation. Plasmid DNA is a crucial tool in genetic engineering, allowing researchers to introduce foreign genes into host cells and study their function or produce valuable proteins. Understanding the structure, properties, and applications of plasmid DNA is essential for advancements in fields like medicine, agriculture, and environmental science.
    • 2. Plasmid DNA 추출 방법
      Plasmid DNA extraction is a fundamental technique in molecular biology and biotechnology. There are several methods available, each with its own advantages and disadvantages. The most common methods include alkaline lysis, boiling, and commercial kits. Alkaline lysis involves breaking down the bacterial cell wall and membrane, followed by neutralization and precipitation of the plasmid DNA. Boiling is a simpler method that relies on the heat-induced denaturation of cellular components, allowing the plasmid DNA to be separated. Commercial kits, on the other hand, utilize specialized resins or columns to selectively bind and purify the plasmid DNA, often providing higher purity and yield. The choice of extraction method depends on factors such as the size and copy number of the plasmid, the desired purity, and the downstream applications. Efficient and reliable plasmid DNA extraction is crucial for various applications, including gene cloning, protein expression, and genetic engineering.
    • 3. Gel Electrophoresis
      Gel electrophoresis is a powerful analytical technique used in molecular biology and biochemistry to separate and analyze DNA, RNA, or proteins based on their size and charge. It involves the migration of charged molecules through a gel matrix under the influence of an electric field. This method allows for the separation and visualization of different DNA fragments, plasmids, or protein samples, enabling researchers to study their size, purity, and relative abundance. Gel electrophoresis is widely used in various applications, such as DNA sequencing, gene expression analysis, protein profiling, and forensic DNA fingerprinting. The technique provides valuable information about the molecular composition of samples and is an essential tool in fields like genetics, molecular biology, and biotechnology. Continuous advancements in gel electrophoresis, including the development of automated systems and specialized gels, have further expanded its capabilities and applications in scientific research and diagnostic procedures.
    • 4. Nanodrop
      The Nanodrop is a spectrophotometric instrument used for the quantification and purity assessment of nucleic acids (DNA, RNA) and proteins. It is a valuable tool in molecular biology and biochemistry laboratories, as it allows for the rapid and accurate measurement of sample concentrations and quality. The Nanodrop utilizes a small sample volume (typically 1-2 μL) to determine the absorbance of the sample at specific wavelengths, which can then be used to calculate the concentration of the target molecule. This is particularly useful for analyzing precious or limited sample sizes, as it minimizes the amount of material required for analysis. Additionally, the Nanodrop provides information on the purity of the sample by calculating the A260/A280 and A260/A230 ratios, which indicate the presence of contaminants such as proteins, phenols, or salts. The Nanodrop's ease of use, speed, and versatility make it an indispensable tool in various fields, including molecular biology, biochemistry, and biotechnology, where accurate and efficient quantification and quality assessment of nucleic acids and proteins are crucial for experimental success and data reliability.

  • 자료후기

      Ai 리뷰
      이 실험 보고서는 plasmid DNA 추출, DNA 농도 및 순도 측정, gel electrophoresis를 통해 DNA 형태 분석을 수행하여 실험 목표를 잘 달성하였습니다.

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