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[만점자료] DNA전기영동과 SDS-PAGE 실험 보고서2025.01.231. DNA 전기영동 DNA 전기영동은 PCR을 통해 유전자를 증폭시킨 후, 전기를 이용해 DNA를 크기별로 분리하는 기술이다. PCR은 DNA 변성, Primer 부착, 신장 과정을 거치며 유전자를 지수적으로 증폭시킬 수 있다. 아가로오스 겔 전기영동은 한천을 이용해 만든 겔을 통해 DNA를 크기별로 분류할 수 있다. 실험 결과에서는 원래 플라스미드, 제한효소 처리 플라스미드, PCR 증폭 산물 등의 밴드를 확인할 수 있었다. 2. SDS-PAGE SDS-PAGE는 SDS를 이용해 단백질에 균일한 음전하를 부여하고, 폴리아크릴아마...2025.01.23
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Plasmid DNA 분리 예비레포트2025.04.261. 플라스미드 DNA 플라스미드는 생장에 필수적인 염색체이며 DNA에서 물리적으로 분리 돼 있는 대표적인 에피솜 DNA분자입니다. 플라스미드는 유전자 클로닝, 유전자 전달, 외래 유전자 또는 재조합 유전자 발현, 유용 단백질 생산, 백신 상산 등으로 활용될 수 있습니다. 플라스미드 DNA는 염색체 DNA와 달리 작은 환형 DNA이기 때문에 변성 후 회복이 상대적으로 빨리 이루어집니다. 이를 이용하여 플라스미드 DNA를 분리하고 정제할 수 있습니다. 2. 플라스미드 DNA 분리 원리 플라스미드 DNA 분리의 핵심 원리는 변성된 DN...2025.04.26
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플라스미드 DNA 정제2025.01.121. 플라스미드 DNA 분리 플라스미드 DNA는 재조합 DNA 조작을 위한 운반체 DNA로 사용되며, 대장균에 플라스미드를 삽입하는 과정을 Bacterial Transformation이라고 한다. 대장균 세포에는 플라스미드 DNA와 염색체 DNA가 독립적으로 존재하므로, 플라스미드 DNA를 따로 분리하는 과정을 Purification of plasmid DNA라고 한다. 알칼리 용해법(Alkali lysis)은 높은 pH의 알칼리성 용액을 사용하여 세포벽과 세포막을 용해시킨 후, 산성 용액을 처리하여 플라스미드 DNA만을 분리해내는...2025.01.12
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이화여대 생명과학실험 A+ 리포트(SDS-PAGE, Coomassie Blue Staining)2025.01.231. SDS의 역할 및 원리 SDS는 계면활성제의 일종으로 단백질이나 핵산의 구조를 깨뜨려 선형으로 만들어주는 역할을 한다. 아미노산 두 개에 SDS 한 개가 결합하고 SDS분자의 긴 소수성 꼬리가 단백질의 골격을 감싸면서 음전하를 띈 꼬리의 끝부분이 밖으로 향하게 되므로 단백질은 자신이 본래 가지고 있던 전하와 관계없이 -전하를 띄게 된다. 2. PAGE의 원리 PAGE란 acrylamide의 중합반응으로 만들어진 gel을 이용한 전기 영동법을 말한다. acrylamide를 가교제로 중합한 polyacrylamide gel은 가교...2025.01.23
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[만점 레포트] 연세대학교 생화학실험(1) 3주차 아미노산의 분리 및 정성분석2025.05.041. 아미노산의 분리 및 정성분석 이 실험에서는 Ninhydrin 반응을 이용하여 아미노산, 펩타이드, 단백질의 발색 특성을 관찰하고, 종이 크로마토그래피와 전기영동을 통해 아미노산을 분리 및 정성 분석하는 방법을 익히는 것이 목적입니다. 실험 결과를 통해 Ninhydrin 반응의 원리, 아미노산의 분리 및 정성 분석 방법, 펩타이드의 전기이동도 차이 등을 이해할 수 있습니다. 2. Ninhydrin 반응 Ninhydrin은 아미노산, 펩타이드, 단백질과 반응하여 특유의 발색 반응을 일으킵니다. 이 반응은 pH 4~8, 100°C ...2025.05.04
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박테리아에서 DNA 분리2025.01.271. plasmid DNA 분리 실험 목적은 plasmid DNA 분리에 대해 이해하고, 그 과정 중 하나인 plasmid mini-preparation에 대해 알아보는 것이다. plasmid DNA 분리법의 공통적인 세 단계는 overnight culture, mini preparation, 순수한 plasmid DNA 분리 과정이다. mini-prep은 plasmid DNA를 소량 분리하는 방법으로, 알칼리 조건에서 세포를 파괴시켜 DNA만을 분리하는 것이다. 2. plasmid DNA 분리 시약 실험에 사용된 시약은 LB 배지...2025.01.27
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단백질의 다양한 종류와 기능2025.01.181. 단백질의 다양한 종류와 기능 이번 활동을 통해 단백질의 다양한 종류와 기능, 1~4차 단백질 구조에 대한 기본적인 내용을 알게 되었습니다. 또한 전하를 띤 물질을 분리하는 전기영동 실험 방법과 원리를 배웠습니다. 실험을 직접 수행하면서 간과 근육 시료의 단백질 분리 결과를 관찰하고, 기관별 세포 유전자 발현의 차이를 이해할 수 있었습니다. 추가로 전기영동에 영향을 미치는 요인들에 대해서도 배웠습니다. 1. 단백질의 다양한 종류와 기능 단백질은 생명체에 필수적인 거대 분자로, 다양한 종류와 기능을 가지고 있습니다. 단백질은 아미...2025.01.18
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충북대 일반생물학 11주차_종이 크로마토그래피에 의한 물질 분리 (2023최신자료)2025.05.141. 크로마토그래피 크로마토그래피는 혼합물을 흡착제에 대한 친화도의 차이를 이용하여 분리, 정제, 정성 및 정량분석을 할 수 있는 방법이다. 크로마토그래피는 이동상의 상태에 따라 기체 크로마토그래피와 액체 크로마토그래피로 나뉘며, 고정상의 상태에 따라 컬럼법과 판법으로 세분된다. 종이 크로마토그래피는 여과지 표면에 흡착되어 있는 물이 고정상이고 전개액으로 사용되는 유기용매가 이동상이 된다. 2. 광합성 색소 분리 시금치 잎에서 아세톤을 이용하여 광합성 색소를 추출하고, 여과지를 이용한 종이 크로마토그래피로 분리할 수 있다. 광합성 ...2025.05.14
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임상화학 및 실험 레포트_ 지질(실험방법, 결과, 이론, 레퍼런스 등)2025.05.141. 전기영동 전기영동은 전기장 아래에서 용액 속의 전하가 반대 전하의 전극을 향하여 이동하는 화학 현상으로, 전하량, 크기, 분자량, 전기장, 완충액, 지지체 등의 요인에 영향을 받는다. 전기영동을 통해 혈청 단백질을 분리하여 알부민, 알파1-글로불린, 알파2-글로불린, 베타-글로불린, 감마-글로불린 등의 다양한 단백질을 관찰할 수 있다. 2. 혈청 단백질 혈청 단백질에는 알부민, 알파1-글로불린, 알파2-글로불린, 베타-글로불린, 감마-글로불린이 있다. 알부민은 혈장 단백질의 주요 성분으로 다양한 기능을 수행하며, 다른 단백질들...2025.05.14
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세포 용해를 통한 단백질 추출2025.01.021. 세포 용해 방법 세포 용해(또는 세포 파괴)에 사용되는 다양한 물리적, 화학적 방법을 살펴보고, RIPA 용해 완충액을 사용하여 세포를 파괴하고 세포 단백질을 얻을 수 있다. RIPA 용해 완충액은 세포막, 핵막, 단백질 결합을 모두 분해할 수 있는 강한 계면활성제를 포함하고 있어 세포질, 핵 단백질 등 다양한 단백질을 추출할 수 있다. 2. 단백질 추출 과정 배양 중인 MCF-7 세포를 DPBS로 세척하고 세포 긁개로 세포를 모아 원심분리하여 세포 펠릿을 얻었다. 이 세포 펠릿에 RIPA 용해 완충액을 처리하여 세포를 용해하...2025.01.02
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