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단백질 분리 및 전기영동2025.01.121. Lysis buffer Lysis buffer는 세포 화합물을 분석을 위해 개방형 세포를 파괴할 때 사용되는 완충액이다. 대부분의 용해 완충액은 용해물의 산도 및 삼투압을 조절하기 위해 염(NaCl)을 함유한다. 때로는 세제(Triton X-100 또는 SDS)를 첨가하여 막 구조를 해체할 수도 있다. 또한 용해 완충액은 동물과 식물의 조직 세포 모두에서 사용할 수 있다. 2. Bradford assay Bradford assay 단백질 정량(시료 내에 포함된 단백질 양, 농도를 구하는 과정)법 중 하나로 UV-Visible ...2025.01.12
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디지털논리회로 (논리 게이트)2025.01.091. 논리 게이트의 기본 개념 논리 게이트는 디지털 회로에서 가장 기본적인 구성 요소로, 논리 연산을 수행하는 하드웨어나 소프트웨어를 의미한다. 논리 게이트는 불리언 논리를 기반으로 입력 신호에 따라 출력 신호를 결정하는 역할을 한다. 디지털 논리 게이트는 이진 데이터 0과 1을 처리하는데 사용된다. 2. 논리 게이트의 종류 논리 게이트는 기본 논리 게이트(BUFFER, NOT, AND, OR)와 확장 논리 게이트(NAND, NOR, XOR, XNOR)로 구분된다. 이들은 각각 특정 논리 연산을 수행하며, 논리 입력이 전제된 논리 ...2025.01.09
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DNA 구조 및 추출2025.01.191. DNA 구조 DNA는 데옥시리보뉴클레오타이드라고 하는 단량체가 사슬의 형태로 연결된 중합체이며, 2개의 폴리뉴클레오타이드 가닥으로 이루어진 이중나선 구조의 고분자 화합물이다. DNA를 구성하는 각각의 뉴클레오타이드는 아데닌(A), 사이토신(C), 타이민(T), 구아닌(G) 중에서 하나의 질소 함유 염기를 가진다. 이 질소 함유 염기는 피리미딘과 퓨린의 2종류로 나뉘며, 각 염기에는 작용기가 부착되어 있어 단 한 가지 종류의 짝과 수소결합을 형성할 수 있다. 2. DNA 추출 DNA 추출 과정에서 buffer1의 EDTA는 세포...2025.01.19
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Protein electro-transfer and Western blot 실험보고서2025.01.161. Western blot Western blot은 찾고자 하는 protein의 antigen epitope와 반응하는 antibody를 이용하여 단백질 혼합물 중에서 원하는 단백질(antigen)을 찾아내는 방법이다. 전기 영동을 이용하여 단백질을 gel 상에서 크기에 따라 분리한 후, membrane에 transfer한다. Membrane에 발광하는 probe가 붙어 있는 antibody를 붙여주는 항원-항체 반응을 이용하여 찾고자 하는 특정 단백질을 검출한다. 2. Nitrocellulose membrane Nitrocell...2025.01.16
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생화학실험 단백질의 정성분석2025.05.061. Western blot Western blot은 단백질을 폴리아크릴아마이드 겔에서 전기영동을 이용하여 분리하고, 니트로셀룰로오스 membrane에 옮긴 후 찾고자 하는 단백질의 항체(1차 항체)와 결합시킨 후 이 항체와 반응하는 2차 항체를 이용하여 밴드를 형상화하는 기술이다. 이 기술은 크기별 분리, 단백질을 고체 지지체로 이동, 1차 및 2차 항체를 사용하여 표적 단백질을 표시하여 시각화하는 3가지 요소를 사용한다. 2. SDS-PAGE SDS-PAGE는 질량에 의한 단백질 분리가 가능한 전기 영동법이다. 폴리아크릴아마이드...2025.05.06
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일반화학실험2 풀레포트-전기영동2025.05.141. DNA의 구조와 특성 DNA(deoxyribonucleic acid)는 생물의 세포 속 핵의 내부에서 발견되는 유전물질 중 하나이다. 인산, 당, 염기가 1:1:1의 비율로 공유 결합하고 있으며 이러한 인산, 당, 염기의 단위체를 뉴클레오타이드라고 부른다. DNA는 뉴클레오타이드가 인산이에스테르 결합으로 공유결합한 중합체로 이루어져 있으며, DNA의 염기는 A(아데닌), G(구아닌), C(사이토신), T(티민)의 4가지로 구성되어 있다. 이러한 4가지의 염기가 유전 정보를 결정하게 된다. A와 T는 2개의 수소결합으로 상보적 ...2025.05.14
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Plasmid DNA의 제한효소 절단 및 전기영동2025.01.221. 플라스미드 DNA 플라스미드는 vector의 한 종류로, 염색체와는 독립적으로 존재하는 원형의 DNA이다. 스스로 복제할 수 있고, 유전될 수 있으며 외부의 유전자를 포함해 전달될 수 있다. 2. 제한효소 제한효소는 DNA를 자를 수 있는 효소를 말하는데, DNA 분자의 특정한 염기서열에 결합해 DNA를 절단한다. 이렇게 절단된 DNA 조각은 전기영동을 통해 분리될 수 있다. 3. 전기영동 전기영동은 슬러리 내의 전하를 가진 입자들에 전기를 가하게 되면 각자 가진 전하의 반대되는 극성을 띠는 쪽으로 이동하는 현상을 말한다. 이...2025.01.22
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대장균에서 재조합 단백질의 생산과 Western blot에 관한 실험2025.01.131. IPTG IPTG는 대장균 lactose operon의 효소합성을 유도하는 강력한 유도물질이다. 보통 유도물질은 operon의 활동에 의해 만들어지는 β-D-galactosidase에 의해 대사 이용하는 것이 많지만, IPTG는 분해되지 않아 비대사성 유도물질이라고도 불린다. 또한, 고농도로 사용시 galactoside permease가 없는 세포에도 투과할 수 있기 때문에 permease가 없는 균주에서의 유도실험에도 사용된다. 2. Buffer condition Tank buffer에는 glycine과 Cl-(Tris-ba...2025.01.13
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Plasmid purification & DNA 정량 A+ report2025.01.171. Plasmid DNA transformation Plasmid DNA transformation이란 특정 종의 세포에 외부 유전자를 도입하여 그 세포가 새로운 유전자 정보를 표현하도록 하는 과정이다. 간단히 말해, ligation된 plasmid를 숙주세포 안으로 넣어주는 것이다. 일반적으로, plasmid는 작은 원형 DNA 조각으로서 bacteria와 같은 원핵생물의 세포외부에서도 독립적으로 복제할 수 있는 DNA이다. 특정 유전자 조각을 plasmid에 삽입한 후, host cell에 도입해서 해당 유전자가 host ce...2025.01.17
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생화학 실험 보고서 - 형광현미경으로 세포 관찰2025.01.271. 형광현미경 형광현미경은 형광 또는 인광을 이용하여 관찰하는 광학현미경이다. 시료에 존재하는 형광 물질이 흡수하는 특정 파장을 비추었을 때, 형광물질이 흡수한 빛이 형광 형태로 나오는 긴 파장의 빛을 감지하여 관찰할 수 있다. 형광현미경 사용 시에는 현미경 자체의 빛을 차단하기 위해 lamp를 꺼주고, 은색의 대물렌즈를 사용하며 배율은 항상 작은 것에서 큰 것의 순서로 관찰한다. 2. DAPI 염색 DAPI(4', 6-diamidino-2-phenylindole)는 형광 stain이며, DNA를 염색시킨다. DAPI로 염색하면 ...2025.01.27
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