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[생화학실험] A+, PCR 및 agarose gel 전기영동 실험2025.01.071. PCR (Polymerase Chain Reaction) PCR은 원하는 DNA band만을 증폭 가능하며, 이때 DNA polymerase가 사용된다. 30-40 cycle 정도 반복하여 증폭하고자 하는 표적 DNA의 한 DNA 사슬 3'말단에 상보적인 것과 그 반대 사슬의 3'말단에 상보적인 2개의 특정 올리고데옥시뉴클레오티드를 합성하고, 이를 원하는 절편을 함유한 변성된 한 가닥의 표적 DNA와 혼성화 반응 시킨다. DNA polymerase는 Taq DNA polymerase를 사용하며, 이는 열에 안정성이 있는 DNA...2025.01.07
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PCR 결과 확인(전기영동)2025.01.181. PCR(Polymerase Chain Reaction) PCR(polymerase chain reaction)법은 DNA 또는 RNA의 특정영역을 시험관 내에 대량으로 증폭하는 기술이다. PCR은 Denaturation, Primer Annealing, Strand Extension의 세 가지 단계로 이루어지며 세단계가 한번 반복될 때마다 처음 양의 2배로 DNA 양이 증폭된다. PCR에 사용되는 중합효소는 Taq 1 polymerase로 이것은 Thermus aquaticus로부터 추출한 효소이다. PCR 반응 산물은 seq...2025.01.18
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PCR(중합효소연쇄반응) (한글버전)2025.05.151. PCR(Polymerase Chain Reaction) PCR은 짧은 시간에 single strand DNA 분자를 수백만 개의 복사본으로 증폭시키는 생화학적 과정을 이용한 기술입니다. PCR 과정은 Denaturation, Annealing, Extension의 3단계로 진행됩니다. DNA polymerase는 PCR의 주요 구성 요소로 단일 가닥 DNA 주형에 새로운 DNA 가닥을 합성합니다. Thermal cyclers는 PCR의 온도를 순환하고 시간을 자동화하는 기기입니다. PCR 실험을 위해서는 primer 디자인, ...2025.05.15
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TECAN을 이용한 DNA quality check와 전기영동을 통한 대장균의 병원성 유형 확인2025.01.121. DNA 추출 및 정제 세포로부터 DNA를 분리하기 위해서는 먼저 세포 내 DNA가 세포 밖으로 유출될 수 있도록 세포벽 및 세포막을 분해시켜야 한다. DNA 추출은 크게 세 단계로 이루어지며, sample의 세포막을 제거하는 단계인 Lysis, DNA 구조를 제외한 불순물을 제거하는 단계인 Washing, 불순물이 필터링된 DNA 샘플만을 tube에서 용출해내는 단계인 Elution이 있다. 2. DNA quality check 추출한 DNA는 DNA quality check를 해주고, Nucleic acid quantific...2025.01.12
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RT PCR (reverse transcription) / 100점 면역학실험 레포트 (원리, 시약, RNA 추출, cDNA 합성)2025.05.051. mRNA, transcription, translation 세포가 균의 침입을 인식하면 염증을 일으키는데, 이때 mRNA의 유무를 통해 세균 침입 여부를 알 수 있다. mRNA는 단백질 합성을 지시하는 전사체이며, 전사는 DNA를 주형으로 RNA를 합성하는 과정이고, 번역은 mRNA의 염기서열을 바탕으로 단백질을 합성하는 과정이다. 2. PCR, RT-PCR, real-time PCR PCR은 특정 DNA fragment를 증폭하는 기술이며, RT-PCR은 RNA를 DNA로 역전사하여 증폭하는 방법이다. Real-time PC...2025.05.05
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서울대 생물학실험 A+ 실험 보고서 32025.05.101. DNA 클로닝과 형질전환 DNA 클로닝은 원하는 DNA 조각을 복제하여 여러 개의 DNA 복사본을 얻는 과정을 의미합니다. 이를 위해 DNA 조각은 벡터라고 불리는 DNA 분자와 재조합되는 과정을 거치며, DNA 조각은 클로닝하고자 하는 유전자나 특정한 염기 서열을 포함하고 있습니다. 일련의 과정 후 복제된 클론은 세포에 삽입되며, 복제 및 유전자 발현에 이용됩니다. 이렇듯 외부 DNA가 도입되며 세포의 유전 형질에 변화가 생기는 경우를 형질 전환이라 일컫는데, 일반적으로 형질 전환에는 plasmid 벡터가 사용됩니다. 2. ...2025.05.10
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Agarose gel 만들기 및 DNA electrophoresis 레포트2025.05.041. PCR(Polymerase Chain Reaction) PCR은 중합 효소 연쇄반응이라 불린다. 캐리 멀리스에 의하여 1985년에 개발된 중합 효소 연쇄반응(PCR)은 현재 유전물질을 조작하여 실험하는 거의 모든 과정에 사용하고 있는 검사법이다. PCR은 DNA의 원하는 부분을 복제 및 증폭시키는 분자생물학적 기술이다. 이 기술은 사람의 게놈과 같이 매우 복잡하고 양이 적은 DNA 용액에서 연구자가 원하는 특정 DNA 단편만을 선택적으로 증폭시킬 수 있다. Tm은 프라이머 용융 온도라고 한다. 모든 프라이머는 거의 동일한 온도...2025.05.04
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[만점자료] DNA전기영동과 SDS-PAGE 실험 보고서2025.01.231. DNA 전기영동 DNA 전기영동은 PCR을 통해 유전자를 증폭시킨 후, 전기를 이용해 DNA를 크기별로 분리하는 기술이다. PCR은 DNA 변성, Primer 부착, 신장 과정을 거치며 유전자를 지수적으로 증폭시킬 수 있다. 아가로오스 겔 전기영동은 한천을 이용해 만든 겔을 통해 DNA를 크기별로 분류할 수 있다. 실험 결과에서는 원래 플라스미드, 제한효소 처리 플라스미드, PCR 증폭 산물 등의 밴드를 확인할 수 있었다. 2. SDS-PAGE SDS-PAGE는 SDS를 이용해 단백질에 균일한 음전하를 부여하고, 폴리아크릴아마...2025.01.23
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생물공정실험 결과보고서 - Gene Expression Analysis by RT-PCR2025.01.041. Reverse Transcription PCR (RT-PCR) 이 실험의 목적은 reverse transcription PCR을 통해 얻은 cDNA 샘플을 real-time PCR로 증폭시키는 것입니다. 다양한 시약을 사용하여 cancer cell과 ADSC cell의 유전자 발현, 특히 housekeeping gene인 GAPDH와 target gene인 Thy-1의 발현 차이를 분석하고자 합니다. 2. Real-time PCR 분석 실험 결과를 통해 ΔCt 값을 계산하여 각 세포주에서 target gene인 Thy-1이 h...2025.01.04
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PCR, DNA 전기영동 실험 레포트2025.05.131. PCR (중합효소연쇄반응) PCR은 실험실에서 DNA 분자의 특정 부분을 표적으로 하여 빠르게 증폭하는 기술이다. 몇 시간 안에 1개의 DNA 분자로 1000억개에 이르는 DNA 분자를 만들어 낼 수 있어서 DNA 감식에 사용할 수 있는 충분한 양의 DNA를 얻을 수 있다. PCR은 세 단계의 과정을 반복하는데 그 결과 동일한 DNA의 분자 수가 기하급수적으로 증가한다. 첫 단계인 변성단계에서는 반응 혼합물의 DNA 가닥을 분리하기 위해서 95도인 높은 온도에 방치한다. 두번째 단계인 결합단계는 목적 DNA의 양쪽 말단에 상보...2025.05.13
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