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[약대 실습 레포트] 면역학 실습 레포트_Hybridoma cell & antibody purification2025.01.211. Hybridoma cell Hybridoma cell은 항체를 생산하는 B 림프구와 myeloma cell을 융합하여 얻은 세포로, 단일클론항체를 생산하는 세포주입니다. 이 세포주는 한 종류의 항체를 생산하는 능력과 반영구적으로 세포를 증식하는 능력을 동시에 갖고 있습니다. 2. Antibody purification Antibody purification의 원리는 Protein A나 G와 항체의 Fc region의 친화력을 이용하여 affinity chromatography를 시행하여 항체를 분리하는 것입니다. 이때 pH를 ...2025.01.21
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그람염색 예비레포트2025.05.061. 그람양성균 그람염색법에 의하여 자주색으로 변하는 세균으로, 포도상구균, 폐렴균, 나병균, 디프테리아 균, 파상풍균, 탄저균, 방선균 등이 해당한다. 색소나 약제에 대한 감수성이 높고 대사 작용에 아미노산과 비타민을 필요로 한다. 균체외독소를 방출하는데 이 독소의 독작용은 균종에는 강력하지만 가열하면 쉽게 파괴된다. 2. 그람음성균 그람염색법에 의하여 분홍색으로 변하는 세균으로, 살모넬라균, 이질균, 티푸스균, 대장균, 콜레라균, 페스트균 등이 포함된다. 일반적으로 트리페닐메탄계나 아크리플라빈 색소에 대한 저항력이 강하고 계면활...2025.05.06
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NO assay2025.05.101. NO assay 이번 실험은 NO assay를 수행하여 항염효과를 알고자 하는 extract A와 염증반응을 유발하는 LPS를 처리하고 염증정도를 비교했다. RAW 264.7에서 염증반응으로 생성된 NO₂는 griess reagent와 반응하여 분홍색의 azo product가 생성되는데 최대흡광파장인 540nm에서 흡광도를 측정하면 간접적으로 NO 생성량을 측정하고 염증 정도를 알 수 있다. Standard solution을 제조하여 standard curve를 그린 결과 y=0.0349x+0.0834 (R² = 0.9995)...2025.05.10
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플라스미드 DNA의 분리 및 정제 방법2025.01.041. 플라스미드 DNA 분리 플라스미드 DNA는 세균 세포에서 분리할 수 있으며, 일반적인 total cell DNA 분리 방법과 유사하다. 세포를 배양하여 수확하고 세포 추출물을 만든 후, 단백질을 제거하고 에탄올 침전으로 DNA를 농축할 수 있다. 그러나 플라스미드 DNA 분리에는 세균 염색체 DNA와의 분리가 중요한 차이점이다. 플라스미드는 세균 염색체에 비해 크기가 작고 구조적 차이가 있어 이를 이용하여 분리할 수 있다. 2. 플라스미드 미니프레프 방법 플라스미드 DNA를 소량으로 분리하는 대표적인 방법으로는 알칼리 용해법,...2025.01.04
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그람 염색 (Gram Staining) 실험 결과보고서2025.01.141. 그람 양성균과 그람 음성균의 특징 그람 양성균은 면역성이 약하지만 영양 요구가 단순하여 배양이 쉽고, 독소가 가열에 잘 파괴되지 않는다. 반면 그람 음성균은 가열에 쉽게 파괴되지만 항원성이 높고 항체와 결합하여 독성을 중화시킨다. 두 균은 감염 유형과 유효한 항생제가 다르다. 2. 그람 염색의 원리 그람 양성균의 두꺼운 펩티드글리칸 세포벽은 크리스탈 바이올렛과 아이오딘 복합체를 잘 유지하여 자주색으로 염색되지만, 그람 음성균은 얇은 세포벽으로 인해 에탄올 처리 시 크리스탈 바이올렛이 탈색되어 사프라닌으로 붉게 염색된다. 3. ...2025.01.14
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[만점보고서]세포 염색-Actin filament 관찰2025.01.171. 세포 내 Actin filament의 기능과 배열 구조 F-actin이란 microfilament의 한 종류이며, 구형의 monomer인 G-actin이 기본 단위이고 G-actin이 머리-꼬리 상호작용을 통해 강하게 결합하여 polymerization 되어 형성된 긴 가닥의 선 모양의 중합체가 F-actin이다. 2개의 F-actin은 개별 G-actin이 166 °회전함으로써 이중 나선(helix) 구조로 배열되어 액틴 가닥을 형성하고, 이 가닥에 조절 단백질들이 결합하여 actin filament가 형성된다. F-acti...2025.01.17
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세포생물학실험 만점(A+) 실험 보고서(레포트) 09. TUNEL staining2025.01.181. 면역 염색법 면역 염색법(Immunostaining)은 세포 또는 조직에서 특정 분자, 단백질 등을 항체를 이용해 가시화하는 방법으로, 특정 단백질에 선택적으로 결합하는 항체를 세포나 조직에 반응시킨 후, 항체의 결합 반응 후 그 항체의 위치를 관찰하는 생화학적인 방법이다. 면역 조직 화학 염색법(IHC), 면역 세포 화학 염색법(ICC), 면역 형광법(IF) 등이 존재한다. 2. TUNEL 염색법 TUNEL (TdT-mediated dUTP-bio-tin nick end-labeling method) 염색법은 세포자연사 과정...2025.01.18
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동식물 세포의 관찰2025.05.101. 식물세포 양파 세포를 광학 현미경으로 관찰하였다. 염색 전에는 핵이 미세하게 보였지만, 염색 후에는 핵이 더 명확히 관찰되었다. 식물세포는 세포벽이 있어 규칙적인 구형 모양을 띠고 있음을 확인하였다. 2. 동물세포 구강 세포를 광학 현미경으로 관찰하였다. 염색 전에는 핵을 관찰할 수 없었지만, 염색 후에는 핵의 모양을 관찰할 수 있었다. 동물세포는 세포벽이 없어 불규칙한 다각형 모양을 띠고 있음을 확인하였다. 3. 세포 구조 비교 식물세포와 동물세포의 핵 크기 차이는 육안으로 크게 차이나지 않았다. 이는 현미경 조건 설정의 차...2025.05.10
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[약대 실습 레포트] 면역학 실습 레포트_면역세포에서 항염증 효과 확인(cell treat)2025.01.211. 대식세포의 염증 반응 대식세포 표면의 TLR이 PAMP를 인식하거나, 특정 cytokine에 대해 수용체에서 인식하는 경우 대식세포가 활성화 된다. 대식세포가 활성화되면, 표식작용이 증가하고 항미생물 작용이 증가하며, ROS의 활성이 증가하게 되는데 이는 iNOS의 활성을 증가시키고 아르기닌이 산소와 NADPH와 반응하여 NO가 생성되는 반응이 일어나게 된다. 활성화된 대식세포에서 IL-1, TNF-α, IL-6 등을 분비하게 되고, 이들은 염증반응 매개 물질로 림프구의 활성을 증가시킨다. 2. RAW 264.7 세포주 RAW...2025.01.21
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DNA sensitivity test2025.01.181. DNA 구조와 기능 DNA는 유전 정보를 저장하는 분자로서 2개의 polymer strand가 double helix 구조를 이루며 4가지 염기가 상보적으로 결합한다. 다양한 요인에 의해 double strand 구조가 깨질 수 있으며, DNA repair system에 의해 복구되지만 심각할 경우 세포가 죽기도 한다. 2. DNA 손상 유발 물질 MMS(Methyl methanesulfonate)는 DNA adduct를 형성하여 DNA polymerase의 복제를 어렵게 하고 double strand break를 유발한다. ...2025.01.18
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