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[화공생물공학기초실험 A+예비레포트] 유산균 음료로부터 미생물 분리 평판 계수법2025.01.121. 유산균 분리 및 배양 이 실험에서는 유산균 음료에서 유산균을 분리하고 평판 계수법을 이용하여 유산균의 수를 측정하였습니다. 유산균은 젖산발효를 통해 유기물을 분해하는 미생물로, 식품 및 의약품 제조에 널리 이용되고 있습니다. 실험에서는 BCP 배지와 MRS 배지를 사용하여 유산균을 선택적으로 배양하고 정량하였습니다. 또한 무균 조작법, 멸균 기법, 미생물 계수법 등의 기본적인 미생물학 실험 기술을 익힐 수 있었습니다. 2. 미생물 생장 곡선 미생물의 생장 곡선은 크게 4단계로 나뉩니다. 첫 번째는 유도기로, 새로운 배지에 접종...2025.01.12
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글리세롤 스톡 제조 방법2025.01.291. 균주 STOCK 제조 균주 STOCK을 제조하는 방법에 대해 설명합니다. 배양액 준비, 50% 및 80% 글리세롤 용액 제조, 글리세롤과 배양액 혼합, 라벨링 및 깊은 냉동 보관 등의 과정을 자세히 다루고 있습니다. 2. 50% 글리세롤 스탁 제조 50% 글리세롤 스탁을 제조하는 방법을 설명합니다. 글리세롤과 증류수를 1:1 비율로 혼합하여 멸균한 후, 배양액과 1:1 비율로 혼합하는 과정을 포함하고 있습니다. 3. 80% 글리세롤 스탁 제조 80% 글리세롤 스탁을 제조하는 방법을 설명합니다. 글리세롤과 증류수를 8:2 비율로...2025.01.29
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[화공생물공학기초실험 A+] 미생물 비성장속도 측정 실험 레포트2025.01.121. 미생물 비성장속도 측정 실험에서는 미생물 비성장속도 측정을 위해 흡광도가 균체 농도에 비례한다는 점을 이용하여 액체배양 중 비탁계로 미생물의 균체량을 측정하였다. YM배지를 농도별로 제조하고 효모 전배양액을 접종하여 진탕배양하면서 일정 시간마다 배양액을 채취하여 흡광도를 측정하였다. 측정한 흡광도를 Lambert-Beer 법칙에 따라 계산하여 균체 농도를 구하고, Monod 식을 적용하여 비성장속도를 도출하였다. 비성장속도와 균체 농도 간의 관계를 그래프로 나타내면 포화 현상을 보인다. 2. Lambert-Beer 법칙 Lam...2025.01.12
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[A+ 리포트] 100pi dish를 이용한 Cell counting and seeding (세포생물학실험)2025.04.251. 세포 배양 세포 배양 실험에 필요한 재료와 기구를 준비하고, 세포 배양 온도와 동일한 37°C로 배양액을 유지하는 것이 중요합니다. 또한 세포 배양 접시의 상태를 확인하고, 세포를 분리하기 위해 트립신-EDTA를 처리하며, 분리된 세포를 수집하고 원심분리하여 세포 펠릿을 얻는 과정을 거칩니다. 2. 세포 계수 세포 계수를 위해 세포 현탁액을 만들고 trypan blue로 염색한 후 혈구 계산기를 이용하여 세포 수를 세는 과정을 거칩니다. 이를 통해 세포 밀도와 총 세포 수를 계산할 수 있습니다. 3. 세포 분주 세포 계수 결과...2025.04.25
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미생물 배지 배양(PDA, TSA 배지)2025.05.111. 미생물 배양 방법 실험에서는 배양의존적인 방법으로 TSA와 PDA media를 사용하였다. TSA(Trypticase Soy Agar)는 다양한 유기체의 영양 배지가 되며, 대부분의 그람 박테리아의 성장을 지원하는 범용 비선택적 성장배지이다. PDA(Potato Dextrose Agar)는 진균의 왕성한 증식을 촉진시키는 역할을 하며, 세균 증식을 저해하기 위한 항생제를 보강할 수 있다. 배양의존적 방법은 살아있는 미생물을 평가할 수 있지만, 일부 종의 성장을 억제하고 복제 시간이 다양한 종이 효율적으로 경쟁하여 결과가 편향될...2025.05.11
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세포 계대배양 실험2025.01.021. 세포 계대배양 세포 배양 시 한정된 공간에서 세포 증식이 제한되므로, 계대배양을 통해 새로운 공간을 제공하여 세포가 지속적으로 분열할 수 있도록 한다. 또한 실험에 사용되는 세포의 일관성을 보장하기 위해 유전적 특성이 동일한 세포주를 지속적으로 대를 이어 배양한다. 계대배양 시 세포를 분리하는 방법으로는 enzymatic dissociation과 physical dissociation이 있으며, 세포의 특성을 고려하여 적절한 방법을 선택해야 한다. 2. Trypsin의 작용 원리 Trypsin은 단백질 분해효소로, 세포가 다른...2025.01.02
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[생물공정실험] 1주차 Mammalian suspension cell culture 결과보고서2025.04.261. EGFP 유전자 발현 조절 이번 실험에서는 CRISPR-CAS9을 이용해 EGFP 유전자 발현을 조절하는 방법을 사용했다. EGFP 유전자를 발현시키려면 promoter 유전자가 존재해야 하고, 발현시키지 않으려면 promoter 유전자를 제거해야 한다. 2. CHO-S 세포 배양 이번 실험에서는 CHO-S 세포를 사용했다. CHO-S 세포는 부유하면서 자랄 수 있어 배양 속도와 공간 활용도가 adherent 세포에 비해 좋아 생산성이 높으므로 산업적으로 잘 쓰인다. 또한 인간과 진화적으로 가까워 human-like PTM, ...2025.04.26
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[A+ 리포트] 6well plate를 이용한 Cell counting and seeding에 관한 실험 프로토콜2025.04.251. 세포 배양 실험 프로토콜에 따르면 세포 배양을 위해 clean bench, 37°C water bath, CO2 incubator 등의 장비를 사용하며, HeLa 세포주를 이용하여 실험을 진행합니다. 세포 배양 시 배지 온도, 세포 밀도, 오염 여부 등을 확인하는 것이 중요합니다. 2. 세포 계수 및 분주 실험에서는 trypsinization을 통해 세포를 분리하고, hemocytometer와 trypan blue 염색을 이용하여 세포 수를 계수합니다. 이후 계수된 세포를 6well plate에 적정 농도로 분주하는 과정을 거...2025.04.25
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대장균 배양, 형질전환, Plasmid DNA 분리, DNA 전기영동 실험 보고서2025.01.121. 대장균(E.coli) 대장균(E.coli)은 그람음성 간균으로, 포자를 생성하지 않으며 1-2 microns x 30-30 micron 크기의 박테리아입니다. 섭씨 37도에서 잘 자라며, 정상적인 인간의 장에 존재하여 건강에 유익합니다. 하지만 배설물과 함께 나와 질병을 일으킬 수 있습니다. 2. 배지 배지는 미생물이나 세포를 성장시키는데 사용됩니다. 가장 일반적인 배지는 액체 영양배지나 LB배지이며, 이를 Agar와 섞어 고체배지로 사용할 수 있습니다. 이번 실험에서 사용한 LB배지는 tryptone, yeast extrac...2025.01.12
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마우스 종양 세포 4T1(동물세포) 배양 실험2025.01.181. 동물세포 배양 동물세포를 배양하는 것은 모든 세포생물학 실험에 있어서 가장 기초적인 실험 방법으로, qRT PCR, MTT assay, Cell Cycle Analysis 등의 In vitro(시험관 내) 수준에서 필요한 실험과 동물에 종양을 이식하는 등의 In vivo (생체 내) 수준의 연구에서도 사용되는 방법이다. 이번 실험에서는 마우스 종양 세포 4T1를 혈청 배지에 배양하는 방법으로 실험을 진행하였다. 2. 마우스 종양 세포 4T1 마우스 종양 세포 4T1은 진핵세포이자, 상피세포이며, 성장 속도가 빠른 세포이다. 마...2025.01.18
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