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성균관대학교 화학과 생물화학실험 레포트2025.01.211. 단백질 정량법 단백질정량이란 시료 내에 포함된 단백질의 양 또는 농도를 구하는 과정이다. 단백질 함량을 측정하기 위한 다양한 방법이 존재하며, 한가지 단백질로 이루어진 용액은 측정방법에 따라 다른 결과를 가져 올 수 있다. 방법에 따라 모두 장단점이 있기 때문에 측정하는 샘플 내 단백질의 특성, 추출물의 순도, 필요로 하는 정확도 등에 따라 적절한 방법을 선택하는 것이 좋다. 단백질 정량법에는 크게 colormetric 방법과 electrophoresis 방법이 있으며 대부분 색시약을이용하여 흡광도를 측정하는 colormetr...2025.01.21
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전기영동 예비2025.01.221. 전기영동 전기영동은 생체 고분자들을 분석, 분리하는 방법 중 하나이다. 전기영동은 DNA, RNA나 단백질 등이 전하를 띄고 있고 이들이 전기장에 놓이게 된다면 이동성을 가진다는 것을 기본으로 한다. 전기영동에는 띠 전기영동, 등속 전기영동, 등전점 전기영동, 2D 전기영동 등 다양한 종류가 있다. DNA 이동에 영향을 주는 요인으로는 DNA 크기에 따른 gel 농도, DNA 분자의 크기, 전압 등이 있다. TAE buffer와 EtBr은 전기영동 실험에 중요한 시약이다. 1. 전기영동 전기영동은 생물학, 화학, 의학 등 다양...2025.01.22
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이화여대 생명과학실험 A+ 리포트(Western Blot)2025.01.231. Western Blot 원리 Western Blot은 항원-항체 반응을 이용하여 여러 단백질의 혼합물로부터 특정 단백질을 찾아내는 방법이다. 이 실험에서는 단백질의 SDS-PAGE 분리, 단백질의 membrane으로의 transfer, 항원-항체 반응 및 항체에 부착된 효소의 반응에 의한 발색 반응 등의 실험 원리 및 기법을 습득한다. 2. SDS-PAGE와 Stacking/Resolving Gel의 차이 Stacking gel은 단백질 시료를 gel에 loading 했을 때 모든 시료가 동일한 시작점에서 출발할 수 있도록 하...2025.01.23
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연세대학교 생화학실험(1) 6주차 Peptide Mass Fingerprinting In-gel Digestion2025.05.041. Peptide Mass Fingerprinting (PMF) Peptide Mass Fingerprinting (PMF)은 단백질 동정을 위한 기술로, 단백질을 효소로 절단하여 생성된 펩타이드의 질량을 측정하고 데이터베이스와 비교하여 단백질을 식별하는 방법입니다. 이 기술은 SDS-PAGE를 통해 분리된 단백질 밴드에서 시작되며, 밴드를 절단하고 효소로 소화하여 생성된 펩타이드의 질량을 질량분석기로 측정합니다. 이렇게 얻은 펩타이드 질량 데이터를 데이터베이스와 비교하여 단백질을 동정하게 됩니다. 2. In-gel Digesti...2025.05.04
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생체분자의 정성분석 레포트2025.05.121. 생체분자 생체분자란 생명체에 의해서 만들어지는 저분자 및 고분자를 포함한 모든 유기분자를 말한다. 생체분자는 주로 탄소, 수소, 질소, 산소로 구성되어 있다. 생체분자의 종류에는 탄수화물, 단백질, 지질, 핵산 등이 있다. 2. 탄수화물 탄수화물은 탄소, 수소, 산소가 약 1:2:1의 비율로 구성된 분자이다. 탄수화물은 단당류, 이당류, 다당류로 구분된다. 단당류인 포도당은 생물체에서 가장 흔한 단당류이며 대부분의 다당류를 구성하는 기본 단위이다. 이당류와 다당류는 단당류가 연결되어 있는 형태이다. 3. 단백질 단백질은 하나 ...2025.05.12
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[만점 레포트] 연세대학교 생화학실험(1) 7주차 Peptide Mass Finger-Printing2025.05.041. MALDI-TOF 질량분석법 MALDI-TOF 질량분석법은 고분자 물질에 대해 시료의 분해 없이 기화/이온화가 가능한 방법으로, 일반적으로 질량이 크고 열에 불안정한 생체 고분자나 합성 고분자에 이상적으로 적용할 수 있다. 이 실험에서는 MALDI 이온화 장치와 TOF 질량 분석기를 이용하여 단백질을 동정하는 방법을 공부한다. 2. 단백질 동정 MALDI-TOF 질량분석법을 이용하여 단백질을 동정하는 과정을 설명한다. 시료를 MALDI 장치에 주입하고 질량 분석기로 분석한 후, 결과 스펙트럼을 데이터 검색 엔진에 입력하여 단백...2025.05.04
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SDS-PAGE and Protein Analysis2025.01.211. SDS의 역할 및 SDS-PAGE 원리 SDS(Sodium Dodecyl Sulfate)는 계면활성제로서 친수성과 소수성 부분을 모두 지니고 있으며, 단백질을 변성할 수 있는 물질이다. SDS-PAGE는 이러한 SDS의 특성을 토대로 하여 단백질을 분자량에 따라 band 형태로 분리하는 실험이다. 단백질은 그 구조와 전하, 분자량이 모두 다르기 때문에 SDS를 통해 단백질의 구조와 전하를 모두 일정하게 한 뒤 분자량에 의해서만 분석을 진행한다. 2. Gel에 들어가는 시료의 역할 Acrylamide와 N,N'-Methylene...2025.01.21
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식품의 조단백 정량분석(Micro-Kjeldahl 법[붕산법])2025.01.241. 식품 조단백 정량분석 식품의 단백질 함량을 측정하는 것은 식품의 품질을 결정하는 중요한 요인이다. 이 실험에서는 Micro-Kjeldahl 법(붕산법)을 사용하여 쌀귀리의 조단백 함량을 측정하였다. 실험 과정에는 분해, 증류, 중화, 적정의 4단계가 포함되며, 분해 과정에서 발생하는 유해 가스는 Scrubber를 통해 중화시켰다. 실험 결과, 쌀귀리의 조단백 함량은 11.86±0.04%로 나타났으며, 신뢰수준은 99.62%로 높은 신뢰도를 보였다. 1. 식품 조단백 정량분석 식품 조단백 정량분석은 식품 성분 분석에 있어 매우 ...2025.01.24
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단백질의 검출2025.01.271. 단백질의 기능과 구조 이번 실험에서는 단백질의 기능과 구조를 이해하고, 단백질의 정성 분석법에 대해 배웠습니다. 실험을 통해 단백질의 존재 유무를 확인하였고, 뷰렛 반응과 Bradford Assay 반응의 특성을 비교하였습니다. 뷰렛 반응은 색 변화가 미미하여 관찰하기 어려웠지만, Bradford Assay 반응은 빠르고 민감도가 높아 확실한 색 변화를 관찰할 수 있었습니다. 이를 통해 단백질 검출 실험에서 Bradford Assay 반응이 더 효과적임을 알 수 있었습니다. 2. 단백질의 정성 분석법 이번 실험에서는 단백질의 ...2025.01.27
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[화공생물공학단위조작실험1] 단백질 정량법 비교 (BCA, Bradford)2025.05.111. 단백질 정량법 단백질은 다양한 종류의 아미노산이 펩타이드 결합을 통해 형성된 고분자 화합물로, 결합 길이나 아미노산 종류에 따라 화학적∙물리적 성질이 다르다. 이러한 성질의 차이로 단백질 정량법의 종류도 다양하다. 정량법에는 Biuret assay, BCA assay, Bradford assay, 동위원소 희석 LC-MS method, 분광학적 정량법 등이 있다. 2. Biuret Assay Biuret(H2N-CO-NH-CO-NH2)구조가 알칼리성의 CuSO4와 반응하면 2가의 구리이온과 보라색의 착화합물을 형성한다. Biu...2025.05.11
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