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RT PCR (reverse transcription) / 100점 면역학실험 레포트 (원리, 시약, RNA 추출, cDNA 합성)2025.05.051. mRNA, transcription, translation 세포가 균의 침입을 인식하면 염증을 일으키는데, 이때 mRNA의 유무를 통해 세균 침입 여부를 알 수 있다. mRNA는 단백질 합성을 지시하는 전사체이며, 전사는 DNA를 주형으로 RNA를 합성하는 과정이고, 번역은 mRNA의 염기서열을 바탕으로 단백질을 합성하는 과정이다. 2. PCR, RT-PCR, real-time PCR PCR은 특정 DNA fragment를 증폭하는 기술이며, RT-PCR은 RNA를 DNA로 역전사하여 증폭하는 방법이다. Real-time PC...2025.05.05
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COVID-19 진단키트내용 검토(SARS-CoV-2 의 특징과 COVID-19 진단)2025.04.281. SARS-CoV-2 의 특징 SARS-CoV-2는 코로나바이러스과에 속하는 새로운 종의 바이러스로, 외피에 spike 단백질이 있어 전자현미경 상에서 왕관 모양을 띄는 특징이 있는 양성 단일 가닥(+ ssRNA) 바이러스입니다. 크기는 60-140nm의 원형 또는 타원형입니다. 코로나비리데의 하위군인 Orthocoronavirinae에 속하며, 그 중 alphaCoV와 betaCoV만이 포유동물에 감염됩니다. COVID-19는 소, 낙타, 고양이, 쥐, 박쥐 등 다른 동물 종에서도 호흡기, 장, 간 및 신경계 질환을 유발할 수...2025.04.28
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겔 전기영동 (agarose gel electrophoresis) 실험 리포트2025.01.141. Agarose gel electrophoresis Agarose gel electrophoresis은 크기에 따라 핵산(DNA 또는 RNA) 조각을 분리하는 데 사용되는 전기영동 종류이다. 음전하를 띤 DNA/RNA는 전류가 가해질 때 agarose gel의 기공을 통해 gel의 양전하 말단으로 이동하고 이때 더 작은 조각이 더 빠르게 이동한다. 결과 밴드는 자외선(UV)을 사용하여 시각화할 수 있다. 2. Taq polymerase Taq polymerase는 호열성 박테리아인 Thermus aquaticus에서 추출한 열 ...2025.01.14
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코로나의 영향을 분석한 진로 보고서 / 탐구주제는 코로나 진단키트, 백신, 치료제의 원리2025.01.201. 코로나 진단키트 코로나 진단키트의 이름은 RT-PCR이고, 핵심 원리는 박테리아나 바이러스처럼 눈에 보이지 않는 것을 보이게 하는 것이다. 이렇게 하기 위해서는 유전자를 증폭시켜야 한다. 이것은 기존에 있던 중합효소 연쇄반응 PCR의 원리와 거의 유사하다. 하지만 RT-PCR과 PCR의 차이점이 있다면 PCR은 검체에서 추출한 DNA를 증폭시켜 기존의 코로나바이러스와 비교하여 신종인지 아닌지 가려내기 때문에 24시간이라는 긴 시간이 소요되는 반면에 RT-PCR은 코로나19에만 존재하는 유전자를 검출해 감염 여부를 진단하는 방법...2025.01.20
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유전발생생물학실험_RT-reaction, qRT-PCR2025.01.131. Reverse transcription Reverse transcription은 RNA를 주형으로 해서 cDNA로서 RNA의 염기순서를 전사하는 반응이다. 이는 레트로바이러스를 생육하기 위해서는 DNA합성이 무조건 필요하다는 연구를 시작으로, 역전사효소를 발견하며 증명되었다. Reverse transcription은 central dogma에서 RNA에서 DNA로 가는것도 있다는 것을 발견한 것이 중요하다. 2. Polymerase Chain Reaction (PCR) Polymerase Chain Reaction은 PCR로 ...2025.01.13
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Reverse Transcription PCR 보고서2025.05.131. PCR의 정의 PCR은 Polymerase chain reaction으로 중합효소 연쇄반응을 말한다. DNA 분자 상에서 어떤 부분만의 염기서열을 증폭시켜 적은 양의 DNA로도 PCR을 통해 많은 DNA copy를 만들어 낼 수 있다. 2. PCR의 원리 및 방법 PCR은 DNA 가닥을 분리하고, primer가 주형가닥의 상보적인 염기서열에 결합하도록 한 후, Taq polymerase에 의해 새로운 DNA 가닥이 합성되는 과정을 반복하여 많은 DNA 단편을 복사해 내는 기술이다. 3. PCR의 이용 PCR은 의학적 진단, 유...2025.05.13
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PCR을 통한 gene structure 분석2025.05.011. EtOH Precipitation DNA는 전하를 띄는 인산골격을 가지고 있어서 극성이다. 물도 극성이므로 물에 잘 녹는다. DNA를 뭉치게 하려면 물과 DNA간 결합을 약화시켜야 한다. Ethanol은 물보다 훨씬 덜 극성이다. 따라서 ethanol을 첨가하면 DNA의 인산기와 다른 양이온간의 결합이 강해지면서 DNA 침전을 형성한다. 이 과정을 위해선 적절한 양의 양이온이 필요하다. 너무 많으면 DNA와 같이 침전되고 너무 적으면 침전되지 못한 DNA가 생긴다. 이 실험에선 3M sodium acetate를 final 0....2025.05.01
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Real-time PCR을 이용한 유전자 발현 분석2025.01.231. 전사(Transcription) 수준에서의 유전자 발현 분석 기법들 유전자 발현 분석 기법에는 Single gene analysis와 Whole genome analysis가 있다. Single gene analysis는 개별 유전자의 발현량을 확인하는 실험 기법으로 Northern Blotting과 Real-time PCR이 있다. Whole genome analysis는 세포 내 전체 유전자의 발현량을 확인하는 실험 기법으로 RNA sequencing이 있다. 2. cDNA 합성에 사용될 수 있는 primer의 종류 cDN...2025.01.23
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유전자 가위 기술을 이용한 코로나 검사2025.05.061. 즉석 코로나 바이러스 진단법 즉석 코로나 바이러스 진단법은 기존의 PCR 증폭검사나 면역항체 검사와 달리 유전자 가위 기술인 CRISPR-Cas 시스템을 활용하여 신속하고 정확한 코로나 바이러스 검출이 가능합니다. Cas13a 효소를 이용하여 RNA 단일 가닥을 절단하고 주변의 모든 RNA를 분해하는 방식으로 코로나 바이러스를 검출할 수 있습니다. 이 방식은 기존 진단법에 비해 검사 시간이 크게 단축되고 고가의 장비나 전문 인력이 필요하지 않아 현장에서 손쉽게 사용할 수 있습니다. 2. CRISPR-CAS 시스템 CRISPR-...2025.05.06
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PCR 관련 퀴즈 및 정답(생화학) A+ 과제레포트2025.01.201. PCR의 3단계 procedures PCR 반응요소에는 Target DNA, Primers (oligonucleotides complementary to target), Nucleotides(dATP, dCTP, dGTP, dTTP), Thermostable DNA polymerase가 있다. PCR의 세 가지 반응 단계는 DNA 변성 (Denaturation), primer 의 Annealing, 신장 반응 (Extension)이다. DNA 변성 단계에서는 95℃의 열을 가해 DNA 이중 가닥을 분리시킨다. Annealing...2025.01.20
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