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[예비] PCR을 이용한 DNA 증폭2025.01.221. PCR 기술 PCR 기술은 DNA의 특정 부분을 증폭하는 기술로, 1983년 Kary Mullis에 의해 개발되었습니다. PCR의 원리는 자연적인 DNA 복제 과정에서 영감을 받았는데, DNA 복제는 세포 내에서 DNA 폴리머레이즈 효소에 의해 이루어지며, 이 효소는 DNA의 주형 가닥을 읽고 상보적인 뉴클레오타이드를 추가하여 새로운 DNA 가닥을 만듭니다. 2. DNA 복제 과정 DNA 복제 과정은 크게 3가지로 진행됩니다. 1) 시작: 복제 기점에서 DNA 이중나선이 풀리고 단일 가닥으로 분리됩니다. 2) 신장: 프라이머가...2025.01.22
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PCR(중합효소연쇄반응) (한글버전)2025.05.151. PCR(Polymerase Chain Reaction) PCR은 짧은 시간에 single strand DNA 분자를 수백만 개의 복사본으로 증폭시키는 생화학적 과정을 이용한 기술입니다. PCR 과정은 Denaturation, Annealing, Extension의 3단계로 진행됩니다. DNA polymerase는 PCR의 주요 구성 요소로 단일 가닥 DNA 주형에 새로운 DNA 가닥을 합성합니다. Thermal cyclers는 PCR의 온도를 순환하고 시간을 자동화하는 기기입니다. PCR 실험을 위해서는 primer 디자인, ...2025.05.15
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구강상피로부터 유전자의 추출 (HKG 이용 PCR & 전기영동) 실험 보고서2025.05.141. PCR (Polymerase Chain Reaction) PCR은 DNA를 증폭하는 기술로, 3단계(Denaturation, Annealing, Extension)로 구성되어 있다. Denaturation 단계에서는 dsDNA가 ssDNA로 분리되고, Annealing 단계에서는 Primer가 ssDNA에 결합한다. Extension 단계에서는 Taq Polymerase가 Primer를 시작점으로 DNA를 합성한다. 이 과정이 반복되면서 DNA가 지수적으로 증폭된다. 2. 전기영동 (Electrophoresis) 전기영동은 D...2025.05.14
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RT-PCR 실험 및 결과 분석2025.05.101. RT-PCR RT-PCR은 RNA를 추출하고 cDNA를 합성하여 PCR로 증폭하는 기술입니다. 이 실험에서는 Labozol을 이용한 RNA 추출, cDNA 합성, GAPDH와 Twist1 유전자의 RT-PCR 증폭을 진행했습니다. RNA 추출 과정에서 chloroform으로 수용성층과 지용성층을 분리하고, isopropanol로 RNA를 침전시켰습니다. 이후 ethanol로 세척하고 DEPC 처리된 물에 재용해하여 RNA 농도와 순도를 확인했습니다. RT-PCR 결과 GAPDH는 일정한 발현을 보였고, Twist1은 chemi...2025.05.10
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PCR을 통한 gene structure 분석2025.05.011. EtOH Precipitation DNA는 전하를 띄는 인산골격을 가지고 있어서 극성이다. 물도 극성이므로 물에 잘 녹는다. DNA를 뭉치게 하려면 물과 DNA간 결합을 약화시켜야 한다. Ethanol은 물보다 훨씬 덜 극성이다. 따라서 ethanol을 첨가하면 DNA의 인산기와 다른 양이온간의 결합이 강해지면서 DNA 침전을 형성한다. 이 과정을 위해선 적절한 양의 양이온이 필요하다. 너무 많으면 DNA와 같이 침전되고 너무 적으면 침전되지 못한 DNA가 생긴다. 이 실험에선 3M sodium acetate를 final 0....2025.05.01
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PCR을 이용한 DNA 복제와 DNA 전기영동 보고서2025.01.181. PCR(중합효소 연쇄반응) PCR은 1983년 K. B. Mullis가 고안한 방법으로, DNA를 대량으로 증폭할 수 있는 기술이다. PCR에 필요한 재료로는 복제하고자 하는 DNA, Taq DNA 중합효소, dNTPs, 프라이머, DNA 중합효소용 완충용액, MgCl2 등이 있다. PCR 과정은 변성, 결합, 중합 단계로 이루어지며, 이를 30회 이상 반복하면 DNA 총량이 기하급수적으로 증가한다. PCR은 친자 확인, 병원균 검출, 유전자변형식품 검사, 유전자 지도 작성, 범인 식별 등 다양한 분야에 활용된다. 2. DNA...2025.01.18
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[생화학실험] A+, PCR 및 agarose gel 전기영동 실험2025.01.071. PCR (Polymerase Chain Reaction) PCR은 원하는 DNA band만을 증폭 가능하며, 이때 DNA polymerase가 사용된다. 30-40 cycle 정도 반복하여 증폭하고자 하는 표적 DNA의 한 DNA 사슬 3'말단에 상보적인 것과 그 반대 사슬의 3'말단에 상보적인 2개의 특정 올리고데옥시뉴클레오티드를 합성하고, 이를 원하는 절편을 함유한 변성된 한 가닥의 표적 DNA와 혼성화 반응 시킨다. DNA polymerase는 Taq DNA polymerase를 사용하며, 이는 열에 안정성이 있는 DNA...2025.01.07
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RT PCR (reverse transcription) / 100점 면역학실험 레포트 (원리, 시약, RNA 추출, cDNA 합성)2025.05.051. mRNA, transcription, translation 세포가 균의 침입을 인식하면 염증을 일으키는데, 이때 mRNA의 유무를 통해 세균 침입 여부를 알 수 있다. mRNA는 단백질 합성을 지시하는 전사체이며, 전사는 DNA를 주형으로 RNA를 합성하는 과정이고, 번역은 mRNA의 염기서열을 바탕으로 단백질을 합성하는 과정이다. 2. PCR, RT-PCR, real-time PCR PCR은 특정 DNA fragment를 증폭하는 기술이며, RT-PCR은 RNA를 DNA로 역전사하여 증폭하는 방법이다. Real-time PC...2025.05.05
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PCR을 이용한 유전자 증폭 실험 예비 보고서2025.01.041. PCR(Polymerase Chain Reaction) PCR은 DNA 중합효소를 이용하여 DNA나 RNA의 특정 영역을 시험관 내에서 대량으로 증폭시키는 기술입니다. 이를 통해 복잡한 전체 유전체 중에서 희귀한 유전자를 분석하고 연구할 수 있습니다. PCR은 분자생물학, 의학, 농학, 환경과학 등 다양한 분야에 응용될 수 있습니다. 2. PCR 구성 요소 PCR에는 증폭 대상이 되는 DNA/RNA 템플릿, 증폭할 부분을 지정하는 프라이머, 열에 강한 DNA 중합효소인 Taq 폴리머라제, 그리고 DNA 합성에 필요한 dNTP ...2025.01.04
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PCR을 통한 유전자 증폭 - 예비레포트2025.01.241. PCR (Polymerase Chain Reaction) PCR은 DNA 증폭 기술로, DNA 템플릿, 프라이머, DNA 중합효소, 핵산 구성 물질 등을 이용하여 특정 DNA 서열을 선택적으로 증폭할 수 있습니다. 이 기술은 유전자 분석, 질병 진단, 범죄 수사 등 다양한 분야에서 활용됩니다. 2. DNA 증폭 과정 PCR 과정은 크게 DNA 변성, 프라이머 결합, DNA 합성의 3단계로 이루어집니다. DNA 변성 단계에서는 이중 가닥 DNA가 단일 가닥으로 분리되고, 프라이머 결합 단계에서는 프라이머가 상보적인 DNA 서열에...2025.01.24
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