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Bacterial Transformation 레포트2025.01.211. Transformation Transformation은 특정 DNA 조각을 생명체의 유전체 내로 삽입하여 새로운 genotype이 발현되도록 하는 방법이다. 박테리아에 plasmid를 통해 gene을 도입하는 기술로 알려져 있지만, 동물이나 식물에서도 transformation 기술이 개발되어 유전자 변형 생물(GMO)을 만드는 기술로 이용되고 있다. Bacterial plasmid는 restriction enzyme이 작용하는 multicloning site와 Selectable Marker로 사용하기 위한 antibioti...2025.01.21
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박테리아에서 DNA 분리2025.01.271. plasmid DNA 분리 실험 목적은 plasmid DNA 분리에 대해 이해하고, 그 과정 중 하나인 plasmid mini-preparation에 대해 알아보는 것이다. plasmid DNA 분리법의 공통적인 세 단계는 overnight culture, mini preparation, 순수한 plasmid DNA 분리 과정이다. mini-prep은 plasmid DNA를 소량 분리하는 방법으로, 알칼리 조건에서 세포를 파괴시켜 DNA만을 분리하는 것이다. 2. plasmid DNA 분리 시약 실험에 사용된 시약은 LB 배지...2025.01.27
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[서강대학교 현대생물학실험2] (1차 풀레포트) Competent Cell, PCR, gel electrophoresis2025.01.221. 배지 세포를 배양하기 위해 영양분을 함유한 물질을 배지라고 한다. Sterilization은 무균 상태의 배지를 조제할 때 필요한 과정으로, heat, chemical, radiation 등의 방법으로 멸균 처리할 수 있다. 2. Competent cell Competent cell은 외부 유전물질을 수용하여 세포의 형질을 전환시킬 수 있는 세포이다. 본실험은 LB(Luria-Bertani) 배지를 액체와 고체 상태로 조제하여 고온, 고압의 수증기로 멸균하였고, 조제한 배지에 항생제 내성 유전자를 가진 plasmid를 삽입한 ...2025.01.22
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PlasmidDNA Purification & Sanger Sequencing 보고서2025.01.211. Bacterial transformation 박테리아 transformation은 특정 DNA 조각을 박테리아의 유전체 내로 삽입하여 새로운 유전형질이 발현되도록 하는 방법입니다. 박테리아 plasmid는 restriction enzyme이 작용하는 multicloning site와 항생제 내성 유전자를 가지고 있어 외부 유전 물질을 자유롭게 삽입할 수 있습니다. 이를 통해 약 8kb의 긴 DNA 조각을 박테리아 plasmid에 삽입하여 복제할 수 있습니다. 2. Liquid LB culture 및 Colony inoculat...2025.01.21
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[식품미생물공학실험] 미생물의 배양배지, 계대배양2025.01.291. 미생물 배양 배지 제조 실험에서는 YPD, PD, MA, NA, LB 등 다양한 배지를 제조하였다. 배지 제조 시 정밀 전자저울을 사용하여 시약의 무게를 측정하고, 증류수를 이용해 최종 부피를 맞추었다. 고체 배지는 고압증기멸균기에서 121°C, 15분간 멸균하였고, 액체 배지는 멸균 필터를 이용해 여과 멸균하였다. 2. 미생물 계대배양 실험에서는 Dry Yeast, Corynebacterium, Escherichia coli, Aspergillus niger 등 다양한 미생물을 배양하였다. 액체 배지에 미생물을 접종하고 배양...2025.01.29
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[미생물공학실험]미생물 배양 배지 제작 및 세균배양2025.01.231. 미생물 배양 미생물을 인공적으로 증식시키는 것을 배양이라고 한다. 진균, 세균, 랩토스피라 등은 무세포 배지에서 배양되지만 리케치아, 바이러스는 무세포 배지에서는 증식되지 않으므로 살아 있는 세포를 필요로 한다. 세균을 배양할 때에는 균종에 따라 각각 최적조건의 배지 선택이 중요하다. 2. 배지 분류 배지란 적당한 영양성분을 혼합해서 무균상태의 액체 또는 고체로 만든 인공적인 증식환경을 말한다. 배지는 물리적 상태에 따라 액체, 고형, 반고형 배지로 분류되며, 배지 사용 목적에 따라 증식용 배지, 증균 배지, 분리 배지, 성상...2025.01.23
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A+[일반생물학및실험] spreading, streaking 레포트2025.05.041. Spreading LB plate에 실험한 날짜, 조 이름, 접종 균주의 이름, 희석 정도를 labelling한다. pipette을 이용하여 미생물 배양액 80ul을 따서 plate에 접종한다. 멸균된 삼각봉을 이용하여 배양액을 골고루 펴서 도말한다. 퍽퍽해지는 게 느껴질 때까지 골고루 펴준다. 도말이 끝난 배지는 뒤집어서 37℃ incubator에 24시간 배양한 후, 형성된 colony를 관찰한다. 2. Streaking single colony를 loop으로 살짝 떠서 배지의 한쪽을 지그재그로 도말한 후 120° 돌린다....2025.05.04
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박테리아에서의 DNA 분리2025.01.231. Plasmid DNA 분리 이 실험에서는 박테리아에서 Plasmid DNA를 분리하는 과정을 이해하는 것이 목적입니다. Plasmid DNA는 박테리아의 염색체 DNA와는 별도로 존재하는 작은 원형 DNA 분자입니다. Plasmid DNA 분리법을 사용하여 박테리아 DNA를 분리하는 단계별 과정을 수행하였습니다. 2. 박테리아 배양 실험 방법에 따르면 ampicillin이 포함된 LB 배지에 박테리아 colony 1개를 넣고 37°C에서 12~16시간 동안 배양하였습니다. 이를 통해 박테리아를 증식시켜 DNA 추출을 위한 충분...2025.01.23
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[A]서강대학교 현대생물학실험2_1차 풀레포트_PCR과 Agarose gel electrophoresis and gel purification2025.01.181. Basic Laboratory Techniques 배지는 세포 배양을 위한 필요물질이 들어있는 것으로 LB broth와 LB agar plate를 이용한다. 수용성 세포를 형질전환 하고 선택배지로 제조된 LB agar plate를 이용해 생성된 colony로 형질전환 효율을 계산한다. 2. Competent Cell 수용성 세포(Competent cell)란, 외부의 DNA를 수용할 수 있는 상태의 박테리아로, 자연적으로 유도될 수 있지만 본 실험에서는 Ca2+ 용액 처리와 냉각과 열 충격을 주어 인위적으로 유도한다. 3. P...2025.01.18
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대장균 계대배양-선상 도말 평판 배양법과 gram staining2025.01.031. 대장균 계대배양 대장균의 세포증식을 위해 계대배양을 수행하였습니다. 배양된 대장균 S. aureus와 E. coli 중에서 colony 하나를 백금이의 loop 부분으로 떠서 LB agar plate에 4차 tracking 방법으로 도말하였습니다. 이후 37°C에서 over night 배양하여 균을 증식시켰습니다. 2. Gram staining 슬라이드 글라스에 멸균 증류수 한 방울을 떨어뜨리고, 배양된 E. coli와 S. aureus를 백금이의 loop 부분으로 떠서 슬라이드 위의 물방울과 잘 섞어 얇게 도말하였습니다. 이...2025.01.03
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