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[이화여대 생명과학실험1 분반1등 A+ 레포트] ELISA2025.01.211. ELISA ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay)는 antigen과 antibody 사이의 interaction을 통해 이들의 정량 혹은 정성적 분석을 하는 기법이다. 이때 사용되는 antibody에는 enzyme이 conjugation 되어 있는데, 해당 enzyme과 특정 substrate가 binding 할 시 발색 반응, 형광 반응, 발광 반응 등을 일으킨다. 이와 같은 반응이 일어난 정도를 측정함으로써 분석을 진행한다. ELISA에는 Direct ELISA, indirect ELISA...2025.01.21
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[약대 실습 레포트] 면역학 실습 레포트_면역세포에서 항염증 효과 확인(cell treat)2025.01.211. 대식세포의 염증 반응 대식세포 표면의 TLR이 PAMP를 인식하거나, 특정 cytokine에 대해 수용체에서 인식하는 경우 대식세포가 활성화 된다. 대식세포가 활성화되면, 표식작용이 증가하고 항미생물 작용이 증가하며, ROS의 활성이 증가하게 되는데 이는 iNOS의 활성을 증가시키고 아르기닌이 산소와 NADPH와 반응하여 NO가 생성되는 반응이 일어나게 된다. 활성화된 대식세포에서 IL-1, TNF-α, IL-6 등을 분비하게 되고, 이들은 염증반응 매개 물질로 림프구의 활성을 증가시킨다. 2. RAW 264.7 세포주 RAW...2025.01.21
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화공생물공학 단위조작실험1 Enzyme kinetic assay : Horseradish Peroxidase2025.01.151. Michaelis–Menten 방정식 Michaelis–Menten kinetics는 생화학분야에서 가장 잘 알려진 효소와 반응속도론에 관한 모델 중 하나이다. 이 식을 Michaelis–Menten 식이라고 부르며, 단일 기질-효소 촉매반응의 속도식의 기본이 된다. 효소 반응속도론은 효소(E)-기질(S)의 복합체[ES] 형성단계의 가역반응과 ES 복합체의 비가역 해리단계의 2단계의 반응체계로부터 구할 수 있다. 빠른 평형 가정이나 유사 정상상태 가정을 통해 Michaelis-Menten 속도식을 유도할 수 있다. 2. 효소 ...2025.01.15
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생명과학실험 ELISA 실험 레포트2025.01.161. 항원-항체 반응 항체(antibody) 또는 면역글로불린(immunoglobulin, Ig)은 항원(antigen)과 특이적으로 결합하여 항원-항체 반응을 일으키는 물질이다. 항체의 기본 구조는 Y자 모양이며, heavy chain 2개와 light chain 2개로 이루어져 있다. 항체의 결합 특이성은 무거운 사슬과 가벼운 사슬의 가변 영역의 아미노산 잔기에 의해 결정된다. 2. ELISA 실험 방법 ELISA(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay)는 항원-항체 상호작용을 이용해 항원이나 항체를 정성 ...2025.01.16
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펜타닐 투여에 따른 도파민의 변화와 측정 원리2025.01.291. 마약의 정의와 펜타닐의 위험성 마약의 사전적 정의는 중추신경계에 작용하면서 남용할 경우 인체에 위해가 있다고 인정되는 약물이다. 펜타닐은 1959년에 개발된 마약성 진통제로, 약효가 모르핀의 약 200배에 달하여 치사량이 매우 적다. 펜타닐은 암 말기 환자나 대형 수술에 사용되었으나 점차 마약으로 사용되며 사회에 큰 문제를 일으키고 있다. 펜타닐은 소화기 장애, 호흡 억제, 뇌 손상 등 심각한 부작용을 유발할 수 있다. 2. 보상체계와 중독 원리 마약은 뇌의 보상체계에 영향을 미쳐 중독을 유발한다. 마약 투여 시 도파민이 과도...2025.01.29
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ELISA 실험 보고서2025.01.031. ELISA 실험 이번 실험은 ELISA 중에서도 sandwich ELISA를 수행하였다. 항원-항체 특이적 결합반응과 효소를 이용한 발색반응을 통해 target을 정성, 정량적으로 분석하는 방법을 익히기 위한 실험이다. 실험 과정에서 coating, blocking, sample dilution, incubation, washing, substrate 반응 등의 단계를 거쳤으며, 실험 결과 sample의 IL-6 농도를 정량적으로 측정할 수 있었다. ELISA는 항원-항체 반응을 이용하여 미량의 항원이나 항체를 측정하는 방법으...2025.01.03
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항체 생성 면역 반응 유도를 통해 생성된 항체의 확인과 ELISA를 이용한 정량적 분석2025.01.231. B-cell development Bone marrow에서는 B cell의 조상 세포인 Progenitor B cell이 있는데, 이 Progenitor B cell로부터 mature B cell이 만들어진다. 이 mature B cell은 Peripheral lymphoid organ으로 이동하는데, antigen을 만나지 않아 activate 되지 않은 상태의 B cell인 naive B cell의 90%는 antigen을 만나지 못해 죽고, 10% 정도만 antigen을 만나 activation된다. Activated B...2025.01.23
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[면역학실습] NO assay와 ELISA를 이용한 resveratrol의 항염증 효과 확인 (상)2025.04.271. Resveratrol Resveratrol은 식물이 만들어내는 폴리페놀계 물질로, 포도껍질, 포도씨, 땅콩, 오디 등에 존재한다. 항암, 항바이러스, 신경보호, 항노화, 항염, 수명연장 등의 효과가 있다. 2. Macrophages 대식세포는 PRR(pattern recognition receptor)를 통해 외부 항원을 인식한다. LPS(lipopolysaccharide)는 대식세포의 TLR4을 통해 인식되어 일련의 신호전달 경로를 거치면서 NO와 활성산소종을 분비하거나 IL-6과 TNF-α와 같은 pro-inflammato...2025.04.27
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[면역학실습] NO assay와 ELISA를 이용한 resveratrol의 항염증 효과 확인 (하)2025.04.271. Macrophage 면역계 세포 Macrophage 면역계 세포들은 세포내 기생체에 대해 방어하는 역할을 수행한다. 대식세포의 항미생물 작용은 세포내 lysosome에 들어 있는 여러 가지 가수 분해 효소의 증가와 NADH oxidase의 활성에 의한 활성산소종의 생성, NO의 생성에 의해 이루어진다. 그러나 과량의 활성산소종 및 NO는 조직을 손상시키고 염증을 유발할 수 있다. 따라서 이 두 가지 활성 물질의 생성은 조절될 필요가 있다. 2. LPS (Lipopolysaccharide) LPS는 Gram staining (-...2025.04.27
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ELISA-효소면역측정법2025.01.171. ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)는 생물학 및 의학 연구에서 항원과 항체를 이용하여 특정 단백질, 바이러스, 세균 등의 존재와 농도를 정량화하는 데 널리 사용되는 강력한 기술이다. 이 효소 면역측정법은 항원-항체 상호작용을 기반으로 하여 높은 민감도와 특이성을 제공하며, 다양한 형태의 ELISA(간접 ELISA, 경쟁적 ELISA, 샌드위치 ELISA 등)를 통해 여러 실험 목적에 맞게 적용될 수 있다. 2. 간접 ...2025.01.17
