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이화여자대학교 생과실3 A+ report2025.01.171. 항체 생성 반응(Antibody production) 이 실험은 면역 반응 중 B cell의 Antibody 생성을 통해 이루어지는 체액성 면역 반응에 대해 다룬다. 이 실험의 목적은 Stimulator 조건에서 WEHI cell(mouse B cell)에 TD antigen과 TI antigen을 넣고 B세포를 활성화시킨 후, sandwich ELISA technology로 B세포에서 분비된 항체의 농도를 standard curve를 통해 측정하는 것이다. 2. B lymphocyte activation 체액성 면역반응은 비...2025.01.17
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MTT assay (WST-8 assay)2025.01.181. Tetrazolium Tetrazolium은 dehydrogenase 등의 효소에 의해 쉽게 환원되어 유색의 formazan을 형성한다. 이러한 원리로 가장 널리 사용되는 MTT tetrazolium은 노란색 수용성 기질로, 미토콘드리아에 있는 reductase에 의해 환원되어 청자색을 띄는 비수용성의 MTT formazan 이라고 불리는 crystal을 형성한다. 따라서 세포사멸에 의해 미토콘드리아가 제 기능을 하지 못하게 되면 MTT를 처리해도 formazan을 형성하지 못하게 된다. 2. MTT assay MTT assa...2025.01.18
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이화여대 생명과학실험 A+ 리포트(ELISA)2025.01.231. ELISA ELISA는 효소면역정량법으로 Antigen-Antibody interaction을 이용하여 antigen or antibody를 정성, 정량할 수 있는 실험법입니다. 항체에 효소를 부착한 후 항원-항체 반응과 효소-기질 반응을 통해 양을 측정합니다. ELISA는 Direct, Indirect, Sandwich, Competitive 방법으로 나뉩니다. 이번 실험에서는 Indirect ELISA 방법을 사용하여 항원의 유무와 농도에 따른 항체 및 효소의 결합을 정량적으로 분석하였습니다. 2. 항원-항체 반응 ELIS...2025.01.23
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항체 생성 면역 반응 유도를 통해 생성된 항체의 확인과 ELISA를 이용한 정량적 분석2025.01.231. B-cell development Bone marrow에서는 B cell의 조상 세포인 Progenitor B cell이 있는데, 이 Progenitor B cell로부터 mature B cell이 만들어진다. 이 mature B cell은 Peripheral lymphoid organ으로 이동하는데, antigen을 만나지 않아 activate 되지 않은 상태의 B cell인 naive B cell의 90%는 antigen을 만나지 못해 죽고, 10% 정도만 antigen을 만나 activation된다. Activated B...2025.01.23
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효소 면역 측정법(ELISA)2025.01.291. 항원항체 반응 항원은 외부에서 침입한 세균, 바이러스, 독소 등의 이물질을 말하고, 항체는 항원에 결합하는 면역 단백질로 B림프구에 의해 생성되어 주로 혈장에 존재한다. 항원 항체 반응은 한 가지 항체에 한 가지 항원만 반응한다는 특이성을 보이며 항원을 중성화, 응집, 침전시켜 백혈구의 식세포 작용이 잘 일어나게 한다. 2. 효소 면역 측정법(ELISA) ELISA는 항체-항원 반응을 이용하여 시료에 존재하는 물질(일반적으로 단백질)의 양과 항원-항체 반응 강도를 정량적으로 측정할 수 있는 방법이다. 직접 ELISA, 간접 E...2025.01.29
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[면역학실습] NO assay와 ELISA를 이용한 resveratrol의 항염증 효과 확인 (상)2025.04.271. Resveratrol Resveratrol은 식물이 만들어내는 폴리페놀계 물질로, 포도껍질, 포도씨, 땅콩, 오디 등에 존재한다. 항암, 항바이러스, 신경보호, 항노화, 항염, 수명연장 등의 효과가 있다. 2. Macrophages 대식세포는 PRR(pattern recognition receptor)를 통해 외부 항원을 인식한다. LPS(lipopolysaccharide)는 대식세포의 TLR4을 통해 인식되어 일련의 신호전달 경로를 거치면서 NO와 활성산소종을 분비하거나 IL-6과 TNF-α와 같은 pro-inflammato...2025.04.27
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단백질의 분석(질량, 서열, ELISA) 요약정리2025.04.301. 단백질 질량 측정 단백질의 질량을 측정하기 위해서는 단백질을 기체 상태의 이온으로 바꾼 후 전기장 하에서 질량 대 전하비(m/z)를 구하는 방식을 사용한다. MALDI와 ESI 기법을 통해 단백질을 이온화할 수 있으며, 이후 TOF 분석기를 이용하여 질량을 측정할 수 있다. 2. 항체를 이용한 단백질 검출 및 정량 항체는 특정 단백질에 결합하여 면역 반응을 일으키므로, 이를 이용하여 단백질을 검출하고 정량할 수 있다. ELISA 기법은 항체와 연결된 효소를 이용하여 단백질의 존재 유무와 양을 측정할 수 있다. Western b...2025.04.30
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면역세포의 염색 및 조직 슬라이드 제작2025.11.151. 조직의 고정법 조직 고정은 세포를 살아있는 상태와 같이 보존하는 과정으로 열고정과 화학고정이 있습니다. 화학고정은 고정액을 처리하여 염색약이 세포막을 통과하도록 돕고 세포 내 단백질과 핵산을 교차결합시킵니다. 포르말린 용액을 사용하며 고정액의 양은 조직 용적의 10-20배 정도이고 저온에서 약 5시간 소요됩니다. 포르말린은 공기 중 산소나 빛에 의해 포름산이 발생할 수 있으므로 산화방지제 사용이 필요합니다. 2. 슬라이드 제작 과정 슬라이드 제작은 고정, 탈수, 투명화, 파라핀 침투와 포매, 절편화, 파라핀 제거, 수화, 염색...2025.11.15
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