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[A]서강대학교 현대생물학실험2_1차 풀레포트_PCR과 Agarose gel electrophoresis and gel purification2025.01.181. Basic Laboratory Techniques 배지는 세포 배양을 위한 필요물질이 들어있는 것으로 LB broth와 LB agar plate를 이용한다. 수용성 세포를 형질전환 하고 선택배지로 제조된 LB agar plate를 이용해 생성된 colony로 형질전환 효율을 계산한다. 2. Competent Cell 수용성 세포(Competent cell)란, 외부의 DNA를 수용할 수 있는 상태의 박테리아로, 자연적으로 유도될 수 있지만 본 실험에서는 Ca2+ 용액 처리와 냉각과 열 충격을 주어 인위적으로 유도한다. 3. P...2025.01.18
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[일반생물학실험] 전기 영동2025.01.021. 전기 영동 전기 영동은 단백질, 아미노산, 뉴클레오티드 등의 하전된 물질을 분리하거나 분석하는 데 효과적인 방법입니다. 단백질 분자는 표면에 양전하 또는 음전하를 띠고 있어, 전극을 설치하고 전압을 가하면 양극 또는 음극으로 이동하게 됩니다. 이동 속도는 입자의 전하량, 크기, 모양, 용액의 pH와 점성도, 다른 전해질의 농도 등 여러 요인에 따라 달라집니다. 전기영동법에는 이동계면 전기영동법, 띠 전기영동법, 불연속 gel 전기영동법, SDS-PAGE, agarose gel 전기영동법 등이 있습니다. 2. DNA 전기영동 D...2025.01.02
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형질전환 실험보고서2025.05.041. 형질전환 형질전환은 외부에서 만들어진 plasmid를 plasmid가 없는 원핵 세포 cell에 넣어 그 원핵 세포가 본래 성질과는 다른 새로운 유전형질을 나타내게 하여 삽입한 plasmid를 대량으로 키우는 과정이다. 형질전환은 폐렴구균을 통해 DNA가 유전물질임을 PCR과 클로닝 등의 방법으로 증명했다. 인슐린의 경우 처음에는 돼지에게서 추출했지만 많은 수요에 비해 공급은 원활하지 못 했고 깨끗하지 않을 수도 있다는 의견 때문에 중지되었다. 그 후, 인간에게서 인슐린을 만드는 단백질(염기서열)을 찾아내어 인슐린을 공급할 방...2025.05.04
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아주대 생실1) Plasmid DNA 추출 보고서2025.05.101. 플라스미드 DNA 추출 이 실험을 통해 플라스미드 DNA를 추출하고 전기영동을 통해 플라스미드 DNA의 형태를 관찰할 수 있었습니다. 플라스미드는 생장에 필수적인 염색체 DNA와 물리적으로 분리되어 있는 대표적인 에피솜 DNA 분자로, E.coli 세균에서 플라스미드를 추출하여 DNA를 관찰했습니다. 실험에서는 여러 가지 버퍼를 사용했는데, 이는 플라스미드 DNA 추출을 위한 것입니다. 실험 결과 3kb와 10kb 부분에서 플라스미드 DNA가 관찰되었으며, 3kb 부분은 Linear DNA, 10kb 부분은 Open-circu...2025.05.10
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TECAN을 이용한 DNA quality check와 전기영동을 통한 대장균의 병원성 유형 확인2025.01.121. DNA 추출 및 정제 세포로부터 DNA를 분리하기 위해서는 먼저 세포 내 DNA가 세포 밖으로 유출될 수 있도록 세포벽 및 세포막을 분해시켜야 한다. DNA 추출은 크게 세 단계로 이루어지며, sample의 세포막을 제거하는 단계인 Lysis, DNA 구조를 제외한 불순물을 제거하는 단계인 Washing, 불순물이 필터링된 DNA 샘플만을 tube에서 용출해내는 단계인 Elution이 있다. 2. DNA quality check 추출한 DNA는 DNA quality check를 해주고, Nucleic acid quantific...2025.01.12
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Gel 제조 (SDS-PAGE 실험을 위한 사전 준비) 보고서2025.01.131. 전기영동 전기영동은 DNA와 단백질과 같은 생체 고분자들을 분리 및 정제하는 방법입니다. 전기영동 원리는 음전하를 띄고 있는 생체고분자(DNA/단백질)들에게 전기적 힘(-음전하 ->＋양전하)을 가해주어, 물질이 사이즈에 따라 분리되는 것입니다. DNA 전기영동과 단백질 전기영동(SDS-PAGE)의 차이는 DNA는 음전하를 띄고 있어 Agarose(한천) Gel에서 관찰할 수 있지만, 단백질은 양, 음전하를 갖고 있어 SDS-sample buffer와의 혼합이 필요하며 Poly Acrylamide gel에서 관찰할 수 있습니다....2025.01.13
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인천대학교 나노바이오실험(1) A 자료) 4. Plasmid perp & Gel Electrophoresis2025.01.041. Plasmid DNA 플라스미드 DNA는 세균의 세포 내에 염색체와는 별개로 존재하면서 독자적으로 증식할 수 있는 DNA이다. 유전공학에서는 세균 내 플라스미드를 세포 밖으로 빼내고 제한효소로 끊은 뒤, 필요로 하는 유전자를 삽입하여 이를 다시 세균에 넣어 배양하는 유전자재조합 기술을 사용한다. 2. Plasmid DNA 추출 방법 플라스미드 DNA를 추출하는 방법에는 크기 차이를 이용한 방법과 구조 차이를 이용한 알칼리 용해 방법(Alkaline Lysis method)이 있다. 알칼리 용해 방법은 높은 pH의 알칼리성 용액...2025.01.04
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[생화학실험] RT-PCR을 통한 간암 세포주에 대한 약물 효능 평가2025.01.291. RT-PCR RT-PCR은 역전사 반응과 PCR 반응을 이용하여 원하는 주형 mRNA의 상보적 염기쌍인 cDNA를 합성, 증폭시키는 분자생물학적 기술이다. 본 실험에서는 RT-PCR을 통해 간암 세포주 HepG2 cell에 처리한 Salsolinol이 Cyclin D1 경로에서 암세포 사멸에 유의미한 결과를 보이는지 관찰하였다. 2. Cyclin D1 Cyclin D1은 세포 주기 조절에 관여하는 단백질로, 암세포의 증식을 억제하는 역할을 한다. 본 실험에서는 Salsolinol 처리가 Cyclin D1 경로를 통해 HepG2...2025.01.29
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DNA 전기영동 실험 예비 보고서2025.01.031. DNA DNA는 deoxyribonucleic acid의 약자로, 핵산을 구성하는 기본 구조인 리보스의 2번 탄소에서 산소 원자 하나가 제거된 형태의 핵산을 의미한다. DNA는 여러 개의 뉴클레오타이드가 연결되어 있는 폴리 뉴클레오타이드로 구성된 이중 나선 가닥 형태이다. 생명체의 DNA는 보통 유전 정보를 보관하는 데에 이용된다. 2. 전기영동 전기영동은 전기장 내에서 용액 속의 펩타이드, DNA, RNA, 단백질 등의 하전된 물질들이 반대 전하의 전극을 향해서 이동하는 현상이다. 이때 하전된 물질의 전하량이나 크기, 모양,...2025.01.03
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micro capillary electrophoresis 결과레포트2025.05.161. 전기영동 전기영동이란 걸어준 전기장 내에서 서로 다른 이온, 유전자, 단백질, 세포 등과 같은 다양한 시료성분이 이동하는 현상을 정의하는 것이다. 수용액 상에서 많은 분자들이 양전하나 음전하를 띠고 있는데 이때 전기를 흐르게 하면 음전하를 띠고 있는 것은 – 전극 쪽으로 음전하를 띠고 있는 것들은 + 전극 쪽으로 이동하게 되는데 예를 들자면 DNA는 P을 가지고 있어 음전하를 띠고 있어 전기를 주게 되면 + 전극 쪽으로 이동하게 된다. 이것을 통해 DNA의 크기나 길이 등을 추측할 수 있다. 2. 모세관 전기영동 모세관 전기영...2025.05.16
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