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Characterization of Quinine and Its Determination Using Fluorometer2025.01.091. Fluorescence spectroscopy Fluorescence spectroscopy는 sample의 fluorescence intensity를 wavelength의 함수로 분석하는 분광학적 기법이다. Emission 시 특정한 파장의 형광이 방출되는 세기를 측정한다. 분석 대상의 분자 구조에 컨쥬게이션 된 방향족 고리를 가지고 있는 경우 양자 효율이 증가하여 π→π* 전자 전이의 에너지 차이가 감소한다. 2. Spectrofluorometer Fluorescence spectroscopy에서 사용하는 spectrofl...2025.01.09
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His tagged eGFP 단백질의 발현 및 정제2025.12.171. eGFP 단백질 발현 및 정제 His tagged eGFP 단백질을 E.coli BL21(DE3) 시스템에서 과발현시키고 affinity chromatography를 통해 정제하는 과정. pET28a(+) vector에 eGFP 유전자를 클로닝하고 IPTG로 유도하여 6x His tagged eGFP를 과발현. Sonication으로 세포를 파괴하고 His tag와 니켈 이온의 친화성을 이용한 정제. Ultrafiltration으로 농축하여 최종 정제 단백질 획득. 2. 단백질 정량 방법 비교 Extinction coeffic...2025.12.17
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6x His tagged eGFP의 과발현, 정제 및 정량 분석2025.12.191. 단백질 발현 및 정제 기술 6x-His tagged eGFP를 pET28a(+) 플라스미드 벡터를 이용하여 BL21(DE3) 숙주 세포에서 과발현시켰다. IPTG 유도제를 사용하여 Lac operon을 활성화하고 T7 RNA polymerase를 통해 고효율 전사를 달성했다. Sonication으로 세포를 파괴하여 단백질 혼합물을 얻었고, IMAC(Immobilized Metal Ion Affinity Chromatography)를 통해 니켈 이온과 히스티딘의 결합을 이용하여 목표 단백질을 정제했다. Ultrafiltratio...2025.12.19