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유전자 발현 분석을 위한 RT-PCR 실험2025.01.041. PCR (중합효소 연쇄반응) PCR은 target DNA의 특정 염기서열을 복제하는 기술로, template DNA, primer, dNTP, DNA 중합효소 등이 필요합니다. 온도 조절을 통해 DNA 변성, primer 결합, 신장 단계를 반복하여 DNA 단편을 기하급수적으로 증폭할 수 있습니다. 2. real-time PCR real-time PCR은 PCR 과정 중 증폭되는 DNA를 실시간으로 모니터링할 수 있는 기술입니다. 형광 검출법을 사용하여 증폭되는 DNA 양을 정량적으로 분석할 수 있습니다. 이를 통해 초기 DN...2025.01.04
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RT-PCR 실험 레포트: 원리, 방법 및 결과 분석2025.11.171. PCR(중합효소 연쇄반응)의 원리 및 역사 PCR은 소량의 시료로 DNA를 증폭시켜 대량의 표적 유전 정보를 얻는 방법으로, 1985년 캐리 멀리스에 의해 개발되었다. DNA의 특정 부분을 복제·증폭시키는 기법으로 변성, 결합, 신장의 3단계로 진행되며, 지정 영역의 DNA를 2ⁿ배만큼 증폭시킨다. 현재 생명과학 분야에서 필수적으로 이용되며, 코로나-19 검출 등 다양한 분야에 활용되고 있다. 2. RT-PCR의 종류 및 특징 RT-PCR은 RNA 바이러스 검출을 위해 역전사 반응을 시행하는 방법으로, 1-step RT-PCR...2025.11.17
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PCR과 제한효소 절단 분석 결과2025.11.131. PCR (중합효소 연쇄반응) PCR은 DNA 샘플을 선택적으로 증폭하는 분자생물학 기법입니다. 열변성, 프라이머 결합, DNA 중합효소에 의한 신장 단계를 반복하여 특정 DNA 영역을 기하급수적으로 증폭합니다. 이 과정은 유전자 진단, 법의학, 질병 검출 등 다양한 분야에서 필수적인 도구로 사용되며, 정확한 온도 제어와 사이클 수 조절이 중요합니다. 2. 제한효소 절단 (Restriction Enzyme Digestion) 제한효소는 특정 DNA 서열을 인식하여 절단하는 단백질입니다. 제한효소 절단은 PCR 산물을 분석하기 위...2025.11.13
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PCR을 통한 gene structure 분석2025.05.011. EtOH Precipitation DNA는 전하를 띄는 인산골격을 가지고 있어서 극성이다. 물도 극성이므로 물에 잘 녹는다. DNA를 뭉치게 하려면 물과 DNA간 결합을 약화시켜야 한다. Ethanol은 물보다 훨씬 덜 극성이다. 따라서 ethanol을 첨가하면 DNA의 인산기와 다른 양이온간의 결합이 강해지면서 DNA 침전을 형성한다. 이 과정을 위해선 적절한 양의 양이온이 필요하다. 너무 많으면 DNA와 같이 침전되고 너무 적으면 침전되지 못한 DNA가 생긴다. 이 실험에선 3M sodium acetate를 final 0....2025.05.01
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PCR을 이용한 유전자 증폭 및 전기영동 분석2025.12.181. PCR (Polymerase Chain Reaction) PCR은 DNA 중합효소를 이용해 특정 DNA 서열을 시험관 내에서 반복적으로 복제하여 짧은 시간 안에 수백만 배로 증폭하는 분자생물학 기술이다. 주형 DNA, 프라이머, dNTPs, DNA 중합효소 등 네 가지 주요 구성요소가 필수적이며, 변성(95℃), 결합(55~65℃), 신장(72℃)의 세 단계 온도 사이클을 반복하여 수행된다. 유전자 분석, 질병 진단, 유전자 클로닝, 법의학 등 다양한 분야에서 활용된다. 2. 역전사 PCR (Reverse Transcripti...2025.12.18
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PCR 및 전기영동을 통한 DNA 증폭 및 분석2025.12.121. PCR (중합효소 연쇄반응) PCR은 DNA 중합효소를 이용하여 DNA의 양을 증폭시키는 기술이다. 온도 변화에 따른 DNA 변성을 이용하며, Pre-denaturation, Denaturation, Annealing, Extension, Post-extension, Cooling의 6단계로 진행된다. 2~4단계를 1 cycle이라 하며 반복할 때마다 2^n의 DNA가 증폭된다. PCR의 조성은 Template DNA, Primer(F/R), Taq polymerase, dNTP, 10X buffer, 증류수로 구성되며 각각 ...2025.12.12
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PCR을 이용한 유전자 증폭실험 및 전기영동 분석2025.12.141. PCR (중합효소 연쇄반응) PCR은 DNA의 원하는 부분을 복제·증폭시키는 분자생물학적 기술이다. 95°C의 변성 단계에서 이중나선이 단일가닥으로 분리되고, 55~65°C의 어닐링 단계에서 프라이머가 단일가닥에 결합한 후, 72°C의 중합 단계에서 DNA polymerase가 새로운 이중가닥을 형성한다. 이 세 단계가 하나의 사이클을 이루며 반복되어 타겟 DNA가 지수적으로 증폭된다. PCR에는 타겟 DNA, 프라이머 2종류, 뉴클레오타이드, DNA polymerase가 필요하며, 주로 열에 강한 Taq polymerase가...2025.12.14
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PCR과 전기영동을 이용한 DNA 증폭 및 분석2025.11.141. 중합효소연쇄반응(PCR) PCR은 특정 표적 유전물질을 증폭하는 검사법으로, 소량의 DNA로부터 염기 순서가 동일한 유전물질을 대량으로 증폭할 수 있다. 열변성(94℃), 결합(62℃), 신장(72℃)의 3단계를 반복하며, 각 사이클마다 DNA가 2배로 증폭되어 n회 반복 시 2의 n승배 증폭이 가능하다. 인간의 DNA 증폭을 통한 유전질환 진단, 세균·바이러스·진균의 감염성 질환 진단 등에 활용된다. 2. DNA 구조 및 복제 DNA는 두 뉴클레오타이드 선형 중합체가 반대 방향으로 이중나선 구조를 형성하며, 염기는 나선 내부...2025.11.14
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RT-PCR & qRT-PCR 실험 결과 분석 보고서2025.12.101. RT-PCR (역전사 중합효소연쇄반응) RNA로부터 cDNA를 합성하여 PCR을 수행하는 기법입니다. RNA는 DNA보다 불안정하고 기술적 전문성이 필요하며 비활성화가 어렵기 때문에 cDNA를 사용합니다. 실험에서는 37°C에서 1시간 역전사 반응을 진행했으며, DNA PCR과 달리 단일 온도 조건을 유지하는 이유는 RNA의 안정성을 보호하고 RNase H의 활성을 제어하기 위함입니다. 2. qRT-PCR (정량적 역전사 중합효소연쇄반응) 실시간 PCR을 통해 유전자 발현을 정량적으로 측정하는 기법입니다. SYBR Green ...2025.12.10
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형질전환 식물 분석 방법 및 유전자 발현 검증2025.12.171. 형질전환 식물 확인 방법 형질전환 식물을 확인하기 위해 항생제 선택, 시각적 선택, GFP 등의 리포터 유전자 발현, GOI 분석(삽입, 복사수, 발현, 멘델 분리) 등의 방법을 활용한다. 이러한 방법들은 형질전환의 성공 여부를 판단하고 형질전환 유전자의 특성을 파악하는 데 필수적이다. 2. PCR 기반 형질전환 유전자 검출 중합효소연쇄반응(PCR)은 형질전환 유전자나 발현을 확인하는 데 사용된다. Forward와 reverse primer를 설계하여 변성(95℃), 프라이머 결합(55℃), 신장(72℃) 단계를 거친다. RT...2025.12.17
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