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미생물 배양 배지 제조 및 E.coli 접종 실험 보고서2025.05.071. 미생물 배양 배지 제조 실험에서는 미생물 배양에 기본이 되는 LB 배지를 제조하는 과정을 설명하고 있습니다. LB 배지는 tryptone, yeast extract, NaCl, agar로 구성되며, tryptone은 아미노산과 펩타이드를 공급하고, yeast extract는 질소, 당, 무기/유기물을 제공하며, NaCl은 세포 내 이온 신호전달과 삼투압 조절에 필요합니다. Agar는 고체 배지를 만드는 데 사용됩니다. 또한 R2A 배지, YM 배지, NB 배지, TBS 배지 등 다양한 종류의 배지와 그 특성에 대해서도 설명하고...2025.05.07
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미생물 배양_예비2025.01.221. 미생물 배양 미생물 배양학에 대한 기본적인 이론과 실험 방법을 설명하고 있습니다. 배지의 종류와 특성, 미생물의 개념, 배양 방법 등을 다루고 있습니다. 특히 평판도말법과 획선도말법을 통한 미생물 배양 실험 과정을 자세히 기술하고 있습니다. 2. E.coli 균주 대장균(E.coli)은 실험에 널리 사용되는 미생물 균주로, 번식 속도가 빠르고 배양이 쉬워 다양한 실험에 활용된다고 설명하고 있습니다. 3. 효모(Yeast) 균주 효모(Yeast)는 실험실에서 대량 배양이 가능하지만 대장균보다 고등한 생물이기 때문에 실험에 많이 ...2025.01.22
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세포 배양법2025.05.141. 세포 배양법 세포 배양은 생물체에서 분리해낸 세포를 체내 환경이 아닌 액체 배지, 고체 배지와 같은 외부 환경에서 키우는 것으로, 의과학과 생물학에서 자주 활용되는 기술이다. 세포 배양은 목적한 세포를 증식시키거나, 관찰하기 때문에 세포에 따라 온도, pH 등과 같은 적절한 생장 환경을 설정해야 한다. 일반적으로 배지에는 세포가 생명활동을 유지하기 위한 amino acid, glucose와 같은 영양분이 첨가되며, 때로는 목적한 세포를 제외하고 모두 제거하기 위해 항생물질을 첨가하기도 한다. 2. LB 배지 LB는 Lysoge...2025.05.14
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Taq DNA polymerase의 발현 및 정제, 확인2025.11.171. Taq DNA polymerase 발현 및 정제 Thermus aquaticus에서 분리한 Taq DNA polymerase는 높은 온도에서도 변성되지 않는 특성이 있어 PCR에 널리 사용된다. E.coli를 숙주세포로 사용하여 pTTQ18 vector에 삽입된 Taq DNA polymerase 유전자를 발현시킨다. IPTG를 첨가하여 lac operon을 활성화시켜 단백질을 과발현시킨다. 세포 파괴는 lysozyme을 이용한 효소적 방법과 계면활성제를 이용한 방법을 사용하며, 고온 처리로 다른 단백질을 변성시킨다. Ammon...2025.11.17
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E. coli와 Yeast의 Cell Culture2025.05.061. Prokaryote Prokaryote는 핵막이 없는 원핵생물을 의미하며, 단세포생물일 경우가 많고 주로 무성 생식 방법인 Binary Fission을 통해 번식한다. 이외에도 진핵생물인 Fungi에 속하는 이스트의 몇 가지 종도 Binary Fission을 한다. 2. Binary Fission Binary Fission은 가장 간단한 생식 방법 중 하나로, DNA 복제 후 세포 분열을 통해 두 개의 동일한 딸세포가 형성된다. 이러한 Binary Fission은 미생물의 유전적, 환경적 요소에 따라 생식 주기가 결정되며, 이...2025.05.06
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대장균 배양, 형질전환, Plasmid DNA 분리, DNA 전기영동 실험 보고서2025.01.121. 대장균(E.coli) 대장균(E.coli)은 그람음성 간균으로, 포자를 생성하지 않으며 1-2 microns x 30-30 micron 크기의 박테리아입니다. 섭씨 37도에서 잘 자라며, 정상적인 인간의 장에 존재하여 건강에 유익합니다. 하지만 배설물과 함께 나와 질병을 일으킬 수 있습니다. 2. 배지 배지는 미생물이나 세포를 성장시키는데 사용됩니다. 가장 일반적인 배지는 액체 영양배지나 LB배지이며, 이를 Agar와 섞어 고체배지로 사용할 수 있습니다. 이번 실험에서 사용한 LB배지는 tryptone, yeast extrac...2025.01.12
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플라스미드 정제 및 전기영동 분석 실험2025.11.171. 플라스미드 정제 (Plasmid Preparation) 세균의 유전체 DNA와 구별하여 플라스미드 DNA를 정제하는 실험이다. Mini-prep 방법을 사용하여 E.coli 배양액에서 플라스미드를 추출한다. 과정은 원심분리, 세포 현탁, 용해, 중화, 스핀 컬럼을 이용한 정제, 에탄올 세척, 용출 단계로 구성된다. 각 단계에서 특정 버퍼와 시약을 사용하여 플라스미드를 효율적으로 분리한다. 2. 겔 전기영동 (Gel Electrophoresis) 정제된 플라스미드 DNA를 분석하기 위해 0.8% agarose 겔을 사용한 전기영...2025.11.17
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형질전환과 블루-화이트 스크리닝 실험2025.11.171. 형질전환(Transformation) 형질전환은 외부의 DNA 또는 플라스미드가 세포에 도입되어 새로운 유전형질을 획득하는 현상입니다. 자연계에서는 세균 성장 곡선의 정체기에 주로 발생하지만, 실험실에서는 화학적 또는 물리적 처리를 통해 수용능 있는 세포(competent cell)를 만들어 효율적으로 형질전환을 수행합니다. 본 실험에서는 CaCl2 처리를 통해 TOP10 E.coli competent cell을 준비하고, heat shock 방식으로 플라스미드 DNA를 세포 내로 도입했습니다. 2. 블루-화이트 스크리닝(Bl...2025.11.17
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대장균 계대배양-선상 도말 평판 배양법과 gram staining2025.01.031. 대장균 계대배양 대장균의 세포증식을 위해 계대배양을 수행하였습니다. 배양된 대장균 S. aureus와 E. coli 중에서 colony 하나를 백금이의 loop 부분으로 떠서 LB agar plate에 4차 tracking 방법으로 도말하였습니다. 이후 37°C에서 over night 배양하여 균을 증식시켰습니다. 2. Gram staining 슬라이드 글라스에 멸균 증류수 한 방울을 떨어뜨리고, 배양된 E. coli와 S. aureus를 백금이의 loop 부분으로 떠서 슬라이드 위의 물방울과 잘 섞어 얇게 도말하였습니다. 이...2025.01.03
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미생물학 실습 균 배양 실험 보고서2025.01.121. 그람 염색 그람 염색은 세균을 분류하는 데 널리 사용되는 감별 염색법입니다. 그람 양성균은 crystal violet으로 청색 또는 보라색으로 염색되고, 그람 음성균은 safranin으로 분홍 또는 붉은색으로 염색됩니다. 이 실험에서는 그람 염색 기술을 익히고 그람 양성균과 그람 음성균을 구분하는 것이 목적입니다. 2. 미생물 배양 이 실험에서는 인체 부위에서 미생물을 채취하여 배지에 배양하는 실험을 진행했습니다. 이를 통해 다양한 미생물의 특성을 관찰할 수 있었습니다. 3. Escherichia coli Escherichia...2025.01.12
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