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E.coli 형질전환 실험보고서2025.01.041. 형질전환의 원리 형질전환은 외부로부터 주어진 DNA에 의하여 생물의 유전적인 성질이 변하는 현상을 말한다. 1928년 영국의 F. 그리피스가 폐렴쌍구균을 이용한 실험을 통해 발견되었다. 형질전환에 필요한 최소 DNA량은 약 10만분의 1 mol이며, double strand DNA가 single strand DNA보다 전환을 일으키기 쉽다. 형질전환 실험을 통해 유전자의 본체가 DNA라는 것이 밝혀졌다. 2. 형질전환의 메커니즘 Competent 세포는 적절한 크기의 DNA 단편과 결합할 수 있다. DNA 흡수에는 에너지가 소...2025.01.04
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미생물 배양 배지 제조 및 E.coli 접종 실험 보고서2025.05.071. 미생물 배양 배지 제조 실험에서는 미생물 배양에 기본이 되는 LB 배지를 제조하는 과정을 설명하고 있습니다. LB 배지는 tryptone, yeast extract, NaCl, agar로 구성되며, tryptone은 아미노산과 펩타이드를 공급하고, yeast extract는 질소, 당, 무기/유기물을 제공하며, NaCl은 세포 내 이온 신호전달과 삼투압 조절에 필요합니다. Agar는 고체 배지를 만드는 데 사용됩니다. 또한 R2A 배지, YM 배지, NB 배지, TBS 배지 등 다양한 종류의 배지와 그 특성에 대해서도 설명하고...2025.05.07
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E. coli와 Yeast의 Cell Culture2025.05.061. Prokaryote Prokaryote는 핵막이 없는 원핵생물을 의미하며, 단세포생물일 경우가 많고 주로 무성 생식 방법인 Binary Fission을 통해 번식한다. 이외에도 진핵생물인 Fungi에 속하는 이스트의 몇 가지 종도 Binary Fission을 한다. 2. Binary Fission Binary Fission은 가장 간단한 생식 방법 중 하나로, DNA 복제 후 세포 분열을 통해 두 개의 동일한 딸세포가 형성된다. 이러한 Binary Fission은 미생물의 유전적, 환경적 요소에 따라 생식 주기가 결정되며, 이...2025.05.06
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미생물 배양_예비2025.01.221. 미생물 배양 미생물 배양학에 대한 기본적인 이론과 실험 방법을 설명하고 있습니다. 배지의 종류와 특성, 미생물의 개념, 배양 방법 등을 다루고 있습니다. 특히 평판도말법과 획선도말법을 통한 미생물 배양 실험 과정을 자세히 기술하고 있습니다. 2. E.coli 균주 대장균(E.coli)은 실험에 널리 사용되는 미생물 균주로, 번식 속도가 빠르고 배양이 쉬워 다양한 실험에 활용된다고 설명하고 있습니다. 3. 효모(Yeast) 균주 효모(Yeast)는 실험실에서 대량 배양이 가능하지만 대장균보다 고등한 생물이기 때문에 실험에 많이 ...2025.01.22
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DNA ligation, Transformation, Mini-scale preparation of plasmid DNA2025.01.221. DNA ligation DNA ligation은 T4 DNA ligase 효소를 이용하여 DNA 말단을 phosphodiester 결합으로 연결하는 과정이다. 이 과정에서 vector와 insert의 ligation, vector의 self-ligation, insert의 self-ligation 등 세 가지 형태가 나타날 수 있다. 본 실험에서는 HindⅢ와 NdeⅠ로 double-digestion한 vector와 insert를 T4 DNA ligase로 ligation하였다. 2. Transformation ligation...2025.01.22
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박테리아 형질전환(Transformation) 실험2025.11.161. 형질전환(Transformation) 형질전환은 plasmid DNA를 E.coli에 도입하는 과정입니다. 42℃ heat shock을 통해 세포막의 유동성을 증가시켜 DNA가 통과할 수 있는 adhesion zone을 형성합니다. Heat shock 조건에서 세포 투과성이 증가되며, 이는 작은 DNA 분자가 세포 내로 진입할 수 있게 합니다. Electroporation은 전기장을 사용하는 대안적 방법입니다. 2. 회복 기간(Recovery Period) 회복 기간은 형질전환된 세포의 생존력과 클로닝 효율을 높입니다. 이 기...2025.11.16
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Taq DNA polymerase 발현, 정제 및 PCR 확인2025.12.191. Taq DNA polymerase 발현 및 정제 pTTQ18 vector의 lac operon system을 이용하여 E. coli에서 Taq DNA polymerase를 과발현시킨다. IPTG를 inducer로 사용하여 지속적인 발현을 유도하고, cell disruption(Enzymatic method, Detergent method)으로 세포를 파괴한다. Heat inactivation으로 다른 단백질을 제거하고, ammonium sulfate를 이용한 salting out과 protein dialysis를 통해 목표 단...2025.12.19
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Plasmid DNA Purification 예비보고서2025.12.141. Plasmid DNA의 구조와 특성 Plasmid는 원핵생물인 세균에서 발견되는 작은 원형의 이중 가닥 DNA 분자로, 염색체 DNA와 독립적으로 존재하며 복제될 수 있습니다. 항생제 저항성 유전자나 특정 단백질을 발현할 수 있는 유전자를 포함하고 있어 유전자 클로닝, 형질전환, 단백질 발현 연구에 널리 활용됩니다. 복제 기작에 따라 high-copy plasmid(수백~수천 개 복제)와 low-copy plasmid(제한적 복제)로 나뉩니다. 2. Alkaline Lysis Mini-prep 방법 가장 일반적으로 사용되는 p...2025.12.14
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요로감염 환아의 간호과정 사례 분석2025.12.181. 요로감염(UTI) 및 E.coli 감염 3일간 지속되는 발열과 오한으로 내원한 환아의 요로감염 사례. 소변배양 검사에서 E.coli 양성 반응 확인. 주증상은 39도의 고열, 회음부 불편감, 소변악취, 무기력함. 혈액검사에서 WBC 14800, ESR 40으로 감염 지표 상승. 항생제 투여를 통한 감염 관리 및 활력징후 모니터링으로 4일차 퇴원 시 E.coli 음성 전환 달성. 2. 고체온 간호진단 및 중재 감염과 관련된 고체온을 우선순위 1순위 간호진단으로 설정. 2시간마다 체온과 맥박 측정, FPRS 통증 사정, 소변배양 ...2025.12.18
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생물공정실험 결과보고서: Bacterial identification2025.01.041. Bacterial identification 이 실험 보고서는 Durham test와 Gram staining을 통해 샘플 박테리아를 식별하는 내용을 다루고 있습니다. Durham test 결과, 1조의 박테리아는 E. coli로 확인되었고, 2,3조의 박테리아는 Enterococcus faecalis와 Salmonella typhimurium으로 추정되었습니다. Gram staining 결과, 1,2조의 박테리아는 그람 음성균, 3조의 박테리아는 그람 양성균으로 확인되었습니다. EMB agar 실험을 통해 1조의 E. col...2025.01.04
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