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PCR 예비레포트: 유전자 클로닝을 위한 PCR 증폭2025.11.151. PCR (중합효소 연쇄반응) PCR은 특정 DNA 서열을 선택적으로 증폭하는 분자생물학 기법입니다. 본 실험에서는 유전자 클로닝을 위해 미리 선정한 특정 유전자를 제작된 프라이머를 이용하여 PCR로 증폭합니다. 이 과정에서 Taq 중합효소, 주형 DNA, Forward/Reverse 프라이머, dNTP 혼합물, 버퍼 등이 사용되며, PCR 기계에서 온도 사이클을 통해 DNA 변성, 프라이머 결합, DNA 합성 단계를 반복하여 목표 DNA를 기하급수적으로 증폭합니다. 2. 프라이머 (Primer) 프라이머는 DNA 중합효소가 D...2025.11.15
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PCR을 이용한 유전자 증폭 실험 예비 보고서2025.01.041. PCR(Polymerase Chain Reaction) PCR은 DNA 중합효소를 이용하여 DNA나 RNA의 특정 영역을 시험관 내에서 대량으로 증폭시키는 기술입니다. 이를 통해 복잡한 전체 유전체 중에서 희귀한 유전자를 분석하고 연구할 수 있습니다. PCR은 분자생물학, 의학, 농학, 환경과학 등 다양한 분야에 응용될 수 있습니다. 2. PCR 구성 요소 PCR에는 증폭 대상이 되는 DNA/RNA 템플릿, 증폭할 부분을 지정하는 프라이머, 열에 강한 DNA 중합효소인 Taq 폴리머라제, 그리고 DNA 합성에 필요한 dNTP ...2025.01.04
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PCR 예비레포트: 중합효소 연쇄반응 원리와 실험2025.11.171. PCR (중합효소 연쇄반응) PCR은 세포의 복제도구를 이용해 원하는 DNA의 특정부위를 단시간에 수백만배로 증폭하는 기술입니다. 온도 cycling을 통해 프라이머가 증폭대상 DNA에 결합하고 중합된 뒤 떨어지는 과정을 반복하면서 특정 부위의 DNA를 기하급수적으로 합성합니다. 증폭에 필요한 시간은 약 2시간으로 짧고, 실험 과정이 단순하며 자동기계를 이용해 증폭시킬 수 있습니다. PCR은 극소량의 DNA나 RNA를 대량으로 증폭하여 유용한 정보를 얻을 수 있어 다양한 분야에 활용됩니다. 2. DNA 구조와 복제 DNA는 유...2025.11.17
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[일반생물학실험]혈액에서 DNA 추출2025.01.161. DNA 추출 이 실험의 목적은 혈액에서 DNA를 추출하고, 중합효소 연쇄반응(PCR)을 통해 DNA 증폭 산물을 만들어 전기영동으로 확인하는 것입니다. PCR은 DNA 사슬 중 특정 부분을 대량으로 증폭시키는 방법으로, 처음에는 대장균에서 분리한 DNA 중합효소 I을 사용했지만 사이클이 지날 때마다 효소를 첨가해야 하는 불편함이 있었습니다. 그러나 사이키가 높은 온도에서도 활성이 유지되는 Taq DNA 중합효소가 발견되면서 PCR 실험 방법이 보편화되었습니다. 2. 중합효소 연쇄반응(PCR) PCR은 증폭시키려는 주형 DNA,...2025.01.16
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Taq 중합효소와 Annealing temperature의 특징 및 최적화2025.11.171. Taq 중합효소의 특징 Taq 중합효소는 Thermus aquaticus에서 추출한 효소로 열 안정성이 뛰어나다. 95°C에서 40분 가열 후에도 50% 활성을 유지하며, 최적 활성 온도는 70~74°C, 최적 pH는 8.2~9.0이다. 3' → 5' exonuclease 활성이 없어 9000개 중 1개 빈도로 오류가 발생한다. 3' 말단에 아데닌을 추가하여 A overhang을 형성하므로 TA cloning이 가능하다. 이러한 특성들이 PCR의 효율성과 특이성을 높이는 데 중요한 역할을 한다. 2. Annealing temp...2025.11.17
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PCR을 통한 유전자 증폭 - 예비레포트2025.01.241. PCR (Polymerase Chain Reaction) PCR은 DNA 증폭 기술로, DNA 템플릿, 프라이머, DNA 중합효소, 핵산 구성 물질 등을 이용하여 특정 DNA 서열을 선택적으로 증폭할 수 있습니다. 이 기술은 유전자 분석, 질병 진단, 범죄 수사 등 다양한 분야에서 활용됩니다. 2. DNA 증폭 과정 PCR 과정은 크게 DNA 변성, 프라이머 결합, DNA 합성의 3단계로 이루어집니다. DNA 변성 단계에서는 이중 가닥 DNA가 단일 가닥으로 분리되고, 프라이머 결합 단계에서는 프라이머가 상보적인 DNA 서열에...2025.01.24
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[건국대학교] 유전체학 DNA_replication 리포트2025.01.151. DNA 복제 개시 ORC(Origin Recognition Complex)는 이중가닥 DNA를 열어 Helicase를 불러오는 역할을 한다. Helicase는 DNA의 이중가닥을 단일가닥으로 풀어주는 효소이며, ATP를 사용한다. Topoisomerase는 Helicase가 풀어준 DNA의 꼬임 현상을 해소해준다. 2. 단일가닥 DNA 보호 SSB 단백질(Single-Strand Binding Protein)은 단일가닥 DNA가 다시 이중가닥으로 붙는 것을 막고 DNA를 endonuclease로부터 보호한다. 진핵생물에서는 R...2025.01.15
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쥐의 근육세포에서 DNA 추출 및 PCR 결과 확인2025.01.031. DNA 구조와 기능 DNA는 유전물질로, 자신과 똑같은 새 DNA를 복제하고 생물 특유의 유전형질을 발현시킨다. DNA는 두 가닥의 뉴클레오티드로 이루어진 이중나선 구조로, 염기 사이의 수소결합에 의해 안정적인 구조를 이루고 있다. DNA 복제 과정에서 부모 가닥은 그대로 보존되고 새로운 가닥이 합성되는 반보존적 복제가 일어난다. 유전자 발현은 전사와 번역 과정을 거쳐 단백질로 전환된다. 2. PCR 기술 PCR은 특정 염기서열을 증폭하는 기술로, DNA의 변성, 프라이머 결합, DNA 신장의 3단계로 이루어진다. PCR에 필...2025.01.03
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[생물공정실험] 3주차 Gene expression analysis by RT-PCR 예비보고서2025.04.261. cDNA 정의 및 합성 방법 cDNA(complementary DNA)는 RNA를 주형으로 역전사효소와 DNA 중합효소에 의해 합성된 DNA입니다. 역전사효소를 이용한 cDNA 합성에서는 RNA와 annealing 위치에 따라 3종류의 primer를 사용할 수 있습니다. (1) 역전사 효소 (reverse transcriptase; RTase), (2) RT반응에 사용하는 primer (oligo dT primer, random primer, gene-specific primer). 2. Downstream applicatio...2025.04.26
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[예비] PCR을 이용한 DNA 증폭2025.01.221. PCR 기술 PCR 기술은 DNA의 특정 부분을 증폭하는 기술로, 1983년 Kary Mullis에 의해 개발되었습니다. PCR의 원리는 자연적인 DNA 복제 과정에서 영감을 받았는데, DNA 복제는 세포 내에서 DNA 폴리머레이즈 효소에 의해 이루어지며, 이 효소는 DNA의 주형 가닥을 읽고 상보적인 뉴클레오타이드를 추가하여 새로운 DNA 가닥을 만듭니다. 2. DNA 복제 과정 DNA 복제 과정은 크게 3가지로 진행됩니다. 1) 시작: 복제 기점에서 DNA 이중나선이 풀리고 단일 가닥으로 분리됩니다. 2) 신장: 프라이머가...2025.01.22
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