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세포생리학실험_cell culture, Genomic DNA Isolation_genomic DNA 추출, total RNA 추출, 전기영동2025.01.131. 세포 배양 HEK 293T 세포를 DMEM 배지와 FBS를 사용하여 배양하였다. 세포는 처음에는 동글동글한 모양이었지만 점차 바닥에 붙어 자라나면서 별모양의 형태를 띠었다. 배지의 색이 점점 노란색으로 변하면서 세포가 죽기 시작하였다. 이를 통해 세포가 일정 횟수의 분열을 한 후 노화되는 과정을 관찰할 수 있었다. 2. Genomic DNA 추출 HEK293T 세포에서 genomic DNA를 추출하였다. 세포를 용해시킨 후 단백질과 RNA를 제거하는 과정을 거쳐 순수한 DNA를 분리하였다. 전기영동 결과 DNA 밴드가 마커보다...2025.01.13
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[A+ 리포트] 세포생물학실험 - 세포배양배지의 종류와 특성, DMSO의 세포 독성, 70 EtOH 사용 이유2025.04.251. 세포배양배지의 종류와 특성 세포의 배양을 위해선 세포가 생장할 수 있는 특정한 환경의 조성이 필요하다. Growth media라고도 불리는 세포배양배지는 액체 혹은 고체 상태로써 세포가 생장하는데 필요한 여러 종류의 아미노산, 무기염류, 비타민, 생장인자, 완충제 등이 포함되며 특히 미생물 배지와는 가장 큰 차이점이라고 할 수 있는 5~20%의 혈청(serum)이 추가되는 등의 각종 성분들이 포함되어 있다. 일반적으로 사용되는 세포배양배지의 종류로는 BME, MEM, DMEM, RPMI 1640 등이 있으며 각각의 특성이 다르...2025.04.25
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세포 배양 시 배지 교체 방법2025.01.081. 세포 배양 세포 배양은 생명체를 구성하는 조직으로부터 세포를 분리한 후 체외(in vitro) 환경에서 배양하는 것을 의미한다. 세포를 지속해서 배양하기 위해서는 세포를 떼어내어 세포 현탁액으로 만들고, 희석하여 새로운 배양용기에 plating하게 되는데 이를 계대배양(subculture)이라고 한다. 세포 배양에서 media 교체는 세포의 생존에 중요한 영향을 미치는데, 이는 media에 영양소가 풍부하게 들어있어 세포 증식에 필수적이며, 동시에 세포의 대사 활동으로 인해 발생한 노폐물이 배출되어야 하기 때문이다. 2. PB...2025.01.08
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계대배양 실험 결과 보고서2025.01.131. 계대배양 실험 이번 실험을 통해 HeLa cell의 배지 조성 방법과 시약들의 용도를 알 수 있었고, 마이크로 피펫과 파이펫에이드 사용법을 익힐 수 있었습니다. 세포가 오염되지 않도록 클린벤치에 들어가는 모든 물품을 소독하고, 배지 및 시약의 뚜껑과 병의 입구, 배양 접시의 뚜껑을 열고 닫을 때 화염멸균을 하는 등 실험 과정에서 주의해야 할 점들을 배울 수 있었습니다. 실험 중 파이펫에이드 사용 시 거품이 생기는 문제가 있었지만, 이를 해결하는 방법을 찾아 개선할 수 있었습니다. 2. 세포 배양 세포 배양 실험에서는 부착성 세...2025.01.13
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세포 배양2025.01.231. 세포 배양 이 실험은 세포 배양 및 계대 배양 실험으로, 세포의 성장 주기와 세포 배양 방법을 익히고 hemacytometer를 사용하여 세포 수를 계산하는 것이 목적입니다. 실험 과정에서는 배지 제거, HBSS를 이용한 세포 세척, T-EDTA를 이용한 세포 분리, DMEM(+)을 이용한 세포 중화, 원심분리, Trypan blue를 이용한 세포 계수 등의 방법을 사용합니다. 2. 세포 성장 주기 세포 배양 과정에서 관찰할 수 있는 세포 성장 주기는 다음과 같습니다. 1) 유도기(lag phase): 새로운 배지에 접종한 후...2025.01.23
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[유전학] 세포배양 방법 및 과정 분석2025.05.031. 세포 배양 세포 배양은 일반적인 자연환경과는 다른 통제된 조건에서 세포가 성장하는 과정을 총칭한다. 세포가 살아있는 조직에서 분리가 된다면 생존할 가능성이 낮아지기 때문에 신중하게 제어된 조건을 유지해줄 필요가 있다. 이 조건은 세포의 유형에 따라 다르지만 일반적으로 아미노산, 탄수화물, 비타민, 무기질 등의 필수 영양소와 호르몬, 항생제 등이 필요하고 이를 적절하게 공급하기 위한 배지가 있는 적절한 용기로 구성 되어야한다. 2. 세포 배양 방법 세포 배양을 하기 위해서는 배양할 세포를 얻어와야 하는데 그 방법에는 크게 두가지...2025.05.03
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[약대 실습 레포트] 면역학 실습 레포트_Hybridoma cell & antibody purification2025.01.211. Hybridoma cell Hybridoma cell은 항체를 생산하는 B 림프구와 myeloma cell을 융합하여 얻은 세포로, 단일클론항체를 생산하는 세포주입니다. 이 세포주는 한 종류의 항체를 생산하는 능력과 반영구적으로 세포를 증식하는 능력을 동시에 갖고 있습니다. 2. Antibody purification Antibody purification의 원리는 Protein A나 G와 항체의 Fc region의 친화력을 이용하여 affinity chromatography를 시행하여 항체를 분리하는 것입니다. 이때 pH를 ...2025.01.21