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MTT assay A+ report2025.01.171. MTT assay MTT assay는 세포 대사 활성을 색 변화로 측정하는 실험으로 세포 독성 실험이라고도 한다. Tetrazolium salt인 MTT를 살아 있는 세포에 처리하면, 미토콘드리아 안의 oxidoreductase enzyme(NADPH)에 의해 환원되어 보라색을 띠는 formazan 결정체를 형성한다. 죽은 세포의 경우, 미토콘드리아가 터져 없으므로 formazan이 형성되지 않고, 색을 띠지 않는다. 이렇게 생성된 formazan은 비수용성으로, 유기용매 또는 계면활성제 등에 녹여 570nm에서 흡광도(세포의...2025.01.17
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생물공정실험 예비보고서_Mammalian Suspension Cell Culture2025.01.041. 세포 배양 이 보고서는 동물 세포 배양에 대한 기술을 다루고 있습니다. 주요 내용은 세포 계대 배양, 부착형 세포 배양, 부유형 세포 배양, 세포 성장 패턴, CHO 세포주 등입니다. 세포 배양 기술은 치료용 단백질 생산 등 다양한 생물공정에 활용되는 핵심 기술입니다. 2. 세포 계수 및 생존율 측정 보고서에서는 혈구계수기와 트리판 블루 염색을 이용한 세포 계수 및 생존율 측정 방법을 설명하고 있습니다. 이를 통해 배양 중인 세포의 건강 상태를 확인하고 최적의 배양 조건을 찾을 수 있습니다. 3. CRISPR-Cas9 유전자 ...2025.01.04
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[만점 레포트] 연세대학교 생화학실험(1) 13주차 원심분리를 이용한 마우스 혈액면역세포 분리2025.05.041. 마우스 말초혈액 단핵세포 분리 마우스 말초혈액에서 단핵세포를 원심분리 방법을 이용하여 분리하는 실험 내용이 포함되어 있습니다. 말초혈액 단핵세포에는 림프구, 단핵구, 자연살해세포 등이 포함되며, 이를 분리하여 면역학 연구에 활용할 수 있습니다. 2. 림프구 아집단 분리 말초혈액 단핵세포에는 다양한 림프구 아집단이 포함되어 있습니다. 이 실험에서는 원심분리를 통해 림프구 아집단을 분리하는 방법이 설명되어 있습니다. 이를 통해 각 림프구 아집단의 특성을 연구할 수 있습니다. 3. 세포 생존율 측정 분리된 말초혈액 단핵세포의 생존율...2025.05.04
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Crystal Violet Assay 세포생존력검사, 세포독성검사 결과 레포트2025.05.111. Crystal Violet Assay 이번 실험에서는 in vitro 상에서 세포의 독성에 영향을 미치는 약물을 농도에 따라 처리해 세포의 생존력을 확인하고자 한다. Crystal Violet Assay 방법을 통해 농도별 cisplatin 투여시 B16F10 cells의 control 대비 세포 생존력을 확인할 수 있다. 2. 세포독성검사 세포독성 검사는 생체(in vivo)에서 하는 방법과 생체 외(in vitro)에서 하는 방법으로 분류할 수 있다. 생체 외에서는 주로 배양된 세포나 조직을 재료로 하는 경우가 대부분이다....2025.05.11
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CHO 세포 현탁 배양 실험 결과 보고서2025.01.041. CHO 세포 특성 이 실험의 목적은 CHO 세포의 특성을 알아보고, 직접 현탁 배양된 세포의 생존율을 Hemocytometer와 Countess II를 이용하여 측정하는 것입니다. CHO 세포는 포유류 세포주로, 생물공정 실험에 널리 사용되는 세포주입니다. 이 실험을 통해 CHO 세포의 특성과 현탁 배양 시 세포 생존율을 확인할 수 있습니다. 2. 현탁 세포 배양 실험 방법에 따르면, 먼저 CHO 세포가 배양되어 있던 플레이트의 오래된 배지를 버리고 FBS로 세척하였습니다. 그 후 세포 계수를 위해 EP tube에 옮겨 담았습...2025.01.04
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MTT assay를 통한 세포 viability 측정2025.01.051. MTT assay MTT assay는 살아있는 세포에서만 환원 반응이 일어나는 MTT에 의한 세포 대사 활성을 평가하는 방법입니다. 항암제를 투여하지 않은 배지와 농도별로 항암제를 처리한 배지의 UV 흡광도 값을 비교하여 세포의 생존 비율(cell viability)을 계산할 수 있습니다. 실험 결과, DOX의 농도가 증가할수록 세포 생존율이 감소하는 것을 확인할 수 있었습니다. 2. 항암제 독성 평가 항암제를 세포 배양배지에 투여한 후 배양한 암세포는 약제의 농도에 따라서 생존 세포의 비율이 줄어듭니다. MTT assay를 ...2025.01.05
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Cell Proliferation Analysis by MTT Assay2025.01.211. MTT Assay MTT assay는 세포의 증식능을 분석하는 실험 기법으로, 세포의 대사에 관여하는 미토콘드리아 내 NADH-dependent cellular oxidoreductase enzyme을 통해 MTT가 formazan으로 환원되는 원리를 이용한다. 이 실험은 배양한 세포 수를 변수로 하여 MTT assay를 통해 각 condition 별 세포의 대사 활성이 어느 정도로 측정되는지 도출하고, 이의 원리에 대해 이해하는 것을 목표로 한다. 2. 세포 증식 분석 MTT assay는 세포의 생존율 및 증식률을 측정하는 ...2025.01.21
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의료기기 세포독성 설명 및 간접접촉법(한천확선법) 시험방법 및 평가2025.01.211. 세포독성(Cytotoxocity) 세포독성이란 포유류 세포(mammalian cell)를 이용하여 체외(In vitro)에서 의료기기 세포 독성을 평가하는 것입니다. 시험방법에는 용출물 시험, 직접 접촉법 시험, 간접 접촉법 시험(한천확산법)이 있으며, 관련 규격으로는 ISO 10993-5, ISO 7405, ISO 10993-12가 있습니다. 2. 세포독성 시험 용어 세포독성 시험에 사용되는 용어에는 Culture Vessels, Positive control material, Negative control material,...2025.01.21
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세포 계대배양 Cell subculture 및 cell thawing 프로토콜2025.01.241. 세포 계대배양 세포 계대배양은 세포를 새로운 배양 용기로 옮겨 배양하는 과정입니다. 이 프로토콜에서는 세포 해동, 세포 계수, 세포 계대배양 등의 단계를 자세히 설명하고 있습니다. 세포 배양 시 배지, 혈청, 항생제의 비율과 사용량, 배양 온도 및 CO2 농도 등의 조건을 잘 관리해야 합니다. 2. 세포 해동 세포를 액체 질소 탱크에서 꺼내어 37°C 수조에서 1-2분 내에 해동시킵니다. 해동된 세포를 배지가 든 falcon 튜브에 옮기고 원심분리하여 상층액을 제거한 뒤 새로운 배지를 넣어 세포를 현탁합니다. 이후 세포 수를 ...2025.01.24
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식품미생물학 미생물의 검출 및 균수측정법2025.05.071. 균수측정법 총균계수법, 생균계수법, 표준평판계수법, 최확수법 등 다양한 균수측정법에 대해 설명하고 있습니다. 각 방법의 원리, 장단점, 실험방법 등을 자세히 다루고 있습니다. 2. 선택배지와 분별배지 선택배지는 특정 미생물의 성장을 돕거나 다른 미생물의 성장을 억제하는 성분을 포함하고 있어 특정 미생물만 자랄 수 있는 배지입니다. 분별배지는 특정 미생물과 다른 미생물의 콜로니를 구별할 수 있는 배지입니다. 3. 종균배양기술 미생물의 존재 확인 과정에 대해 설명하고 있습니다. 1차 증균배양과 2차 선택적 증균배양을 통해 선택배지...2025.05.07