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Lowry-Folin 법을 이용한 단백질 정량2025.01.271. 단백질 정량 단백질 정량은 단백질의 발색반응과 흡광도 측정을 사용한다. 단백질은 농도에 비례하여 발색하기 때문에, 흡광도 측정으로 농도를 분석할 수 있다. Lowry-Folin 법은 Biuret 법에 추가 요소가 포함된 정량법으로, 강알칼리성 상태에서 2가 구리이온과 착염을 형성하여 발색하고 아미노산 중 트립토판, 타이로신, 시스테인이 Folin 시약을 환원시켜 청색으로 발색하는 반응을 이용한다. 2. BSA 표준용액 단백질 정량을 위해서는 정확한 농도를 알고 있는 BSA(bovine serum albumin) 표준용액을 사용...2025.01.27
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식품의 조단백 정량분석(Micro-Kjeldahl 법[붕산법])2025.01.241. 식품 조단백 정량분석 식품의 단백질 함량을 측정하는 것은 식품의 품질을 결정하는 중요한 요인이다. 이 실험에서는 Micro-Kjeldahl 법(붕산법)을 사용하여 쌀귀리의 조단백 함량을 측정하였다. 실험 과정에는 분해, 증류, 중화, 적정의 4단계가 포함되며, 분해 과정에서 발생하는 유해 가스는 Scrubber를 통해 중화시켰다. 실험 결과, 쌀귀리의 조단백 함량은 11.86±0.04%로 나타났으며, 신뢰수준은 99.62%로 높은 신뢰도를 보였다. 1. 식품 조단백 정량분석 식품 조단백 정량분석은 식품 성분 분석에 있어 매우 ...2025.01.24
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생명과학에서의 흡광도 측정 (비어-램버르트 법칙, 단백질, DNA 정량)2025.05.091. 흡광도와 Beer-Lambert's law (비어-램버르트 법칙) 흡광도(absorbance)는 물질이 특정 파장의 복사선을 얼마나 잘 흡수하는지를 나타내는 척도이다. Beer-Lambert 법칙은 흡광도와 시료의 몰농도, 빛이 물질을 통과하는 길이의 관계를 설명한다. 이에 따르면 흡광도는 빛이 물질을 통과하는 길이와 시료의 몰농도에 비례한다. 2. 분광광도법 분광광도법은 물질에 빛을 쬐어주어 물질의 에너지 상태를 변화시키고, 이를 통해 물질의 정성 및 정량 분석을 수행하는 방법이다. 자외선-가시광선 분광광도계를 이용하여 20...2025.05.09
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자외 및 가시분광광도계2025.01.111. 자외 및 가시분광광도계 자외 및 가시 분광광도계는 단백질을 정량할 수 있는 중요한 실험 기법이다. 단백질은 세포보다도 훨씬 작아 육안으로 관찰하기 어려우므로 분광광도법을 이용하여 단백질의 양을 정량할 수 있다. 분광광도법은 효소반응 연구와 약물 효과 평가에 활용될 수 있다. 실험에서는 주로 자외선과 가시광선 영역의 빛을 사용하며, 비어의 법칙에 따라 시료의 농도와 흡광도 간의 관계를 파악할 수 있다. BCA assay는 단백질이 구리 이온을 환원시키는 성질을 이용하여 단백질의 양을 정량하는 방법이다. 1. 자외 및 가시분광광도...2025.01.11
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일반생물학실험 결과레포트 [실험9] 핵산과 단백질 정량2025.05.131. 핵산 정량 실험을 통해 추출한 plasmid DNA의 농도를 spectrophotometer로 측정하였다. 측정 결과 DNA 농도는 52.00ug/ml로 나타났다. DNA의 순도를 확인하기 위해 A260/A280과 A260/A230 비율을 계산하였다. A260/A280 비율은 2.080으로 순수한 DNA 범위인 1.8-2.0을 벗어나 있어 DNA가 손상되었거나 오염되었음을 알 수 있다. A260/A230 비율은 0.881로 순수한 DNA 범위인 2.0-2.2를 크게 벗어나 있어 EDTA, 탄수화물, 유기용매 등의 오염이 있는 ...2025.05.13
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[만점 레포트] 연세대학교 생화학실험(1) 5주차 method for protein concentration determination2025.05.041. Protein Concentration Determination 이 프레젠테이션에서는 단백질 농도 측정을 위한 다양한 방법들을 소개하고 있습니다. 저브리 방법, 브래드포드 방법, BCA 방법 등 여러 가지 방법론이 설명되어 있으며, 각 방법의 원리와 장단점, 적용 범위 등이 자세히 다루어지고 있습니다. 또한 실험 절차와 계산 방법도 구체적으로 제시되어 있어 실제 실험에 활용할 수 있는 정보를 제공하고 있습니다. 2. Spectrophotometry 단백질 농도 측정을 위해 다양한 분광광도법이 소개되고 있습니다. UV 분광광도법...2025.05.04
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미지 시료의 단백질 정량 - Kjeldahl method 활용2025.05.101. 단백질 정량 본 실험에서는 Kjeldahl method를 사용하여 미지의 시료(Rat 사료, 2g)에 함유된 질소를 정량하고, 이를 단백질량으로 환산하여 시료 중의 단백질량을 알아내었다. 실험 결과 시료의 조단백질 함량은 18.82%로 나타났다. Kjeldahl 기구의 각 부위에서 일어나는 화학적 반응(분해, 증류, 중화, 적정)도 고찰하였다. 2. 단백질 정량법 단백질 정량법에는 세미마이크로킬달법, 홀몰적정법, 반스라이크법 등이 있으며, 본 실험에서는 semi-micro kjeldahl 법을 사용하였다. 이 방법은 시료 내 ...2025.05.10
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[생화학실험] A+, 세포파쇄 및 단백질 정량법 실험2025.01.031. 세포막 구조 동·식물(진핵세포)의 세포막은 단백질과 인지질로 구성된 이중막 구조이며, 박테리아(원핵세포)의 세포막도 이와 유사한 구조를 가지고 있다. 단백질은 온도, pH 등의 요인에 의해 구조와 기능이 변화할 수 있다. 2. 세포 파쇄 방법 세포막을 파쇄하여 세포 내 단백질 및 대사체를 안정적으로 추출하는 다양한 방법이 있다. 초음파 파쇄, 칼날 분쇄, 막자와 막자사발 분쇄, 효소 파쇄, 삼투압 파쇄, 알칼리 처리, 압착법 등이 있으며 각각의 원리와 특징이 다르다. 3. 단백질 추출 및 정량 단백질은 온도, pH 등의 요인에...2025.01.03
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세포 용해를 통한 단백질 추출2025.01.021. 세포 용해 방법 세포 용해(또는 세포 파괴)에 사용되는 다양한 물리적, 화학적 방법을 살펴보고, RIPA 용해 완충액을 사용하여 세포를 파괴하고 세포 단백질을 얻을 수 있다. RIPA 용해 완충액은 세포막, 핵막, 단백질 결합을 모두 분해할 수 있는 강한 계면활성제를 포함하고 있어 세포질, 핵 단백질 등 다양한 단백질을 추출할 수 있다. 2. 단백질 추출 과정 배양 중인 MCF-7 세포를 DPBS로 세척하고 세포 긁개로 세포를 모아 원심분리하여 세포 펠릿을 얻었다. 이 세포 펠릿에 RIPA 용해 완충액을 처리하여 세포를 용해하...2025.01.02
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Bradford법을 이용한 단백질의 정량 분석2025.01.151. 단백질 정량 분석 실험 목적은 Bradford법을 이용하여 단백질 정량을 하고 Standard curve를 그리는 것입니다. Bradford법은 산성용액에서 Coomassie brilliant blue 염료가 단백질과 결합하여 최대 흡광도가 595 ㎚로 이동하는 원리를 이용합니다. 따라서 595 ㎚에서의 흡광도가 단백질 농도와 비례합니다. 이 방법은 빠르고 비단백질성분들에 의한 방해도 거의 없어 실험실에서 가장 자주 사용하는 단백질 정량법입니다. 2. 단백질 정량의 중요성 단백질 정량은 생화학 실험에서 기본이 되는 과정입니다....2025.01.15