[식품미생물학실험 레포트] PCA 제조와 손의 균 배양

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문서 내 토픽

• 1. PCA 제조

  이번 실험의 목적은 직접 plate count agar을 제조해보고, petri dish에 손의 소독 전과 후의 세균을 배양하는 것이다. PCA를 물과 영양분을 섞어 삼각 플라스크에 담은 뒤, magnetic bar와 함께 가열해준다. 잠시 식힌 배지를 autoclave에서 멸균한 뒤 petri dish에 담아 굳힌다. 이 petri dish를 반으로 나누어 한 쪽에는 소독하지 않은 손을, 다른 쪽에는 소독한 손을 이용하여 균을 묻힌 뒤 배양한다.

• 2. 손의 균 배양

  실험 결과에 큰 오차의 원인이 존재했다. 손의 균을 배양하기 전과 후의 차이가 보이지 않을 만큼 세균이 배양되지 못했다. 이는 처음부터 손에 균이 적었기 때문이며, 물과 비누로 손을 닦아 세균을 씻어내었고, 손톱을 짧게 잘라 균이 자라는 환경을 줄였기 때문이다. 또한 살균한 손으로 배지에 균을 묻힐 때 선을 넘어 살균 전 영역에도 묻혀 에탄올이 균을 죽였을 가능성이 있다.

• 3. 멸균 방법

  멸균 방법에는 살균제를 이용한 살균, 화염 살균, 건열살균, 습열살균, 고압증기멸균 등이 있다. 화염살균은 알코올 램프나 가스버너를 이용하여 불꽃으로 살균하는 방법이다. 살균제를 이용한 살균은 가열살균이 어려운 무균실이나 무균상자, 초자 기구 등과 실험대 및 손 등을 살균할 때 이용한다. 건열살균법은 dry oven을 이용하여 피펫, petri dish 등의 살균에 이용된다. 습열살균법에는 상압습열살균법과 자비소독이 있다. 고압증기멸균법은 autoclave 등을 이용한 살균법으로 내열성 포자나 호열균을 단시간에 사멸시킬 수 있다.

• 4. Clean bench

  Clean bench는 세균의 배양이나 배지의 제조와 같은 실험 시에 미생물의 오염을 방지하고 무균상태를 유지시켜 주는 박스형의 실험 용기이다. Fan은 통기를 시켜 멸균 공기가 filter를 통과할 수 있도록 밀어주는 역할을 한다. Pre-filter와 HEPA filter를 통과한 공기가 실험대 안으로 들어오게 된다. UV lamp는 공기 및 수분을 살균하며, 공간의 살균을 목적으로 Clean bench에 장치되어 사용된다.

• 5. 배지 제조

  PCA의 구성은 0.5% peptone, 0.25% yeast extract, 0.1% glucose, 1.5% agar이며, 25℃에서는 pH가 중성이다. 배지를 만드는 과정에서 PCA를 칭량할 때 오차가 발생했고, 증류수를 메스실린더로 잴 때도 오차가 발생했다. 또한 배지를 petri dish에 부을 때 배지의 양이 적절하지 않았다.

• 6. 배지 배양

  petri dish를 뒤집어 배양하는 이유는 뚜껑에 맺힌 수증기가 배지에 떨어져 배양에 영향을 주기 때문이다. 또한 배양한 미생물은 colony를 형성하여 CFU로 세게 되는데, 물이 colony 사이에 존재하면 colony끼리 서로 붙기 때문이다.

• 7. Magnetic bar

  Magnetic bar는 잘 녹지 않는 시약을 용매에 녹일 때 도움을 주는 기구이다. Hot plate 처럼 내부에 자석이 들어있는 기구 위에 올려놓게 되면, plate 안의 자석이 회전하면서 magnetic bar도 회전한다. 이를 통해 용질이 잘 섞이도록 도와준다.

• 8. 오염 원인 분석

  배지에서 곰팡이가 발생한 원인으로는 손톱 밑의 곰팡이, 배지 제조 과정의 오염, clean bench 내부의 오염, 배지를 부을 때 손의 균 유입 등을 생각해볼 수 있다. 이를 방지하기 위해서는 손톱을 짧게 자르고, 알코올 램프로 철저히 멸균하며, clean bench 내부를 주기적으로 살균해야 한다.

Easy AI와 토픽 톺아보기

• 1. PCA 제조

  PCA(Plate Count Agar)는 세균 배양을 위한 일반적인 배지로, 세균의 수를 정량적으로 측정하는 데 사용됩니다. PCA 제조 시 주요 고려사항은 멸균, 배지 성분의 정확한 배합, 배지의 pH 조절, 배지 분주 및 보관 등입니다. 이러한 과정을 정확히 수행하여 오염 없이 균일한 품질의 PCA를 제조하는 것이 중요합니다. 또한 PCA 제조 시 무균 기술을 적용하여 외부 오염을 방지하는 것이 필수적입니다. 이를 통해 신뢰할 수 있는 세균 배양 결과를 얻을 수 있습니다.

• 2. 손의 균 배양

  손의 균 배양은 개인 위생 관리와 작업장 청결도를 확인하는 데 유용한 방법입니다. 이를 통해 작업자의 손에 존재하는 세균 수와 종류를 파악할 수 있습니다. 손의 균 배양 시 주요 고려사항은 적절한 배지 선택, 무균적인 시료 채취, 정확한 배양 및 계수 방법 등입니다. 또한 정기적인 손의 균 배양을 통해 작업자의 개인 위생 관리 수준을 모니터링하고 개선할 수 있습니다. 이는 제품 오염 방지와 작업장 위생 관리에 중요한 역할을 합니다.

• 3. 멸균 방법

  멸균은 미생물을 완전히 제거하는 과정으로, 실험실 및 제조 현장에서 매우 중요한 작업입니다. 멸균 방법에는 고압증기멸균, 건열멸균, 화학멸균 등이 있으며, 각 방법의 특성과 장단점을 고려하여 적절한 방법을 선택해야 합니다. 멸균 과정에서는 멸균 시간, 온도, 압력 등의 조건을 정확히 관리해야 하며, 멸균 후 오염 방지를 위한 무균 취급 기술도 필요합니다. 이를 통해 안전하고 신뢰할 수 있는 실험 및 제품 생산이 가능합니다.

• 4. Clean bench

  Clean bench는 무균 작업을 수행하는 데 필수적인 장비입니다. Clean bench 내부의 공기는 HEPA 필터를 통해 여과되어 깨끗한 상태를 유지하며, 이를 통해 외부 오염원으로부터 실험 시료와 작업자를 보호할 수 있습니다. Clean bench 사용 시 주요 고려사항은 적절한 작업 절차 준수, 정기적인 청소 및 필터 교체, 작업자의 무균 기술 숙련 등입니다. 이를 통해 Clean bench의 성능을 최적화하고 실험 및 제조 과정의 오염을 방지할 수 있습니다.

• 5. 배지 제조

  배지 제조는 미생물 배양을 위한 필수적인 과정입니다. 배지 제조 시 주요 고려사항은 배지 성분의 정확한 배합, 멸균 과정의 적절성, 무균 기술 적용, 배지의 pH 및 삼투압 조절 등입니다. 이를 통해 균일하고 안정적인 품질의 배지를 제조할 수 있습니다. 또한 배지 제조 과정에서 오염을 방지하기 위해 무균 기술을 철저히 적용해야 합니다. 이는 실험 및 제품 생산의 신뢰성과 재현성을 확보하는 데 매우 중요합니다.

• 6. 배지 배양

  배지 배양은 미생물 실험 및 제품 생산에서 핵심적인 과정입니다. 배지 배양 시 주요 고려사항은 적절한 배양 온도, 배양 시간, 배양 조건(호기성, 혐기성 등) 등입니다. 이를 통해 목적하는 미생물의 최적 성장 조건을 제공할 수 있습니다. 또한 배양 과정에서 오염을 방지하기 위해 무균 기술을 철저히 적용해야 합니다. 이는 실험 및 제품의 신뢰성과 재현성을 확보하는 데 매우 중요합니다. 정확한 배양 기술과 철저한 오염 관리를 통해 안전하고 효과적인 미생물 실험 및 제품 생산이 가능합니다.

• 7. Magnetic bar

  Magnetic bar는 배지 및 용액의 교반을 위해 사용되는 필수적인 실험 도구입니다. Magnetic bar 사용 시 주요 고려사항은 적절한 크기와 형태의 bar 선택, 교반 속도 및 시간 관리, 멸균 및 오염 방지 등입니다. 이를 통해 균일한 혼합과 안정적인 실험 결과를 얻을 수 있습니다. 또한 Magnetic bar 사용 시 무균 기술을 적용하여 외부 오염을 방지해야 합니다. 이는 실험의 신뢰성과 재현성을 확보하는 데 매우 중요합니다.

• 8. 오염 원인 분석

  오염 원인 분석은 실험 및 제품 생산 과정에서 발생하는 오염을 해결하기 위한 필수적인 과정입니다. 오염 원인 분석 시 주요 고려사항은 오염 양상 관찰, 오염원 추적, 오염 경로 파악, 오염 방지 대책 수립 등입니다. 이를 통해 오염의 근본 원인을 파악하고 효과적인 대응 방안을 마련할 수 있습니다. 또한 오염 원인 분석 과정에서 무균 기술을 적용하여 추가적인 오염을 방지해야 합니다. 이는 실험 및 제품의 신뢰성과 안전성을 확보하는 데 매우 중요합니다.