소개글
"방사면역측정법"에 대한 내용입니다.
목차
1. 면역측정법
1.1. 전기영동
1.1.1. 전기영동의 정의 및 목적
1.1.2. 면역전기영동의 원리
1.1.3. 실험 방법
1.2. 방사면역 측정법(RIA)
1.2.1. 방사면역 측정법 정의 및 목적
1.2.2. 방사면역 측정법의 원리
1.3. 고정상 면역측정법
1.3.1. 고정상 면역측정법 정의 및 목적
1.3.2. 고정상 면역측정법의 원리
1.3.3. 효소면역측정법(ELISA)
2. ELISA 실험
2.1. 실험 제목
2.2. 실험날짜
2.3. 실험목적
2.4. 실험 준비물
2.5. 실험 방법
2.6. 실험 결과
2.7. 실험 고찰
3. 여성건강검진
3.1. 유방 촬영 검사
3.2. 자궁경부 세포진 검사
3.3. 부인과 초음파
3.4. 인유두종 바이러스 검사
3.5. 성병 검사
3.6. 갑상선 초음파
3.7. 골다공증 검사
3.8. 여성 호르몬 검사
3.9. 종양표지자 검사
3.10. 혈액검사
4. 참고 문헌
본문내용
1. 면역측정법
1.1. 전기영동
1.1.1. 전기영동의 정의 및 목적
전기영동은 전해질 중에 존재하는 하전입자에 직류전압을 걸면 정의 하전 입자는 음극으로, 부의 하전 입자는 양극으로 향하여 이동한다는 원리를 이용한 기법이다. 동일 방향으로 이동하는 하전 입자의 사이에서도, 전기영동 할 때 이동속도가 다른 성분은 점차로 분리되어 간다. 따라서 이 기법은 용액 중에서의 이동이기에 전기영동이라 불린다. 면역학적으로는 혈청의 항원의 혼합물 및 혈청 단백질 조사에 사용된다.
1.1.2. 면역전기영동의 원리
면역전기영동의 원리는 항원과 항체간의 상호작용에서 침강반응을 이용하는 것이다. 혈청 전기영동 시 폴리아크릴아마이드 겔에 가한 단백질 혼합물이 전기장에서 분리되면, 그 겔에서 확산된 항체와 반응하여 침강선이 형성된다. 이러한 침강선의 형태와 강도를 통해 혈청 중 항원의 성질, 즉 단일 항원인지 복수 항원인지, 항원의 전기영동 이동도, 항원들 간의 교차반응성 등을 분석할 수 있다. 또한 항체를 영동시킨 후 항원과 반응시키면 항체의 성질, 즉 항체 클래스나 서브클래스 등을 조사할 수 있다. 따라서 면역전기영동은 혈청의 항원 혼합물이나 혈청 단백질 조사에 유용하게 사용된다.
1.1.3. 실험 방법
혈청 한 방울을 한 천 겔로 코팅된 슬라이드의 중앙에 만들어 놓은 홈에 넣는다"이다. 다음으로 이 혈청을 전기영동하면 다양한 구성물들이 전기장에서 각각의 이동성에 따라 분리된다. 전기영동 후 슬라이드의 한쪽에 길게 홈을 만든 후 사람 혈청 단백질도 마찬가지로 확산된다. 각각의 항원과 항체와 비율이 적절한 곳에서 항원과 이에 대한 항체가 침강선을 형성한다. 혈청에서 얻어지는 침강선의 형태 및 강도와 환자의 혈청에서 얻어지는 침강선을 비교한다"이다.
1.2. 방사면역 측정법(RIA)
1.2.1. 방사면역 측정법 정의 및 목적
방사면역 측정법(RIA)은 방사성 동위원소로 표지된 분자를 이용하여 극히 적은 양의 항원, 항체 또는 항원-항체 복합체의 측정을 가능케 한다. 분자의 농도는 방사능의 측정에 의하여 결정 할 수 있으며 초저농도로 존재하는 다른 물질의 분석 등 대단히 응용범위가 넓고 민감도가 높아 좋다. 이러한 특징 때문에 항원이나 항체를 정량하기 좋은 방법이다. 또한 갑상선 호르몬 검사, 종양표지자 검사, 간염검사를 비롯해 각종 호르몬 검사에 이용되며 진료 진단 시 중요한 역할을 한다.
1.2.2. 방사면역 측정법의 원리
방사면역 측정법(RIA)의 원리는 방사성 동위원소로 표지된 분자를 이용하여 극히 적은 양의 항원, 항체 또는 항원-항체 복합체의 측정을 가능하게 한다는 것이다. 분자의 농도는 방사능의 측정에 의하여 결정할 수 있으며, 초저농도로 존재하는 다른 물질의 분석에도 사용될 수 있어 민감도가 매우 높다.
방사면역 측정법의 원리는 다음과 같다. 항원을 항체와 방사성물질로 표시된 항원을 시료에 넣은 후, 항원만 존재하는 분획과 항원과 항체가 결합되어 있는 분획을 분리해 내어 각각의 방사능을 측정한다. 시료 내 항원의 양은 항원만 존재하는 분획의 방사능과 비례한다. 이를 통해 시료 내 항원의 양을 계산해낼 수 있다.
방사면역 측정법 실시 시 가장 중요한 과정은 유리 항원을 항체-결합 항원으로부터 분리하는 것이다. 대표적인 방법으로는 항-면역글로불린을 이용하는 방법이 있다.
또한, 방사면역 측정법은 표지되지 않은 항원과 표지된 항원 간의 항체를 위한 경쟁 반응에 기초하여 이루어진다.
결과적으로, 방사면역 측정법은 방사성 동위원소를 이용하여 극소량의 항원, 항체 또는 항원-항체 복합체를 정량적으로 측정할 수 있는 기법이다.
1.3. 고정상 면역측정법
1.3.1. 고정상 면역측정법 정의 및 목적
고정상 면역측정법은 폴리비닐 또는 폴리스티렌 같은 다양한 플라스틱의 표면에 단백질 단일 분자층을 흡착하는 특징을 이용하여 특정 항원 또는 항체와 결합하는 항체 또는 항원을 검출하는 것이다. 이는 자동화가 되어있고 임상의학에서 널리 이용되는데, 대표적인 예로 HIV 항체의 검출에 이용된다. 고정상 면역측정법의 원리는 검출하고자 하는 것이 항원인 경우 특정 항체를 이용하는데 이때 사용하는 특정 항체에는 효소가 붙어 있다. 항원과 특정 항체를 결합시키고 나서 기질을 첨가하게 되면 특정 항체에 붙은 효소와 기질이 반응하여 색을 띠게 되고 이를 spectrophotometer를 이용해 농도를 측정할 수 있다. 다수의 단백질이 플라스틱에 부착하여 단일분자 층을 이루는 특징을 이용하는 검사법이다."
1.3.2. 고정상 면역측정법의 원리
고정상 면역측정법의 원리는 다양한 플라스틱의 표면에 단백질 단일 분자층을 흡착하는 특징을 이용하여 특정 항원 또는 항체를 검출하는 방법이다. 이 방법은 자동화가 되어 있어 임상의학에서 널리 이용되고 있으며, 대표적인 예로 HIV 항체의 검출에 이용된다.
구체적으로, 검출하고자 하는 항원인 경우 특정 항체를 이용하는데 이때 사용하는 특정 항체에는 효소가 붙어 있다. 항원과 특정 항체를 결합시킨 후 기질을 첨가하게 되면 특정 항체에 붙은 효소와 기질이 반응하여 색을 띠게 되며, 이 색깔의 진하기를 spectrophotometer를 이용해 농도를 측정하면 된다. 다수의 단백질이 플라스틱에 부착하여 단일 분자층을 이루는 특징을 이용하는 검사법이다.
또한, 효소면역측정법(ELISA)는 항체-항원-항체의 형태이기 때문에 샌드위치법이라고도 불리운다. 항체가 빵이고 항원을 햄이라고 생각하면 쉽게 이해할 수 있다. 항체가 코팅된 플레이트에 단백질을 넣고, 2차 항체를 넣는데 이 2차 항체에는 효소가 있어 기질을 넣어주면 색깔이 변하게 되는 것이다.
종합하면, 고정상 면역측정법은 단백질이 플라스틱 표면에 부착되어 있는 특성을 이용한 검사 방법으로, 특히 효소면역측정법(ELISA)는 항체-항원-항체의 구조로 이루어져 있어 샌드위치법으로도 불린다는 것이 핵심 원리라고 할 수 있다.
1.3.3. 효소면역측정법(ELISA)
효소면역측정법(ELISA)은 항원과 항체의 특이적인 결합 반응과 효소를 이용한 발색 반응을 통해 물질을 정성적, 정량적으로 분석하는 방법이다. 다수의 단백질이 플라스틱 표면에 부착되어 단일분자층을 이루는 특징을 이용한다.
효소면역측정법에서는 검출하고자 하는 항원을 플라스틱의 홈에 적용시킨 뒤 항체를 가하고 세척한다. 항원에 결합된 항체는 방사능으로 표지되거나 결합된 항 면역글로불린 항체에 의해 측정된다. 또한 항체에 효소를 결합시켜 항원-항체 반응 후 효소의 기질을 첨가하면 발색되는 정도를 측정할 수 있다. 이러한 방법을 흔히 샌드위치 ELISA라고 한다.
샌드위치 ELISA는 플라스틱 웰에 항체를 코팅하고, 여기에 단백질 시료를 넣는다. 그 후 다른 부위에 결합하는 2차 항체를 넣는데, 이 2차 항체에는 효소가 결합되어 있다. 효소의 기질을 넣어주면 발색되는 정도를 측정함으로써 시료 내 단백질의 양을 정량할 수 있다.
효소면역측정법의 장점은 고감도, 경제성, 신속성, 자동화가 가능하다는 것이다. 특히 항원-항체 반응과 효소 반응을 이용하므로 극소량의 시료로도 분석이 가능하다. 또한 반복 측정이 용이하고 다량의 ...
참고 자료
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