Techniques in Microscopy and Cell biology

소개

Abstract
이번 실험에서는 세포의 구조적 연구를 위해 필수적인 광학현미경 중 Compound Microscope의 원리와 사용법에 대하여 알아보고 chlamydomonas를 관찰함으로 광학현미경에 대해서 알아보았다. 400X에서 관찰한 결과 chlamydomonas의 크기는 10㎛~15㎛로 다양했으며, 공 모양 또는 계란모양을 하고 있었다. 또한 관찰된 flagella의 길이는 약 12.5㎛였다.
Introduction
현미경
1960년대까지 광학 및 전자현미경 기술은 세포연구에 사용되는 주된 연구 방법이었으며, 현재에도 각종현미경은 분자세포 생물학 연구에 여전히 많이 이용되고 있다. 현미경에는 광학현미경과 전자현미경이 있으며 이번 시험에 사용된 광학현미경에는 Brightfield Light Microscope, Darkfield Microscope, Phase Contrast Light Micoroscope, Dolarizing Light Microscope, Fluorescence Microscope가 있다. 이번 실험에는 Compound Microscope를 사용하였다.
현미경에서 눈과 물체 사이에 있는 확대렌즈의 기능은 현미경시야 내에서 눈에 대한 물체의 각도를 크게 증가시키는 것이다. 그러나 이 확대(magnification)요소 외에도 대비(contrast)와 해상능(resolution) 또한 매우 중요하다. 빛이 직접 세포를 투과하고, 세포의 다른 부분을 구별할 수 있는

목차

Techniques in Microscopy and Cell biology
Abstract
Introduction
-현미경
-Compound Microscope의 원리
-Chlamydomonas
Materials and Method
DATA and Result
Discussion
Reference

본문내용

Discussion
이번 실험은 세포구조의 필수적인 현미경 중 광학 현미경의 원리와 종류를 이해하고 spherical aberration과 chromatic aberration이 교정된 compound microscope을 사용하여 chlamydomonas를 관찰하고 flagella의 길이를 구해 현미경의 사용법에 대하여 숙지하였다. 현미경을 사용해 초점을 맞출 때에는 저배율에서 맞추기 시작하여 고배율로 확대율을 증가시켜야 한다. 맨 처음 objective를 5X로 맞추어 50배에서 초점을 맞추는데 저배율에서부터 정확한 초점을 맞춰야 고배율에서도 선명한 상을 관찰할 수 있다. 그 후 nosepiece를 돌려 objective를 10으로 맞추어 100배에서 slide를 관찰하였는데, 이 과정에서는 렌즈의 길이가 길어졌으므로 slide가 깨지지 않도록 fine focusing drive만을 사용하여 초점을 맞추어야 한다. luminous field diaphragm을 돌려 육각형이 나타나게 한 후 condenser로 조절하여 육각형의 edge가 선명해지도록 만드는데 이것은 chromatic aberration을 보정하기 위함이며 대체로 육각형 주변의 색이 보라색일 경우 edge가 선명해진다. 그 후 centering screw와 aperture diaphragm을 이용하여 빛이 정 중앙으로 그리고 적당한 빛의 양이 들어오도록 조절하여 더 선명한 상을 볼 수 있도록 한다. 100배율로 관찰 시에는 이것들의 정확한 조정이 엇어도 초점이 어느 정도까지는 잘 맞아 선명한 상을 관찰할 수 있었지만 400배율에서는 정확한 조절을 통해서만 선명한 상을 볼 수 있었다. nosepiece를 돌려

참고자료

· Stanier, 최신미생물학, 1993 by 아카데미서적 pp51~53
· 박상대, 분자세포생물학, 1998 by 아카데미서적 pp38~50