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[생화학]DNA & RNA의 추출 및 정량

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최초 등록일
2007.03.22
최종 저작일
2007.03
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소개글

DNA와 RNA에 대해 각각의 추출방법과 정량, 실험방법까지 상세하게 정리되어있는 리포트입니다. 리포트 작성에 도움이 되셨으면 좋겠습니다.

목차

<DNA 추출 및 정량>
1. DNA의 정의, 종류, 역할, 특징
2. DNA의 추출
3. 게놈 DNA의 분리 - 실험과정
1) 세균으로부터 염색체 DNA 분리
2) 동물 세포로부터 염색체 DNA 분리
4. DNA 정량

<RNA 추출 및 정량>
1. RNA란?
2. RNA의 종류, 역할, 특징
3. RNA 추출
4. total RNA 및 mRNA 분리
1) AGPC법
2) Poly(A)+ RNA의 정제
5. RNA 정량

본문내용

<DNA 추출 및 정량>
1. DNA의 정의, 종류, 역할, 특징
DNA는 뉴클레오티드를 기본 단위로 하는 선상분자로 유전자의 본체이다. DNA는 상보적 가닥으로 이루어진 이중나선 구조를 취하고, 딸 DNA 합성(복제)과 RNA 합성(전사)의 주형이 된다. 이러한 DNA의 역동성은 2가닥을 결합시켜주는 느슨한 수소결합에 의해 가능하다.
DNA(deoxyribonucleic acid)는 당, 인산, 염기의 3성분으로 이루어져 있고, DNA에 포함되어 있는 염기는 퓨린(purine) 환을 가진 아데닌과 구아닌, 피리미딘(pyrimidine) 환을 가진 시토신과 티민으로 구분한다. DNA는 데옥시아데닐산, -구아닐산, -시티딜산, -티미딜산을 단위로 서로 결합하여 당과 인산기가 교대로 연결된 중합체(polymer), 즉 폴리뉴클레오티드 가닥의 형태를 취하고 있다.

2. DNA의 추출
DNA는 핵에 국한되어 존재하고 있기 때문에, 우선 핵을 조직 또는 세포로부터 분리해낸다. 이로써 DNase를 포함하고 있는 리소좀을 제거할 수 있지만, 아직 핵 안에는 DNase가 들어 있다. 그래서 DNase가 기능을 발휘하는 데 필수적인 Mg2+를 제거하기 위해 EDTA를 함유하고 있는 용액으로 핵을 부수고, 계면활성제인 SDS를 사용해 DNA에 결합해있는 단백질을 해리시킨다. 그 위에 다시 단백질을 proteinase K로 분해한다. 여기서 proteinase K를 선택한 이유는 같은 단백질 분해효소라도 트립신, 키모트립신 등은 췌장에서 추출하기 때문에 DNase가 섞여 있으며, 또 proteinase K는 SDS가 존재해도 활성이 떨어지지 않으며, 금속이온이 활성에 필요하지 않기 때문이다. 분해된 단백질은 강한 산화력을 가진 단백질 변성제 페놀과 혼합해서 잘 흔들어 변형시킨다.

참고 자료

최신생화학, 김을상, 신광문화사
http://100.naver.com/100.php

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