[생화학실험]단백질 분석

소개

생화학실험 단백질분석 예비및 결과레포트입니다.
많은 도움 되시길 바람니다.

목차

1.실험목적
2.실험기구및 시약
3.실험원리
1)전기영동목적
2)SDS-PAGE
3)coomassie blue staining
4)silver staining
4.실험순서
5.실험결과

본문내용

1. 실험의 목적
1) 단백질의 전기영동 분석실습
2) SDS-PAGE용 gel 제조 실습.
3) Coomassie와 Silver Staining에 의한 검출법 실습
3. 실험 원리
전기영동
단백질의 순도나 성질의 분석 및 분리 등에 사용하는 방법 -> 단백질의 정성적인분석
SDS-PAGE ( Sodium Dodecyl Sulphate Polyacrylamide Gel Electrophoresis )
: SDS와 Polyacrylamide 를 사용한 전기영동
SDS-PAGE
Sodium dodecyl sulfate-polyacryamide gel electrophoresis (SDS-PAGE)는 단백질을 정제하는 동안 이를 monitor하고, 정제된 단백질의 동질성(homogeneity)을 알기 위한 가장 좋은 방법이다. SDS-PAGE는 일반적으로 단위체의 분자량을 결정하고, 정제된 단백질의 단위체 구성을 알기 위해 사용된다. SDS-PAGE는 더 깊은 연구를 위한 충분한 단백질을 얻기 위해 scale up될 수 있다. 또한, SDS-PAGE와 Isoelectric focusing을 결합시킨 2차원 분석법은 해상도(resolution)가 아주 좋은 방법으로서 하나의 gel에서 수천 개의 polypeptide를 분리할 수 있다.그리고 Blotting method와 결합해서 사용하면 단백질들의 homology를 분석할 수 있다. 이처럼 SDS-PAGE는 단백질 분석에 이용할 수 있는 강력한 수단을 제공한다.
일반적으로, 전기영동에 의한 분리는 분자의 크기, 모양, 전체 전하의 상대적인 양(net charges)에 기초한다.System은 전기영동 이동도(electrophoretic mobility)에 대한 크기, 모양, 전하의 효과를 구별할 수 없는 원래 형태(native configurations)에서 단백질을 분리하기 위해 구성된다.SDS-PAGE(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis)은 유용한 전기영동법의 한 가지이다. 이 방법은 특히 단백질이 단위체인지 아닌면 중합체인지를 결정할 때와, 소중합체를 구성하는 소단위체들의 수와 크기를 결정할 때 유용하게 사용한다.
coomassie blue staining
폴리아크릴아마이드 젤에서 단백질을 시각화 하기 위해 많은 종류의 유기 염료가 사용되고 있지만 저렴한 가격, 편리한 사용 방법, mass spectrometry와의 좋은 호환성 때문에 Coomassie Blue dye (R and G types)가 가장 널리 사용되고 있다.

참고자료

· 없음