서강대학교 현대생물학실험3 성장곡선, Diauxic growth, lac operon

소개

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목차

1. Abstract
2. Introduction
3. Materials and Methods
4. Results
5. Discussion
6. References

본문내용

Abstract
일반적인 세균들은 배지에서 성장을 할 때, 기하급수적으로 증가했다가 환경의 변화 및 세균의 개체수 증가에 따른 개체 수 유지 및 사멸 단계에 이른다. 이번 실험에서는 세균들의 성장을 각각 다른 당이 가해진 조건에서 관찰함으로써 그 양상을 확인해보았다. Minimal medium인 AB broth에 glucose, lactose, glucose + lactose, 넣지 않음 4가지로 구분하여 대장균 E. coli에 접종하였으며, 30분마다 그 균의 성장양상을 분석하기위해 O.D600측정 및 ONPG를 넣어 반응시킨 후 원심 분리를 하고 O.D420 측정을 하였고, Miller unit값을 계산하였다. Lactose 분해 효소인 B-Galactosidase의 발현으로 세균들의 활성을 판단하였다. 또한 보통의 균들은 사용하기 쉬운 에너지원부터 사용하고 다른 에너지원을 사용한다. 따라서 두 가지의 당이 가해진 sample에서는 ONPG를 통한 색 변화와 흡광도 측정으로 Diauxic growth를 확인할 수 있다.
그래프의 양상을 통해 각 Flask에 어떠한 당이 가해졌는지 확인할 수 있었으며, D조의 Flask에서는 O.D¬¬600값을 통해 Diauxic growth curve가 살짝 나타난 것을 확인할 수 있었다. 또한 C조의 O.D600¬ 그래프를 통해 일반적인 Bacterial growth curve가 나타났다. 그 이후의 Phase는 실험시간 상 알 수 없었다.전체적인 실험이 수월하였지만 C조와 D조의 Flask의 4.5시간 부분에서 큰 오차가 나타남으로써 오차원인 분석을 해보았다.

Introduction
대장균을 포함한 세균들은 일반적으로 이분법으로 증식한다. 따라서 이론적으로는 원래의 세포에서 2n의 배수로 증가한다. 하지만 한정적인 공간에서의 세균은 각각의 환경에 따라 이 양상이 조금 다르게 나타나는데, 이를 나타낸 곡선을 Bacterial Growth curve라고 한다.

참고자료

· Illustration by Michal Komorniczak, Released in to ‘The creative Commons 3.0. Attribution-ShareAlike (CC BY-SA 3.0).
· Neil A. Campbell, Jane B. Reece, Biology, 8th edit., BenjaminCummings, 2007.
· David L. Nelson, Michael M. Cox, Lehninger’s Principles of biochemistry, W.H. Freeman, 2004, p.1085.
· "Prokaryotic gene regulation: Figure 3," by OpenStax College, Biology (CC BY 4.0).
· Paul Held Ph.D., Resource-Application note of ‘Kinetic analysis of B-Galactosidase activity using PowerwaveTM HT Microplate Spectrophotometer and Gen5TM Data analysis software, BioTek instruments, 2007.