서강대학교 현대생물학실험1 효소활성

소개글

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목차

1. Abstract
2. Introduction
3. Materials and Methods
4. Results
5. Discussion
6. References

본문내용

Abstract
이번 실험에서 효소의 활성을 온도, pH와 기질농도에 따라 알아보기 위해 각각의 조건과 효소 β-galactosidase와 ONPG기질을 사용하여 실험을 진행하였고, Michaelis-Menten 방정식과 Lineweaver-Burk 도면을 사용하여 효소활성 속도인 Vmax와 그에 따른 Km¬값을 식을 통해 도출하였다. 일반적인 효소는 여러가지 요인들에 의해 기질과의 반응에 영향을 받는데, 주된 요인은 온도, pH 혹은 기질의 농도 등이 있다. 보통 37℃, pH 7 근처에서 최대활성을 가지며, 기질의 농도는 증가할수록 일정 부분까지 그 활성이 증가한다. β-galactosidase는 Lac Z에서 발현되는 효소로 ONPG를 분해시켜 알칼리성 용액에서의 ONP로부터 나오는 노란색을 토대로 흡광도를 측정하여 그 활성을 알아볼 수 있다. Michaelis-Menten equation은 효소반응에서의 기질과의 관계를 나타낸 방정식으로 반응 속도를 나타내며, Lineweaver-Burk plot으로 보다 정확한 결과를 알아보았다. 실험결과로 37℃의 온도에서 효소가 가장 큰 활성을 보였으며, pH7.3 근처에서 가장 큰 활성을 보였다. 또한 기질의 농도가 증가함에 따라 효소포화가 일어나기 전까지 효소활성의 증가를 알 수 있었다. Na2CO3가 어떻게 효소반응을 종결시키는지 알아보고, 각 온도, pH, 기질의 농도 조건에 따른 효소반응의 변화 양상을 알아보았다.

Introduction
효소는 생물의 내부 대사를 위한 화학반응 매개 촉매로, 기질(Substrate)와 결합하여 반응을 진행한다. 기질과 결합하면 효소-기질 복합체(Enzyme-substrate complex)를 형성한다. 이는 효소의 Active site에 기질이 붙은 것이다. ES complex를 만들면 생성물(Product)를 만들기 쉬워지는데, 이것은 효소반응이 일어나기 위한 최소한의 장벽에너지인 Activation energy를 낮추는 역할을 한다.

참고 자료

Kenneth W. Raymond, General Organic and Biological Chemistry, 4th edit, New York : John wiley & Sons, 2014, p481.
Kenneth W. Raymond, General Organic and Biological Chemistry, 4th edit, New York : John wiley & Sons, 2014, p481.
David L. Nelson, Michael M. Cox, Lehninger’s Principles of biochemistry, W.H. Freeman, 2004, pp.202-203.
Campbell et al. (2016), Biology, 11th edit., New York : Pearson, p.366.