[실험레포트] Bradford protein assay 단백질 정량법

소개

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목차

Ⅰ. Introduction (서론)
I. Bradford assay
1) 원리
2) 주의점
3) 방법

Ⅱ. Materials (재료)

Ⅲ. Methods (방법)

Ⅳ. Results (결과)

본문내용

1. Bradford assay

Bradford protein assay는 단백질 정량법 중 하나로, 일반적으로 널리 쓰이는 Lowry법보다 정밀하는 방법이다. 빠르고, 일반적인 시약들에 대한 간섭 효과가 작아 많이 쓰이는 방법이다.

1) 원리
사용하는 commassie blue (쿠마시 블루) G-250 시약이 단백질에 결합하는 것을 이용한다. 쿠마시 블루 용액은 pH가 낮은 곳에서는 양이온의 형태로 470nm~650nm서 최대 흡광도를 보인다. 그러나 단백질과 결합하면 음이온의 형태로 595nm에서 최대 흡광도를 나타낸다.
즉, 단백질과 결합했을 때 파장의 변화가 생겨 스펙트럼의 이동이 나타나게 된다.

2) 주의점
A. 염색 시약은 단백질의 positive charged 된 부분에 결합하므로 arginine, lysine, histidine residue (basic amino acid)가 필요하다. 주로 arginyl residue에 가장 잘 결합한다.

참고자료

· 없음