실험보고서4 전기영동

최초 등록일
2018.11.12
최종 저작일
2017.05
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목차

Ⅰ. 실험날짜

Ⅱ. 실험제목

Ⅲ. 실험목적

Ⅳ. 원 리
1) 배경 이론

Ⅴ. 실험기구 및 시약
1) 실험기구 및 장치
2) 시약

Ⅵ. 실험과정
1) 실험방법
2) 실험계산

Ⅶ. 결 과

Ⅷ. 토의 및 결론

Ⅸ. 참고문헌

본문내용

실험목적
단백질을 분리시키는 방법 중 하나인 SDS-PAGE에 대해 학습한 후, 단백질을 SDS-PAGE를 통해 크기에 따라 분리한 후 각각의 단백질 분자량을 구한다.

<중 략>

실험기구 및 장치
a. UV spectrophotometer
흡광도를 측정하는 기구
b. balance
필요한 시약의 무게를 측정하는 기구
c. Magnetic stirrer
용액 제조시 물질을 빠르게 섞기 위해 사용하는 기구
d. Micropipette
10ml 이하의 부피를 측정하는 기구
e. 겔 전기영동 기구
단백질을 크기에 따라 분리해내는 기구
시약
a. 카제인기질 용액 30ml
b. 삼염화 초산용액 5ml
c. 30% bis/acrylamide
d. 10% APS / 10% SDS
e. separating buffer / stacking buffer
f. loading buffer / running buffer

실험과정

1) 실험방법
# SDS-PAGE를 이용한 전기영동
a. Gel 제작 기구를 준비하고, 앞, 뒤 유리판을 알코올로 잘 닦아낸다.
b. 유리판 거치대에 앞, 뒤 유리판을 겹쳐 고정시키고 유리판 고정대에 거치대를 고정시킨다.
c. 표를 참고하여 separating gel solution을 만든다. (APS는 마지막에 넣는다.)
d. 가볍게 vortexing한 후 1ml 피펫으로 공기방울이 생기지 않게 천천히 유리판사이에 넣어 앞 유리판 위에서 2cm 아래까지 채우고 증류수 1ml를 채운다.
e. Gel이 굳으면 증류수를 제거하고, 표를 참고해 stacking gel solution을 만들고 vortexing한 후 1ml 피펫으로 공기방울이 생기지 않게 천천히 separating gel 위쪽으로 채워 넣는다.
f. comb를 꽂고 Gel이 굳는 것을 기다린다.
g. 단백질 용액과 loading buffer를 1:1로 섞고 97℃에서 반응한다

참고 자료

「겔 전기영동법」, 네이버 지식백과, 접속일자 2017.12.15
http://terms.naver.com/entry.nhn?docId=430011&cid=42411&categoryId=42411
「SDS-PAGE」, 위키백과, 접속일자 2017.12.15
https://ko.wikipedia.org/wiki/%ED%8F%B4%EB%A6%AC%EC%95%84%ED%81%AC%EB%A6%B4%EC%95%84%EB%A7%88%EC%9D%B4%EB%93%9C_%EA%B2%94_%EC%A0%84%EA%B8%B0_%EC%98%81%EB%8F%99%EB%B2%95

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