미생물 배양과 DNA 분리(생물화공-예비)

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2017.10.26
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목차

1. Purpose of Experiment
2. DNA 구조를 통한 전기 영동 실험
3. 배지(Medium)
4. Antibiotic & Plasmid
5. Solution I, II, III 의 사용처
6. Cell lysis
7. 추론(예상)

본문내용

1. Purpose of Experiment
세포의 선택 및 대량 배양에 필요한 배지를 제조, 배지를 이용하여 간단한 방법을 통해 미생물을 배양해 본다. Transformation(변화, 변질)을 통해서 얻어진 DNA를 분리 및 정제하여 다음 실험에 필요한 DNA를 얻고 plasmid DNA의 분리 및 정제기술에 관한 지식을 습득한다. 그리고 DNA의 확인 수단인 전기영동 방법 중 agarose gel electrophoresis를 통해서 얻어진 DNA의 확인 및 전기영동의 원리를 이해한다.

2. DNA 구조를 통한 전기 영동 실험
(1) 전기 영동 실험.
우리가 하게되는 DNA 겔 전기영동 방법은 DNA를 크기에 따라 분리 또는 추출하는 간단한 방법이다. 50V~100V정도의 전류를 장치에 흘려 보낸다. 나중에 다시 언급하겠지만 DNA는 기본골격에 존재하는 인산기 때문에 전기 영동에 사용되는 완충용액 속에서 Negative charge띠고 있으며 따라서 두 (+), (-)전극 사이에서 (+)전극 쪽으로 움직이게 된다.
이 때 다음과 같은 Parameters는Agrose gel 전기 영동 시 DNA의 이동에 영향을 주는 요인들이다.

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