DNA 제한효소 예비레포트

최초 등록일
2016.06.20
최종 저작일
2016.06
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목차

1. 실험이름
2. 실험날짜
3. 실험 조 및 이름
4. 실험목적
5. 실험원리
6. 실험 기구 및 시약
7. 실험 방법
8. 참고문헌

본문내용

(1) 제한효소
제한효소(restriction enzyme) 또는 제한 내부핵산 가수분해 효소(restriction endonuclease) 는 이중 가닥 DNA 분자의 특정한 염기서열을 인식하여 그 부분이나 그 주변을 절단하는 것을 촉매하는 효소를 지칭한다. 대부분의 제한 효소는 각각 인식자리(recognition site) 혹은 제한 자리(restriction site)라는 특수한 염기서열을 가진 위치에서 DNA를 절단한다. 제한효소는 원래 세균이 자신의 세포 내로 침입해 들어온 바이러스와 같은 외부 DNA를 제거하기 위한 방어기전에서 발견되어 바이러스의 증식을 제한한다는 의미로 이름 지어 졌다. 이때 자신의 DNA에 있는 절단부위의 염기를 methylation시켜서 자신의 제한효소가 자신의 DNA를 자를 수 없게 보호한다.

(2) 제한효소의 종류
① 제 I형 제한효소
제 I형 효소는 3개의 서로 다른 subunit(구성단위)인 R, M, S(restriction, methylation, sequence recognition을 담당)로 구성되어 있다. 표적부위가 S subunit에 의해서 인식되면 DNA와 결합한 효소는 곧이어 절단이나 변형(modification)을 시킨다. Cleavage는 효소가 인식하는 특정한 인식 서열(recognition sequence)로부터 > 1,000 b.p 떨어진 비특이적 부위(non-specific site)에서 일어난다(두 가닥 모두 메틸화가 안 된 경우만 자름). 이 경우 Mg2+, ATP, S-adenosylmethionine이 존재할 때만 enzyme activity가 존재한다(DNA 의존적 ATP 분해효소 ; DNA dependent ATPase 역할을 함). 또한 6-methyl adenine 잔기(residue)를 만드는 부위-특이적 메틸화효소(site-specific methylase) 역할도 한다.

참고 자료

Mary K.Campbell & Shawn O. Farrell, “Biochemistry(생화학)”, 라이프사이언스,2009, p122~128
http://www.virtual-lab.or.kr/demo/Experiment_PnP.asp?gCNum=20115
http://kimwootae.com.ne.kr/apbiology/chap13.htm
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