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PCR of GBP & Electrophoresis
실험제목 : PCR of GBP & Electrophoresis
실험목적 : 저번 실험에서 얻어낸 E.coli의 Genomic DNA를 PCR을 통해 증폭시키고 전기영동을 통해 크기를 확인한다.
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한컴오피스
최초등록일 2016.06.30
최종저작일
2016.03
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소개
실험제목 : PCR of GBP & Electrophoresis
실험목적 : 저번 실험에서 얻어낸 E.coli의 Genomic DNA를 PCR을 통해 증폭시키고 전기영동을 통해 크기를 확인한다.목차
1. 실험제목
2. 실험목적
3. 실험재료
4. 실험원리 및 방법
5. 실험결과
6. 고찰본문내용
실험원리(일부분)
1) PCR
➀ denaturing (변성) : 94-98℃, 30sec
➁ annealing (primer 붙이기) : 61℃, 30sec ; primer에 따라 온도 변경
③ elongation (신장) : 72℃, 1.1kb (1분20초) ; DNA 크기를 맞추는 시기 (얼마나 증폭시킬 것인지)
고찰(일부분)
PCR 시작을 위한 총 부피는 50㎕로 정한 실험이다. 샘플의 양을 100ng에 맞춰주기 위해서 샘플의 농도에 따라 그 부피를 다르게 맞춰준다. DW의 부피 또한 총 부피에서 시료들의 부피 합을 빼준 값으로 샘플의 부피에 따라 달라져 정확히 계산해야 해야 하는 부분이 주의할 점이었다. 또한 5X Taq buffer에서 5X의 의미를 파악하고 그 양을 계산했다. 5X는 총부피에 대비해 X x 5 = 50㎕ 로 Taq buffer의 양인 x=10㎕ 가 나온다.참고자료
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