DEAE sepharose anion exchange chromatography

소개

생명과학실험 A+ 받을 수 있었던 실험 레포트입니다. 2012년도 작성이지만, 지금 생명과학 과정과 다르지 않습니다. 정성들여 쓴 만큼 도움될 겁니다.

목차

없음

본문내용

1. 실험날짜 : 2012. 03. 22
2. 주 제
Alkaline Phosphatase(AP)의 분리 과정을 이해하고 직접 ion-exchange chromatography를 통해 AP를 정제한다.
3. 목 표
Ion-exchange chromatography에 의한 단백질 정제 원리를 이해하게 하고, DEAE anion exchage column을 이용한 alkaline phophatase (AP) 단백질의 정제기법을 습득하게 한다.
4. Introduction
※ Protein Purification
생명현상을 이해하기 위하여 세포를 구성하고 있는 protein들 각각의 구조와 기능을 이해하는 것이 필수적이라 할 수 있다.
그러나 하나의 cell에는 엄청 많은 양의 protein이 있고 이들은 모두 혼재된 상태로 존재하기 때문에 이들 각각의 구조와 기능을 연구하기 위해서는 우선적으로 연구하고자 하는 protein을 정제해야만 한다.
따라서 purification을 통해 세포에 있는 protein 중 특정 기능을 하는 protein을 알아낼 수 있다.
즉, 특정 protein의 기능을 정확하게 알기 위해 purification을 한다.
protein의 size, charge, solubility, stability 등의 조건에 따라 protein purification 종류가 정해진다.
protein은 각 amino acid sequence에 따라 그 특성을 바꾸기 때문에 특정한 한 가지 기술로만 protein을 purify하기는 어렵다.
따라서 물리, 화학적인 다양한 기술과 실험이 필요하다.

※ Alkaline Phosphatase of Bovine
Alkaline Phosphatase (AP)는 가수분해효소(hydrolase enzyme)로 nucleotide, protein, alkaloid 등 다양한 분자에서 phosphate group을 떼어내는 역할을 한다.
이렇게 phosphate group을 떼어내는 과정을 dephosphorylation이라고 한다. 이름에서도 알 수 있듯이 AP는 염기성 환경에서 활성이 가장 높다.

참고자료

· 생명과학실습1 p2
· 실험 안내 print
· http://blog.naver.com/PostView.nhn?blogId=junsungje&logNo=50040435355 (2012/03/21)
· http://en.wikipedia.org/wiki/Alkaline_phosphatase
· http://www.riss.kr/search/detail/DetailView.do?control_no=c24b07ec1f342b4bffe0bdc3ef48d419&p_mat_type=1a0202e37d52c72d&p_submat_type=&fulltext_kind=&t_gubun=&convertFlag=Y&naverYN=&colName=re_a_kor&DDODFlag=&loginFlag=#redirect(RISS, 2012/03/21)
· http://en.wikipedia.org/wiki/Osmotic_shock (WIKIPEDIA-osmotic shock, 2012/03/21)
· http://100.naver.com/100.nhn?docid=120410 (네이버백과사전-원심분리기,2012/03/21)
· http://100.naver.com/100.nhn?docid=156152 (네이버백과사전-투석, 2012/03/21)
· http://en.wikipedia.org/wiki/Heat_shock (WIKIPEDIA-heat shock, 2012/03/21)
· http://terms.naver.com/item.nhn?dirId=1108&docid=49176
· http://blog.naver.com/selrim11?Redirect=Log&logNo=50043459614 (2012/03/21)
· http://biocadmin.otago.ac.nz/fmi/xsl/bioc2/learnbitslecture.xsl?-db=BIOC2web.fp7&-lay=Lectures&-recid=5450&-find= (2012/03/22)