Column Chromatography 실험보고서

목차

1. 주제
2. 실험목표
3. Introduction
4. Tools
5. Methods
6. Discussion
7. Reference

본문내용

주제
단백질 분리정제 및 기능 분석

실험목표
Column Chromatography 를 이용하여 Alkaline Phosphatase를 분리한다.

Introduction
Column chromatography 란 단백질의 전하와 크기, 등의 특성을 이용하여 최종 단백질을 정제 또는 분리하는 것을 말한다. Column chromatography 에는, Stationary phase (정체상) 과 Moving phase (이동상) 으로 이루어져 있고 이것을 partition theory 라고 한다. Ion exchange chromatography 의 경우 정체상은 bead 이고 이동상은 단백질 이며, 전하를 이용하여 최종 단백질을 분리한다. Ion exchanger 는 전하를 띄는 Functional group 과 불용성인 bead (resin)으로 이루어져 있다. 대표적인 anion exchanger 인 DEAE (diethyl amino ethyl) -Sepharose 의 경우 Functional group 인 sepharose가 (+) 전하를 띄고있어 pI 보다 낮은 pH 에서의 (-) 전하를 띈 단백질 (eg., AP) 과 친화성이 강하다. 반대로 CM (Carboxymethyl anion) 은 (+) 전하를 띈 단백질과 결합한다.

참고 자료

http://biotechniquesden.blogspot.kr/2012/12/ion-exchange-chromatography.html, 03/23/2016