생물과학실험 핵산생화학 레포트

목차

1. Introduction

2. Results

3. Discussion

4. Assignment
1) Knockdown 실험이나 knockout system 이외에, Drosha가 miRNA의 biogenesis를 담당하는 enzyme이라는 것을 직접적으로 보여줄 수 있는 다른 실험은 무엇이 있을까?
2) Knockout과 knockdown의 장단점은?
3) CRISPR-Cas9 system과 TALEN system

5. References

본문내용

small RNA는 직접적으로 유전자 발현 과정에 관여하고 세포의 기능을 전체적으로 조정하는 역할을 하는데 그 종류로는 miRNA와 siRNA등이 있다. 그 중 miRNA(miRNA)는 21개에서 25개 정도의 nucleotide로 구성된 단일 염기가닥의 RNA를 말한다. miRNA는 발생시기와 cell proliferation, cell death, 그리고 신경세포로의 분화를 조절하는 등 진핵생물의 유전자 발현을 제어하는 역할을 한다. 핵 내에서 DNA는 PolⅡ의 도움으로 pri-miRNA(primary micro RNA)라는 긴 RNA로 전사된다. 이 pri-miRNA는 mRNA와 매우 유사한 구조를 갖고 있으며, 전두부에 cap구조를, 그리고 후미부에 Adenine을 다량으로 포함한 poly-A 구조를 갖고 있다. 이렇게 전사된 pri-miRNA는 그 후 RNaseⅢ type 단백질인 Drosha라는 효소와 DGCR8이라는 물질의 상호작용ㅡDGCR8이 RNA를 고정하면 Drosha가 그 RNA를 자른다ㅡ에 의하여 잘리게 되어 약 70개에서 90개의 뉴클레오티드로 구성된 stem-loop pre-miRNA가 된다. 이렇게 만들어진 RNA는 exportin-5라는 운반 단백질과 결합하여 cytoplasm으로 나가게 되고 Dicer라는 효소에 의해 잘리게 된다. 이 때 만들어지는 21개에서 25개의 뉴클레오티드로 구성된 짧은 길이의 non-coding RNA조각을 microRNA(miRNA)라고 한다. 이 miRNA가 Argonaute와 같은 여러 가지 단백질과 함께 RNA-induced silencing complex(RISC)를 형성하는데, 이 복합체는 post-transcriptional regulator으로서 전사 및 전사 후 단계에서 유전자 발현을 억제하는 기능을 한다. 특히 target 유전자와 결합하여 target mRNA를 분해하거나 단백질로 번역되는 과정을 억제한다.

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