단백질정량법

목차

1. 단백질 정량법
2. 191페이지 요약

본문내용

* 단백질 정량법
2. BCA법
Bicinchoninic Acid Assay의 약자로 BCA법이라고 한다. 또 다른 말로는 Pierce방식이라고도 한다. sample에 있는 단백질 양을 측정하고자 할 때 쓰이는데, 단백질이 구리 이온을 환원 시킬 수 있는 성질을 이용한다. 단백질에 의해 환원 된 구리 이온은 BCA용액과 반응을 해서, 보라색 화합물을 생성하게 된다. 이 보라색 화합물은 빛의 특정 영역(562nm)에서 구리 이온이 담긴 용액과 BCA용액 각각보다 빛의 흡수율이 높기에, spectrophotometer를 사용해서 측정하면 흡수율 차이를 측정할 수 있다. 즉, 단백질의 양이 많으면 보다 많은 보라색 화합물이 생성되었을 것이고, 흡수율 또한 증가하였을 것이다. 이와 같은 결과에 비례해서 샘플 안에 있는 단백질 양을 측정할 수 있다.
BCA정량법의 장점은 일반적인 버퍼물질에 간섭을 덜 받고, 반응시약 또한 매우 안정적이다. Lowry assay를 사용했을 때보다 방해를 주는 물질이 없고, 높은 온도에서 반응을 일으킬 때는 아주 민감하고 빠른 반응이 얻어낼 수 있다. 하지만, 실온에서는 반응이 완전히 수행되지 못하고, 농도에 민감하여 농축된 단백질 샘플은 희석이 필요하다는 단점이 있다.

참고자료

· 없음