[생화학실험] DNA 제한효소를 이용한 vector의 절단,PCR 오차원인

소개

생화학실험, 제한효소,BamH1,pBR322 vector 절단

목차

1. 실험 날짜
2. 실험 제목 및 목적
3. 개요 – 이론 및 실험 원리
4. 실험재료 및 방법
5. 실험결과
6. 고찰
7. 참고문헌

본문내용

Vector
원하는 DNA단편을 숙주로 하는 세포에 도입하여 증식시킬 때에 이용되는 자기증식능을 가진DNA. 제한효소에 의해 절단된DNA단편은 대부분의 경우 같은 제한효소에 의해 매개자의 제한효소 절단점에 이어져 숙주세포에 운반한다.
따라서 매개자의 필요조건으로는
(1) 숙주세포에 효율적으로 도입하고, 그 안에서 자기복제가 가능할 것,(2) DNA의 단편을 연결하기 위해 몇 가지 적당한 제한효소 절단부위를 이용할 수 있어야 할 것, (3) DNA단편과 매개자의치환체가 숙주세포에 도입된 것을 나타내는 약제내성 등의 표지유전자를 가져야 한다는 것 등을 들 수 있다.
매개자로서는플라스미드나 바이러스, 파지 등의 DNA를 사용하는 경우가많기 때문에 숙주에 따라 구분하여 사용한다. 유전자클로닝에는 대장균이나 효모계를 자주 이용하고, 각 pBR322나 YRp의계열이 비슷한 많은 매개자가 개발되어 있다. 치환DNA실험에서는 이러한 매개자는 필수적이다. 매개자에는 2종류의 숙주모두에서 증식할 수 있는 것도 있고, 대장균-효모처럼 원핵생물과 진핵생물 사이의 것 등도 작성하고 있다. 식물세포를 숙주로 하는 경우의 매개자로는 Ti 플라스미드, Ri 플라스미드나꽃양배추모자이크바이러스를 비롯한 식물 바이러스, 우로이드, 가동성 유전인자, 식물기원의 DNA 등을 고려할 수 있는데, 특히 Ti 플라스미드, 꽃양배추모자이크바이러스 등을 많이사용하고 있다.

참고자료

· http://terms.naver.com/entry.nhn?docId=435966&cid=577&categoryId=577
· http://www.nanohelix.co.kr/shop/goods/goods_list.php?&category=001001
· http://terms.naver.com/entry.nhn?docId=520025&cid=577&categoryId=577
· 레닌저 생화학,David L.nelson,월드사이언스, 306~307pg