생명과학실험-Buffer만들기

소개

생명과학실험1 레폿 A+ 받은 자료입니다~

목차

Ⅰ.실험 제목

Ⅱ.실험 목적

Ⅲ.원리
(1) Buffer(완충용액)란?
(2) Buffer를 선택할 때에 고려해야할 중요한 특성 8가지
(3) pH 미터의 원리와 사용법
(4) pH 미터 사용 시 주의할 점
(5) 몰농도(molarity. )
(6) 노르말농도
(7) 묽힘(dilution)

Ⅳ.실험재료

Ⅴ.실험방법

Ⅵ.결과

Ⅶ.토론
(1)오차분석
(2)Alkaline phosphatase Type I-S 란?
(3)DEAE-sepharose 란?

Ⅷ.참고문헌

본문내용

Ⅰ.실험 제목
Buffer 만들기 (1 Tris - HCl ? 7.4)

Ⅱ.실험 목적
단백질 정제에 필요한 buffer를 만들고 buffer의 원리를 이해한다.

Ⅲ.원리
(1) Buffer(완충용액)란?
산과 그것의 짝염기(conjugate base)로 구성된 용액으로 산(acid)이나 염기(base)가 가해지더라도 pH가 크게 변화하지 않도록 해준다. 유지하고자 하는 pH에 가까운 pKa 값을 갖는 buffer 중에서 정제하고자 하는 단백질과 interaction 하지 않는 것을 선택한다. nonspecific ionic strength effect를 피하기 위하여 낮은 농도에서 실험을 하는 것이 좋은데, 50 mM 정도가 좋은 starting point라고 볼 수 있다.
(2) Buffer를 선택할 때에 고려해야할 중요한 특성 8가지
① pKa value
② pKa variation with temperature
③ pKa variation upon dilution
④ Solubility
⑤ Interaction with other components (such as metal ions and enzymes)
⑥ Expense
⑦ UV absorbance : 단백질과의 overlap
⑧ Permeability through biological membranes
(3) pH 미터의 원리와 사용법
pH 미터는 용액 속에 담근 지시 전극(indicator electrode)과 기준 전극(reference electrode) 사이의 전위차를 측정하여 pH를 결정하는 방법이다. 지시 전극은 용액의 pH변화, 즉 수소 이온 농도에 따라 전위가 변하는 유리 전극이 많이 이용된다. 유리 전극은 수소 이온에만 선택적으로 감응할 수 있도록 특수하게 제작된 얇은 유리막(glass membrane)을 사용한다. pH 미터는 지시 전극과 기준 전극을 연결하여 전지(cell)를 만들고 두 전극 사이의 기전력을 측정하여 pH 값으로 나타낸다. pH 미터를 사용할 때에는 수소 이온 농도를 정확히 알고 있는 표준 용액을 이용하여 측정한 다음, 값을 비교하여 보정(calibration)하면 보다 정확한 pH 값을 측정할 수 있다.

참고자료

· 한국교원대학교 과학교육연구소(20,『화학실험』, (주)금성출판사, pp.45
· Steven S. Zumdahl, Susan A. Zumdahl(20, 『Chemistry, 8th Edition』, 사이 플러스, pp.153,158,160,500
· 김영순, 심국석, 김대수, 김봉래(200, 『화학Ⅱ』, (주)도서출판 디딤돌, pp.76
· 네이버 지식백과, 2013,03,17, http://terms.naver.com/entry.nhn cid=359docId= 295217mobilecategoryId=359.htm
· 위키백과, 2013.03.17, http://ko.wikipedia.org/wiki//EB/8B/A4/EC/9D/B4/ EC/97/90/ED/8B/B8/EC/95/84/EB/AF/B8/EB/85/B8/EC/97/90/ ED/8B/B8/EC/85/80/EB/A3/B0/EB/A1/9C/EC/8A/A4.htm