[생물]Protein Over-expression(단백질 과발현)

*지*
최초 등록일
2006.06.02
최종 저작일
2006.05
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소개글

Title은 Protein Over-expression (단백질 과발현)이고, 과제 첨부되어 있습니다.
특정 단백질을 재조합된 유전자를 이용하여 대장균을 형질 전환시키고, 대장균을 이용하여 유전자의 산물인 단백질을 과발현시키고, 확인함으로써 유전공학의 기초적인 방법을 이해한다.

목차

title Protein Over-expression
method
result
discussion
reference

과제
-lac operon(락 오페론)외에 다른 오페론 조사해 오기

본문내용

1.pre-made gel을 전기영동장치에 넣고, buffer 넣어준다.
2.comb를 제거하고, marker-control(0)-1시간-3시간 순서로 10㎕ 씩 loading한다.
3. 125V로 2시간(1시간 30분)이상 running
4. Coomassie staining 후 Destaining
5. Gel에서 overexpression 된 protein band 확인

-우선 marker가 처음보다 맨 나중에 한 것이 흐림을 볼 수 있는데, 이 것은 마지막에 loading한 것이 그 양이 적었기 때문이다. 게다가 cont rol에서는 이런 진한 밴드를 볼 수가 없고, IPTG를 넣은 1시간, 3시간 에서 뚜렷이 밴드를 볼 수 있는데, 1시간 보다 3시간에서 더 굵게 밴드 가 생겼음을 알 수가 있다.

-우리가 실험하는 overexpression 는 바로 이런 유전자발현 조절과정을 이용하는 것이었다.
lac 오페론-하나의 promoter 뒤에 여러 개의 유전자가 존재하는 경우 이를 오페론이라고 한다. 즉, 한번의 transcription에 의해 만들어진 한 가닥의 mRNA상에 여러 개의 유전자의 copy가 존재하게 된다.

-GST는 glutathione-S-transferase의 약자로 신체의 거의 모든 세포 에 존재하고 해독

참고 자료

없음
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