PCR과 DNA 전기영동 실험 보고서

소개

DNA 전기영동에 필요한 재료와 실험 방법, 그 결과와 분석까지 모든 내용을 담고 있는 레포트.

목차

Ⅰ. Introduction
Ⅱ. Materials
Ⅲ. Procedure
Ⅳ. 배경지식
Ⅴ. Data & Results
Ⅴ. Discussion
Ⅵ. References

본문내용

Ⅰ 서론 (Instruction)
Ⅰ.1 실험 목적
polymerase chain reaction(PCR)은 원하는 DNA를 짧은 시간동안 다량으로 증폭할 수 있는 기술을 말한다. Kary Mullis가 처음 고안했던 PCR은 매우 복잡한 과정을 거쳐야 했으나 시간이 지나면서 점차 발전하여 오늘날에는 매우 간편하게 실시할 수 있는 실험이 되었으며, 분자 생물학 연구에서 빠질 수 없는 중요한 기법으로 자리 잡았다. 본 실험은 이러한 PCR을 직접 수행하고 PCR 결과물을 전기영동하여 눈으로 확인하므로서 각 단계가 가지는 의미와 연관한 생물학적인 지식을 심화시키는데 목적을 두고 있다. 또한 피펫 사용법과 같은 간단한 실험 기법들에서부터 전기영동을 수행하는 고차원적인 실험 기법까지 생물학 실험실에서 쓰이는 여러 가지 기법들에 대해 습득하고자 하였다.

Ⅰ.2 실험 배경
실험은 크게 PCR과, DNA 전기영동 두 가지로 나누어진다.

PCR은 필요한 시료들을 섞어 PCR 기계에 넣어주기만 하면 기계가 온도를 변화시키면서 반응을 일으킬 수 있는 조건들을 만들어주기 때문에 비교적 간단하다. 그러나 본 실험에서는 단순히 적정량의 시료들을 넣는 것이 아니라 dNTP, template, primer의 농도에 차이를 두거나 PCR annealing 온도에 차이를 두어 비교하는데 목적을 두고 있으므로 PCR 시료 제작 시에 적절한 농도 조절이 요구된다.

전기 영동에 필요한 agarose gel은 PCR 수행 전에 미리 만들어 굳히는 것이 좋고 gel이 굳으면 buffer 용액에 gel을 담근 채로 홈에 PCR 생성물을 pipeting하여 전압을 걸어준다. DNA가 음전하를 띄고 있어 양극으로 끌려가는데 이 때 크기에 따라 속도에 차이가 생기는 점을 이용하여 DNA를 분리한다.

참고자료

· -Campbell, Reece, Urry, Cain, Wasserman, Minorsky, Jackson 전상학 역 <<생명과학 8판>> 바이오사이언스 pp405-407