PCR 이용한 GMO 판별

소개

이번 실험은 유전자 변형 생물체, GMO를 판별하기 위해 Direct PCR을 해보는 것이었다. Direct PCR은 따로 주형이 될 DNA를 추출하지 않고 바로 소량의 sample로 원하는 부분을 PCR할 수 있는 방법이다. 이 실험에서 사용한 sample은 벼로, 각각 5가지의 서로 다르게 유전자 변형이 된 것이었다. 유전자 변형 시에는 Binary vector system을 이용해 형질전환 벼를 제조했다. 이들과 함께 유전자 변형이 되지 않은 벼와, Ti plasmid와 함께 PCR을 한 후, 전기영동을 해주어 band의 위치를 비교하여 유전자 변형이 된 벼를 알아내는 것이 이번 실험이었다.

목차

Abstract
Introduction
Method
Result
Discussion
References

본문내용

세균인 Agrobacterium의 일부 종 에서 발견되는 Ti plasmid라는 유전자는 식물에 감염되는 과정에서 식물유전자로 삽입되어 식물체에서 자신이 생존하기 위해 필요한 opine이라는 물질을 대신 생산하도록 한다. 이처럼 세균 자신의 유전자를 식물유전자로 이동시킬 수 있는 것은 Ti plasmid 유전자의 특정 염기서열이 식물유전자로 쉽게 이동할 수 있는 배열로 되어있기 때문인데, 이러한 점을 이용하여 외래유전자를 식물세포에 도입할 수 있다. 즉 Ti plasmid에서 병원성 유발 유전자를 제거한 다음 식물로 이동될 수 있도록 하는 염기서열 안쪽, 즉 전이유전자 부위에 도입하고자 하는 유전자를 끼워 넣어 식물 유전자로 이동시킬 수 있는데 이 과정을 이용한 것이 형질전환 기술이며, binary vector 시스템 등 다양한 방법들이 개발되어 있다. Binary vector system은 2가지의 서로 다른 재조합 플라스미드를 가지고있는 Agrobacterium을 사용하는 것이다. 첫 번째는 T-DNA를 실험실에서 제거한 Ti-plasmid이고 두 번째는 Agrobacterium과 벼 속으로 외부 DNA를 집어넣을 때 필요한 binary vector인 pGA1611으로, MCU가 포함되어있다. 이들 플라스미드로 조작을 한 Agrobacterium을 잎에 감염시킨다.

참고자료

· 한국생화학회, 실험 생화학, 탐구당, 1997, pp 399~401
· Geoffrey M. Cooper, The cell 세포학, 한우리, 2000, pp 108~116
· http://en.wikipedia.org/wiki/genotyping