일반생물학 실험 제한효소로 dna절단

소개

일반생물학실험 실험보고서입니다.
실험목적:시험관 내에서(in vitro) 유전자 조작을 행할 때 쓰는 가장 기본적인 도구인 제한효소와 제한효소의 제한 기작을 알아보고 플라스미드를 제한 절편들로 자른다.

목차

1)실험 목적
2)실험 원리:
3)실험 방법:

본문내용

2)실험 원리:
•DNA의 의미와 구조
DNA란, 핵산의 일종으로 유전자의 본체를 구성하는 물질이다. 핵산은 뉴클레오티드라고 하는 단위물질이 많이 연결된 고분자 유기물이다. 이 뉴클레오티드는 염기, 탄수화물의 한 가지인 펜토오스, 그리고 인산이 각 한 분자씩 결합하여 이루엊진다. 이 때 펜토오스가 디옥시리보오스이면 DNA라고 하고, 리보오스이면 RNA라고 구별하여 부른다. 따라서 DNA를 구성하는 뉴클레오티드는 염기 디옥시리보오스 인산 한 분자씩의 연결체이다. 이 가운데 염기에는 아데닌(A), 구아닌(G), 시토신(C), 티민(T)의 네 가지가 있다. 이 4종류의 뉴클레오티드가 무수히 많이 연결된 것이 DNA이므로 4종의 뉴클레오티드 배열 순서에 따라 서로 다른 DNA가 만들어진다.

•제한효소
DNA를 자르는 도구로 제한효소(restriction enzyme)라고 하는 박테리아의 효소를 사용한다. 원래 이 효소는 박테리아가 바이러스나 다른 생물로부터 침입해 들어온 DNA를 절단하여 자신을 보호하기 위해 가지고 있는 효소이다. 즉, 다른 생물로부터 온 DNA가 박테리아 내에서 살아남지 못하도록 부수는 작용을 하여 외부로부터 들어온 DNA가 세포에서 살아남지 못하도록 제한한다. 세포 자신의 DNA는 다른 효소에 의해 화학적으로 변형된 상태이기 때문에 제한효소의 영향을 받지 않는다.(자신의 DNA를 보호하고 외부 DNA가 침입해 왔을 때 방어를 위해 제한효소를 사용한다. 외부 DNA를 제한효소로 잘라서 활성을 없애는 동시에 자신의 ㅣDNA는 보호하기 위해 자신(생물체)의 DNA는 제한효소가 절단부위를 감지하지 못하게 하기 위해서 특정 염기서열이 메틸화 한다(Methylation)). 수백여 종의 제한효소가 밝혀졌으며 분리되었다. 각각의 제한효소는 매우 특정적이어서 DNA 분자에 있는 대개 4~8개의 짧은 염기서열을 인식한다.

참고자료

· 닐 켐벨, 생명 과학 5판, 바이오 사이언스, 2007
· purves, 생명 생물의 과학 7판, 교보문고 , 2007