단백질 정량

소개

생물 실험 리포트입니다.

목차

Ⅰ. 실험목적
Ⅱ. 원리
Ⅲ. 실험기구 및 재료
Ⅳ. 실험절차
Ⅴ. 실험결과
Ⅵ. 고찰

본문내용

. 실험목적

단백질 정량의 원리를 이해하고, 우유 속 단백질을 정량해 본다.

Ⅱ. 원리

▶ UV법
단백질에 있는 티로신, 페닐알라닌 및 트립토판 잔기들은 각각 275㎚와 280㎚의 자외선을 흡수한다. 많은 단백질들에 있어서 이 아미노산들을 합친 수준은 거의 일정하므로 단밸질의 농도는 280㎚에서의 흡광도와 비례하게 된다. 단백질의 흡광도는 주로 Aromatic compound residue에 기인하는 점에 주목해야 하며 참고로 펩타이드 결합의 경우는 200㎚에서 빛을 흡수한다. 흡광계수(ε: 빛이 시료 1㎝을 통과할 때의 흡광도)는 단백질 시료에 따라 다르다. 대부분의 단백질은 ε값이 1㎎/㎖시료에 대하여 0.4~1.5정도이며 Aromatic compound residue의 조성이 높은 Lysozyme은 2.65, Tyrosine과 Tryptophane이 거의 없는 paralbumin은 0.0의 값을 갖는다. 원하는 단백질의 흡광계수값을 알면 시료의 농도를 측정할 수 있다.
* Lambert-bee`s law
단색광이 균일한 물질 속을 통과할 때, 투사하는 빛의 강도를 Io, 투과광의 강도를 I, 농도를 c, 물질층의 두께를 b, 비례상수(흡광계수)를 ε라고 하면, 흡광도 A는 다음 식에 의하여 표시된다.
A = logI0/I = εbc
(A=absorbance, b=cell length, c=Concentration of the compound in solution,
ε= 흡광계수)
즉, 흡광도는 물질층의 두께와 농도의 곱에 비례한다.

참고자료

· 없음