돼지 형질전환 체세포에서 pWAP promoter 영역에서의 DNA 메틸화 비교 (DNA methylation change of pWAP promoter region in porcine transgenic somatic cells)

서지정보

· 발행기관 : 한국산학기술학회
· 수록지 정보 : 한국산학기술학회논문지 / 22권 / 12호 / 317 ~ 323페이지
· 저자명 : 박미령, 이해선, 오건봉

초록

DNA methylation는 포유동물에 있어 세포 기능 및 유전자의 안정화 조절로 생명을 유지하는 역할을 한다. 본 연구에서는 돼지 귀조직 유래 섬유아 세포에 돼지 유청 단백질과 사람 조직 플라스미노겐 벡터를 도입하여 메틸레이션 영역에 따른 변화를 비교 분석하였다. pWAP promoter 내 메틸레이션 패턴을 분석하기 위하여 동일한 passage 단계에 있는 세포를 배양하여 채취하였으며, bisulfite sequencing 방법으로 분석을 진행하였다. 그 결과 pWAP promoter 내 upstream 영역 두 부분에서 CpG islands가 있음을 확인하였다. pWAP promoter를 도입한 세포의 경우 5 region의 유전자 도입 그룹에서 유의적으로 메틸이션 패턴이 높게 나타남을 확인하였다. 또한, htPA 벡터를 도입한 세포의 경우 htPA1_4 그룹에서 유의적으로 높은 메틸레이션이 확인되었다. 메틸레이션 양상은 CpC islands 영역과 구축된 세포주에 따라 각기 다르게 나타남을 확인하였다. 이러한 결과는 프로모터 선별 및 세포주 구축이 형질전환 동물을 생산하는 데 있어 중요하게 작용할 수 있을 것으로 여겨지며, 유전자의 기능에 대한 연구에도 기초 자료로 활용 될 수 있을 것으로 사료된다.

영어초록

DNA methylation is vital in maintaining genomic stability and modulating cellular functions in mammalian cells. This study was performed to identify the differentially methylated region (DMR) in porcine whey acid protein (pWAP) and the human tissue plasminogen activator (htPA) vector of porcine ear fibroblast cells. To investigate the methylation patterns of the WAP promoter, cells were collected from the same passage and analyzed by the bisulfite sequencing method. Results showed that two cytosine-guanine dinucleotide (CpG) islands are present in the promoter region of pWAP. The methylation level of the CpG island 5 region was significantly higher in the pWAP transfected somatic cells than in the wild type (WT) somatic cells. In the htPA, transgenic cells were significantly higher in htPA1_4 cells than the other htPA transfected cells. The changing methylation pattern was observed in the promoter regions and established transgenic cell lines. Our data indicate that promoter selection and cell line construction can play an important role in the production of transgenic animals. Thus, these results can be used as basic data for research on the function of genes.

참고자료

· 없음