형질 전환 기법을 이용한 인체 간암의 마우스 모델 제작 및 특성 규명

서지정보

· 발행기관 : 한국동물번식학회
· 수록지 정보 : Reproductive & developmental biology / 31권 / 3호
· 저자명 : 이종숙, 이정웅, 현병화, 이철호, 정규식, 방남수, 염영일

목차

ABSTRACT 요약 서론 재료 및 방법 실험동물 항체 SV40 Tag 유전자 함유 재조합 DNA 제작 과배란 유도 및 수정란 채취 형질 전환 마우스의 생산 및 판별 형질 전환 마우스 가계 확립을 위한 실험 설계 삽입된 외래유전자 Copy 수와 배열형태 확인 Total Protein의 추출 Western Blot 분석 조직병리학적 분석 결과 형질 전환 마우스의 생산과 계통 확립 형질 전환 마우스의 외적 표현형질 변화 양상 형질 전환 마우스 간조직의 주령별 변화양상 형질 전환 마우스 간조직의 주령별 병리학적 소견 고찰 간암모델 동물에서 SV40 유전자의 삽입 형태와 발현 간암 발생의 다단계성 인용문헌

초록

본 연구에서는 SV40 Tag을 마우스 albumin 유전자의 promoter/enhancer 조절 하에 발현하도록 설계된 재조합 유전자를 마우스 1세포기 수정란에 미세 주입하여 형질 전환 마우스를 제작하고 이들의 인체 간암 모델로써의 적합성을 조사하였다. 형질 전환이 확인된 총 11개체의 founder 생쥐들 중 4개체가 간암을 일으켰고, 두 개체는 신장암을, 한 개체는 피부 및 뇌에서 종양을 각각 일으켰다. 이들로부터 외래 유전자를 계대 유전하는 3가계를 얻었다(#1-2, #1-6, #1-11). 이들 가계의 자손들에서 8주령(#1-2, #1-6) 혹은 10주령(#1-11) 시부터 간암이 반복적으로 발생되었으며, #1-11 founder 개체에서 폐로 암세포가 전이된 것 외에는 다른 조직에서의 형태학적 변이가 발견되지 않았다. 간암 발생은 조직학적 변화에 따라 3단계로 나눌 수 있었다. 즉, 출생에서 3주령까지는 간세포의 과량증식을 보이나 세포핵의 이상은 관찰되지 않았으며, 4주령부터 7주령(#1-2, #1-6) 혹은 9주령(#1-11)까지는 diffuse liver cell dysplasia를 나타내지만 tumor nodule은 발견되지 않았고, 그 이후에는 liver dysplasia를 배경으로 간암이 발생하였다. 본 연구에서 작출한 간암 모델 마우스는 인체 간암과 일부 유사한 소견을 보였는 바 인체 간암 기전 연구를 위한 유용한 동물 모델로 이용할 수 있을 것으로 생각된다.

영어초록

Transgenic mice were generated by microinjecting a plasmid DNA containing the SV40 (simian virus 40) large T antigen (Tag) gene fused with mouse albumin promoter/enhancer sequences into fertilized one-cell mouse embryos. Among eleven founder transgenic animals, four developed hepatocellular carcinoma, two showed kidney cancer and one developed skin and brain tumors. Three stable transgenic lines, #1-2, #1-6 and #1-11 were established. Members of the lines #1-6 and #1-11 reproducibly developed liver tumors by 8 to 10 weeks of age but did not exhibit any phenotypic changes in other tissues. Histological changes leading to liver tumor formation occurred with predictable kinetics and could be classified into three distinct stages; (a) newborn to 3 weeks of age, characterized by hyperplastic hepatocytes with reduced amounts of cytoplasm without any nuclear alterations, (b) between 4 to 8 weeks of age, characterized by diffuse liver cell dysplasia without observable tumor nodules, and (c) 9 weeks of age and thereafter, characterized by hepatocellular carcinomas in the background of extensive liver dysplasia. Metastasis to the lung from a liver carcinoma was observed in #1-11 founder animal. This transgenic mouse system displays similarities with human liver cancers in a number of aspects and provides a useful model for the study of molecular events involved in hepatocarcinogenesis.

참고자료

· 없음