생화학실험 만점(A+) 실험 보고서(레포트) 7. plasmid DNA electroporesis

소개

생화학실험 만점(A+) 실험 보고서(레포트) 7. plasmid DNA electroporesis 관련 리포트입니다.

목차

1. 실험 목적

2. 실험 재료 및 기구

3. 방법

4. 실험 결과

5. 실험 원리(배경) 및 실험 고찰
가. 실험 원리(배경)
나. 실험 고찰

6. 참고 문헌

본문내용

1. 실험 목적:
박테리아로부터 분리한 plasmid DNA를 agarose gel 전기영동을 통해 확인한다.

2. 실험 재료 및 기구:
Plasmid DNA, Power supply, 전기영동 장치, 마이크로 피펫과 팁 ( Micropipette & Tip 20, 1.5ml tube ( EP tube ) 1조 당 1개, DNA loading dye, DNA staining solution, 100 ml 삼각플라스크, 아가로즈, 아가로즈 겔 트레이, 1 X TAE buffer, UV illuminator

3. 방법
① 아가로스 겔 농도를 결정한다. (0.8%의L size agarose gel)
50 mL ( 1X TAE buffer ) × 0.8% (gel concentration) = 0.4 g 이므로, 0.4g의 agarose를 40 mL의 1X TAE buffer에 용해한다.
② 전자레인지로 가열하여 agarose를 완전히 용해한다.
③ Agarose gel buffer를 약 60℃ 정도까지 식힌다.
④ 적당한 온도로 식힌 agarose gel buffer에 RedSafe 5ul 넣은 후 잘 섞어주고 gel tray에 부어준다.
(Gel 안에 공기가 들어가지 않도록 살며시 따라 넣어야 한다.)
⑤ Gel 용액이 굳기 전에 gel tray에 comb을 세팅한다.
⑥ 제작한 agarose gel을 gel tray째로 전기영동 장치에 넣는다.
⑦ Plasmid DNA를 천천히 loading하고 상부를 닫고 voltage를 걸어 전기영동을 시작한다.
⑧ 전기영동이 완료된 후, UV illuminator을 이용하여 결과를 확인한다.

참고자료

· 신경옥, ”생화학 실험”, 국내서 단행본, 서울: 파워북, 2014, p.126-133
· 이종호, “의생명과학 실험서. 상권”, 국내서 단행본, 서울 : 라이프사이언스, 2021, p.4-11, 22-24