세포배양, DNA, RNA 추출

소개

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목차

1. Introduction

2. Materials and methods
2.1. Cell culture
2.2. Genomic DNA isolation
2.3. Total RNA extraction

3. Results
3.1. Cell culture
3.2. genomic DNA isolation
3.3. 세포 total RNA extraction

4. 논의

참고문헌

본문내용

세포 배양(Cell culture)은 일반적으로 자연환경 외부의 통제된 조건에서 세포가 성장하는 과정의 총칭이다. 세포는 살아 있는 조직에서 분리된 후 제어된 조건에서 후속적으로 유지되어야 한다. 이러한 조건은 각 세포 유형에 따라 다르지만, 일반적으로 필수 영양소(아미노산, 탄수화물, 비타민, 무기질), 성장인자, 호르몬, 이산화탄소, 산소를 공급하는 기질 또는 배지가 있는 적합한 용기로 구성된다. 이는 물리화학적 환경(완충용액, 삼투압, 온도)을 조절할 수 있게 설계되었다. 대부분의 세포는 단층으로 형성하기 위해 표면 또는 인공 기질이 필요하지만, 어떤 세포는 현탁액 배양으로 배지에 자유롭게 떠서 성장할 수 있다. 대부분의 세포 수명은 유전적으로 결정되지만, 일부 배양 세포는 최적의 조건이 제공되면 무한정 재생되도록 변환되기도 한다[1]. 동물세포 배양은 초대배양과 계대배양(subculture)이 있다. 이 중 실험에서는 계대 배양을 하였다. 동물로부터 분리한 세포를 반복하여 배양하면 세포의 수명이 다하여 사멸하는 경우가 대부분이지만 일부 세포는 계속하여 증식하며 그 세포 본래의 특성을 유지한다. 이러한 세포는 세포주(cell line)를 형성하며 이 세포주는 무한대로 증식이 가능하고 균일한 세포 성질을 가지므로 고유 번호를 부여받아 세포 은행에 동결 보존되어 그 세포주를 필요로 하는 사용자에게 공급한다. 계대배양은 세포증식 방법의 하나로, 5∼7일마다 주기적으로 새로운 배지에 이식시키는 것을 말한다. 이렇게 해서 균주를 보존하고 세포의 대를 이어가는 식으로 배양한다. 동물세포에서 계대배양을 하는 이유는 동물세포의 경우 밀도의존성에 의해 배지 내에서 일정 밀도 이상을 차지하게 되는 경우 자라지 않기에, 계대배양을 통해 밀도를 유지시켜 쾌적한 환경을 제공하고, 넘치는 세포를 다른 배지로 이동시킴으로써 총량을 증가시킬 수 있다[2].
이번 실험과 마찬가지로 대부분 연구에서 불멸화 된 세포를 사용하고 있다.

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