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[생명공학] CD34+ HSC isolation from umbilical cord blood, mixed lymphocyte reaction

"[생명공학] CD34+ HSC isolation from umbilical cord blood, mixed lymphocyte reaction"에 대한 내용입니다.
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최초등록일 2023.03.14 최종저작일 2022.03
생명공학 세포공학 CD34 HSC
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[생명공학] CD34+ HSC isolation from umbilical cord blood, mixed lymphocyte reaction
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    소개

    "[생명공학] CD34+ HSC isolation from umbilical cord blood, mixed lymphocyte reaction"에 대한 내용입니다.

    목차

    1. Introduction
    2. Mixed Lymphocyte Reaction(MLR)
    3. Method
    4. Mixed Lymphocyte Reaction(MLR)
    5. Discussion

    Reference

    본문내용

    HSC(Hematopoietic Stem Cell)로 인체 내 존재하는 모든 혈액 세포로 분화가 가능한 줄기세포이다. 혈액의 세포들은 산소를 운반하는 Erythrocytes뿐만 아니라 T cell, B cell과 같은 세포들도 포함하기 때문에 생존유지에 꼭 필요하다. HSC는 자가 복제할 수 있고 혈액 세포에 대하여 방대한 분화능을 갖고 있기때문에 혈액의 구성성분을 항상 제때 생산할 수가 있다.
    HSC의 분화능에 대해서 좀 더 살펴보면 어떤 세포로 분화가 될지는 몸 속에 signal에 의한 특정 유전자 발현 및 단백질 생산이 조절되고 이에 따라 세포의 운명이 결정되게 된다. 유전자의 발현 정도는 세포의 분화 단계에 따라 달라지게 되고 우리는 그 발현 정도를 확인하여 세포의 분화를 확인할 수도 있다. 이렇게 세포의 분화를 확인할 수 있는 gene을 marker로 볼 수 있다. 이를 이용하면 특정 유전자를 발현시키는 signal을 인위적으로 제공하여 세포의 분화를 유도할 수도 있다.

    참고자료

    · Fischer, K., Voelkl, S., Heymann, J., Przybylski, G. K., Mondal, K., Laumer, M., ... & Mackensen, A. . Isolation and characterization of human antigen-specific TCRαβ+ CD4-CD8-double-negative regulatory T cells. Blood, 105(7), 2828-2835. 2005
    · https://www.rndsystems.com/products/magcellect-tm-cell-selection-kits-reagents
    · Parish, C. R.. Fluorescent dyes for lymphocyte migration and proliferation studies. Immunol. Cell Biol., 77(6), 499-508.1999
    · Quah, B. J., & Parish, C. R. New and improved methods for measuring lymphocyte proliferation in vitro and in vivo using CFSE-like fluorescent dyes. Journal of immunological methods, 379(1-2), 1-14. 2012

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    • 1. CD34+ HSC isolation from Umbilical Cord Blood
      CD34+ hematopoietic stem cells (HSCs) isolated from umbilical cord blood (UCB) are an important source of stem cells for regenerative medicine and cell-based therapies. The isolation of these cells is a critical step in the development of such therapies. The CD34 antigen is a well-established marker for identifying and isolating HSCs from various sources, including UCB. The process of CD34+ HSC isolation from UCB typically involves density gradient centrifugation to enrich for mononuclear cells, followed by immunomagnetic separation or flow cytometry to specifically isolate the CD34+ cell population. This allows for the purification and expansion of these cells for further research and clinical applications. The ability to efficiently and reliably isolate CD34+ HSCs from UCB is an important advancement in the field of stem cell biology and regenerative medicine.
    • 2. Mixed Lymphocyte Reaction (MLR)
      The Mixed Lymphocyte Reaction (MLR) is a widely used in vitro assay to assess the alloreactive potential of T cells. In this assay, T cells from one individual (responder) are co-cultured with antigen-presenting cells (APCs) from another individual (stimulator), typically with major histocompatibility complex (MHC) differences. This interaction triggers the activation and proliferation of the responder T cells, which can be measured by various methods, such as thymidine incorporation or flow cytometry. The MLR is a valuable tool for evaluating the immunogenicity of cells or tissues, as well as for studying the mechanisms of allorecognition and T cell-mediated immune responses. It has applications in transplantation immunology, autoimmunity, and the development of cell-based therapies. The MLR provides important insights into the complex interplay between the immune system and allogeneic cells, which is crucial for understanding and improving the success of various clinical interventions.
    • 3. CD34 protein
      The CD34 protein is a transmembrane glycoprotein that is widely used as a marker for hematopoietic stem and progenitor cells (HSPCs). CD34 is expressed on the surface of various cell types, including HSPCs, endothelial progenitor cells, and certain types of leukemia cells. The CD34 antigen plays a crucial role in the regulation of cell adhesion, migration, and differentiation, making it an important target for the isolation and characterization of HSPCs. The expression of CD34 is often used to identify and enrich for HSPCs from various sources, such as bone marrow, peripheral blood, and umbilical cord blood, for use in cell-based therapies and regenerative medicine applications. Additionally, the CD34 marker is valuable for the diagnosis and monitoring of hematological malignancies, as its expression patterns can provide important information about the disease state and response to treatment. Overall, the CD34 protein is a widely recognized and extensively studied marker that has become an essential tool in the field of stem cell biology and clinical hematology.
    • 4. CFSE (Carboxyfluorescein succinimidyl ester)
      CFSE (Carboxyfluorescein succinimidyl ester) is a fluorescent dye that is widely used in cell biology and immunology research to track cell division and proliferation. CFSE is a cell-permeant dye that binds to intracellular proteins, and it is equally distributed between daughter cells during cell division. This allows for the visualization and quantification of cell division by flow cytometry, as the fluorescence intensity of CFSE-labeled cells decreases with each cell division. The CFSE assay is particularly useful for studying the proliferative responses of various cell types, such as T cells, B cells, and stem cells, in response to different stimuli or environmental conditions. It has applications in areas such as immunology, stem cell biology, and cancer research, where understanding the dynamics of cell division and proliferation is crucial for understanding disease pathogenesis and developing effective therapies. The CFSE assay is a powerful and versatile tool that provides valuable insights into the complex cellular processes underlying immune responses, tissue regeneration, and disease progression.
    • 5. Antibody-coupled magnetic beads
      Antibody-coupled magnetic beads are a widely used tool in cell biology and biotechnology for the isolation, purification, and enrichment of specific cell populations or biomolecules. These beads are typically composed of a magnetic core coated with a polymer matrix, to which specific antibodies or other ligands are covalently attached. When a cell suspension or a sample containing the target molecule is incubated with the antibody-coupled magnetic beads, the target cells or molecules bind to the immobilized antibodies. The magnetic properties of the beads allow for the separation and isolation of the target cells or molecules using a magnetic field, without the need for complex and time-consuming centrifugation or other separation techniques. This method is highly versatile and can be used to isolate a wide range of cell types, including stem cells, immune cells, and cancer cells, as well as specific proteins, nucleic acids, and other biomolecules. The use of antibody-coupled magnetic beads has become an essential tool in various fields, such as cell therapy, diagnostics, and biotechnology, due to its efficiency, specificity, and ease of use.

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      Ai 리뷰
      CD34+ HSC 분리와 MLR 실험에 대한 상세한 프로토콜과 이론적 배경을 제공하고 있으며, 관련 핵심 기술들에 대한 심도있는 분석이 돋보입니다.

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