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DNA 제한효소2025.01.151. 제한효소 제한효소는 세균이 박테리오파지의 공격을 받으면 생산하는 효소로 이중 나선의 DNA의 특정한 염기서열을 인식해 그 부분의 절단에 있어 촉매작용을 하는 효소이다. 대부분의 제한효소는 인식자리(recognition site) 또는 제한 자리(restriction site)라는 특정한 염기서열이 있는 자리에서 DNA를 절단한다. 제한효소는 회문이라는 양 사슬의 5'부터 3' 방향으로 똑같은 서열을 가진 DNA의 부위를 인식해 작용한다. 제한효소가 DNA를 절단하면 이중 가닥 중 한 가닥이 돌출된 형태를 띠는데 이를 점착 말단...2025.01.15
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형질전환 실험보고서2025.05.041. 형질전환 형질전환은 외부에서 만들어진 plasmid를 plasmid가 없는 원핵 세포 cell에 넣어 그 원핵 세포가 본래 성질과는 다른 새로운 유전형질을 나타내게 하여 삽입한 plasmid를 대량으로 키우는 과정이다. 형질전환은 폐렴구균을 통해 DNA가 유전물질임을 PCR과 클로닝 등의 방법으로 증명했다. 인슐린의 경우 처음에는 돼지에게서 추출했지만 많은 수요에 비해 공급은 원활하지 못 했고 깨끗하지 않을 수도 있다는 의견 때문에 중지되었다. 그 후, 인간에게서 인슐린을 만드는 단백질(염기서열)을 찾아내어 인슐린을 공급할 방...2025.05.04
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아주대학교 A+생명 실험 DNA추출2025.01.121. 플라스미드 DNA 추출 이번 실험에서는 원심분리와 다섯가지의 Buffer를 이용하여 플라스미드 DNA를 추출해냈습니다. 추출한 플라스미드 DNA를 아가로스 겔 전기영동을 통해 확인한 결과, Supercoiled 플라스미드 DNA를 확인할 수 있었습니다. Supercoiled 플라스미드 DNA는 플라스미드 DNA를 분리한 후 가장 흔하게 보이는 구조이며, 크기는 약 2.0kb, DNA Mass는 52ng으로 나타났습니다. 2. 원핵세포와 진핵세포의 차이 원핵세포와 진핵세포는 구조와 구성 요소에 차이가 있기 때문에 유전자를 추출할...2025.01.12
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생화학 실험/실습 보고서 (DNA Gel electrophoresis)2025.01.231. 제한효소 제한효소는 DNA의 특정한 염기배열을 식별하고 이중사슬을 절단하는 엔도뉴클레아제로서 재조합 DNA를 만들기 위해서 사용하는 특수한 효소이다. 제한효소의 종류에는 1형, 2형, 3형, 4형, 5형 등이 있으며, 각각 인식하는 염기서열과 절단 방식이 다르다. 하나의 플라스미드는 여러 제한효소에 의해 자를 수 있다. 2. 전기영동 Agarose gel에서의 DNA pattern은 smear, 용해되지 않은 물질과 고분자량의 DNA, RNA cloud, supercoiled plasmid, relaxed 또는 nicked c...2025.01.23
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제한효소를 이용한 DNA 절단 및 전기영동법과 PCR에 의한 DNA 분리 및 확인2025.01.071. PCR PCR의 기본 원리는 DNA를 단일가닥으로 열변성시킨 후 올리고뉴클레오티드를 결합시키고 DNA 중합효소로 DNA를 합성하는 과정을 반복하여 DNA를 증폭하는 것입니다. PCR에 필요한 주요 요소로는 주형 DNA, 시발체, dNTPs, Taq 중합효소, MgCl2 등이 있으며, 이들의 농도와 반응 조건을 최적화하는 것이 중요합니다. PCR 산물은 전기영동으로 확인할 수 있습니다. 2. 전기영동 전기영동은 DNA 분자의 크기와 전하에 따라 이동 속도가 달라지는 원리를 이용하여 DNA 단편을 분리하는 기술입니다. 아가로스 겔...2025.01.07
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Plasmid DNA의 제한효소 절단 및 전기영동2025.01.221. 플라스미드 DNA 플라스미드는 vector의 한 종류로, 염색체와는 독립적으로 존재하는 원형의 DNA이다. 스스로 복제할 수 있고, 유전될 수 있으며 외부의 유전자를 포함해 전달될 수 있다. 2. 제한효소 제한효소는 DNA를 자를 수 있는 효소를 말하는데, DNA 분자의 특정한 염기서열에 결합해 DNA를 절단한다. 이렇게 절단된 DNA 조각은 전기영동을 통해 분리될 수 있다. 3. 전기영동 전기영동은 슬러리 내의 전하를 가진 입자들에 전기를 가하게 되면 각자 가진 전하의 반대되는 극성을 띠는 쪽으로 이동하는 현상을 말한다. 이...2025.01.22
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DNA 결합효소 실험 결과 보고서2025.01.221. DNA 제한효소 실험에서 HindⅢ와 EcoRⅠ 제한효소를 사용하여 Lambda DNA를 절단하였다. 이론적인 digestion 결과와 실제 실험 결과를 비교하였으며, DNA Ladder marker를 이용하여 DNA 크기를 추정하였다. 또한 DNA 밴드의 끌림 현상과 DNA 밴드의 굵기에 대해 고찰하였다. 2. 전기영동 실험 결과를 확인하기 위해 아가로스 겔 전기영동을 수행하였다. 제한효소를 사용하지 않은 경우와 HindⅢ, EcoRⅠ 각각 사용한 경우, 그리고 두 효소를 혼합하여 사용한 경우의 결과를 비교하였다. 전기영동 ...2025.01.22
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프로테오믹스 기법을 이용한 파골세포 활성 단백질 탐색2025.01.121. 파골세포의 활성 조절 파골세포는 뼈를 분해하는 역할을 하며, 이들의 활성은 호르몬 변화나 염증에 의해 촉진됩니다. 연구 결과, 파골세포 내의 CK-B 단백질이 이 세포의 활성을 조절하며, CK-B 단백질을 억제하면 뼈의 파괴를 막을 수 있다는 사실이 밝혀졌습니다. 2. 프로테오믹스 기법 프로테오믹스는 수백, 수천 개의 단백질을 한꺼번에 분석할 수 있는 방법입니다. 이를 위해 단백질 분리 정제 기법, 단백질 성상 분석 방법, 생물정보학을 이용한 정보 통합 등의 기술이 사용됩니다. 이를 통해 복잡한 생명 현상을 단백질 수준에서 이...2025.01.12
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PAGE를 이용한 단백질의 검정2025.05.131. 단백질의 구조와 기능 단백질은 아미노산이라는 작은 구성인자의 중합체이며, 1차 구조, 2차 구조, 3차 구조, 4차 구조로 이루어져 있다. 단백질은 효소, 호르몬, 항체, 수송 단백질, 수용체 단백질, 운동 단백질, 구조 단백질 등 다양한 기능을 수행한다. 단백질은 pH, 염의 농도, 온도 등의 변화에 의해 변성될 수 있다. 2. 전기영동을 이용한 단백질 분리 전기영동은 전기적 힘을 이용하여 단백질과 같은 큰 분자들을 gel에서 이동시켜 크기에 따라 분리하는 기술이다. SDS-PAGE는 SDS와 polyacrylamide를 이...2025.05.13
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DNA에 대한 이해와 ALDH2 추출 및 증폭 실험 _ 과학 연구 소논문 (서울대 학생 첨삭)2025.01.181. DNA 구조와 복제 DNA는 인산, 디옥시리보스, 염기로 구성되는 뉴클레오타이드의 결합체이며, 이중 나선 구조를 갖는다. DNA 복제 과정에서 헬리케이스, 프라이머, DNA 중합효소 등이 관여하여 새로운 DNA 가닥이 합성된다. 2. DNA 추출 DNA 추출을 위해 생체막을 용해하고 단백질을 제거하며, 에탄올 침전 등의 과정을 거쳐 순수한 DNA를 얻을 수 있다. 3. 젤 전기영동 젤 전기영동은 DNA, RNA, 단백질 등의 생체 물질을 분리하는 기술로, 전기장 내에서 물질의 크기에 따라 이동 속도가 다른 것을 이용한다. DN...2025.01.18
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